来源于辣椒疫霉的效应子蛋白及其编码基因与应用制造技术

蛋白质，是如下（a）或（b）或（c）：（a）由序列表中序列1的第19?476位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（c）将（a）或（b）所限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且具有效应子功能的蛋白质。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种来源于辣椒疫霉的效应子蛋白及其编码基因与应用。本专利技术所提供的蛋白质，是如下（a）或（b）或（c）：（a）由序列表中序列1的第19-476位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（c）将（a）或（b）所限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且具有效应子功能的蛋白质。实验证明，本专利技术所提供的蛋白质有效地参与了辣椒疫霉侵染辣椒寄主过程及其诱导植物组织细胞死亡乃至使受害部位产生明显坏死症状的功能。本专利技术对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息，以及建立卵菌病害的综合防治技术策略都有重要意义。【专利说明】来源于辣椒疫霉的效应子蛋白及其编码基因与应用
本专利技术属于分子生物学领域，涉及一种来源于辣椒疫霉的效应子蛋白及其编码基因与应用。
技术介绍
效应子蛋白(effector)是病原物在侵入寄主过程中产生的一类能够克服寄主防御系统的分子。在侵染过程中，病原物以效应子蛋白攻克寄主的防御系统，一方面能够减弱寄主的抵抗力便于其成功侵入，另一方面还能够利用寄主的养分用于自身繁殖。许多病原物都能分泌效应子蛋白，比如细菌、真菌、卵菌及线虫中都发现了此类蛋白。病原物中存在多类效应子，包括1?4^，081?斤，5(^，糖类水解酶、果胶酶、几丁质酶以及酯酶等。其中NLP蛋白基因在卵菌、真菌、细菌中普遍存在。该类基因在细菌真菌基因组内数量较少，而在卵菌基因组中数量众多，多以基因家族形式存在。据分析该类蛋白在进化关系很远的物种之间均有分布并且同属种病原菌的NLP基因数量及结构特性也存在很大差别，由此推理NLP蛋白功能具多样性特点。不同物种的NLP效应子蛋白氨基酸序列高度保守，中间部分具GHRHDffE基序，序列长度在600-800bp之间，编码氨基酸长度一般为300多个氨基酸。据报道多种植物受NLP蛋白处理后表现为乙烯产生，MAP激酶活化，植保素合成，PR基因诱导表达，胞质Ca2+释放以及多种双子叶植物的叶片过敏反应等。然而也有报道指明NLP蛋白是植物的感病因子，可诱导植物抗逆基因表达。例如棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)效应子基因的表达产物能使棉花、烟草、拟南芥叶片萎蔫，说明效应子是棉花与病原物互作过程中重要的诱导因子。但是对两种细菌Erwinia carotovora subsp.Carotovora和E.carotovora subsp.atroseptica的效应子蛋白研究发现,将菌体内效应子基因敲除后，菌体对马铃薯的侵染毒性大大下降。尽管目前研究了这类蛋白对植物的过敏反应，但是该类蛋白的功能及在植物中的作用模式还是未知的，更没有足够的证据说明卵菌中效应子蛋白是否对疫霉毒性起到重要作用。辣椒疫霉(Phytophthora capsici)属于卵菌纲，是一类区别于真菌的真核生物。除了引起辣椒疫病还能够引起多种茄`科及葫芦科植物疫病。辣椒疫病是一种土传植物病害，在世界范围内都有分布，且发病快流行广，易造成严重损失。传统的化学药剂大量使用不仅使病原物产生了药物抗性，而且造成的农药残留更是严重威胁着人类的生存环境。因此开展与致病性变异相关的基因功能分析及其关键基因的研究，对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息，以及建立卵菌病害的综合防治技术策略都有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种来源于辣椒疫霉的效应子蛋白及其编码基因与应用。本专利技术所提供的效应子蛋白，具体来源于致病性辣椒疫霉(Phytophthoracapsici)菌株phycl2,名称为Phcnlpl,具体为如下Ca)或(b)或(C):(a)由序列表中序列I的第19-476位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)由序列表中序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(c)将(a)或(b)所限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且具有效应子功能的蛋白质。为了便于Phcnlpl蛋白的纯化，可在由序列表中序列I的氨基酸残基序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如下表所示的标签。表:标签的序列【权利要求】1.蛋白质，是如下(a)或(b)或(C): Ca)由序列表中序列I的第19-476位所示的氨基酸序列组成的蛋白质； (b)由序列表中序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质； (c)将(a)或(b)所限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且具有效应子功能的蛋白质。2.编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子。3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于:所述核酸分子是编码权利要求1所述蛋白质的基因；所述基因是如下I)至4)中任一所述的DNA分子: 1)序列表中序列2的第55-1428位所示的DNA分子； 2)序列表中序列2所示的DNA分子； 3)在严格条件下与I)或2)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子; 4)与I)或2)或3)限定的DNA分子具有90%以上同源性且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。4.含有权利要求2或3所述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于:所述重组载体为重组表达载体或重组克隆载体。`6.根据权利要求5所述的重组载体，其特征在于:所述重组表达载体中，启动所述基因的转录的启动子为35S启动子。7.权利要求1所述的蛋白质，或权利要求2或3所述的核酸分子，或权利要求4-6中任一所述的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在如下任一中的应用: (al)诱导植物组织细胞死亡； (a2)制备用于诱导植物组织细胞死亡的产品。8.一种用于诱导植物组织细胞死亡的产品，其活性成分为权利要求1所述的蛋白质，或权利要求2或3所述的核酸分子，或权利要求4-6中任一所述的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。9.根据权利要求7所述的应用，或权利要求8所述的产品，其特征在于:所述植物为双子叶植物或单子叶植物。10.根据权利要求9所述的应用或方法，其特征在于:所述双子叶植物为烟草。【文档编号】A01H5/00GK103724408SQ201410000976【公开日】2014年4月16日 申请日期:2014年1月2日 优先权日:2014年1月2日 【专利技术者】冯宝珍, 李培谦 申请人:运城学院本文档来自技高网...

【技术保护点】
蛋白质，是如下（a）或（b）或（c）：（a）由序列表中序列1的第19?476位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（c）将（a）或（b）所限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且具有效应子功能的蛋白质。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：冯宝珍，李培谦，
申请(专利权)人：运城学院，
类型：发明
国别省市：