前列腺相关抗原及基于疫苗的免疫治疗疗法制造技术

本发明专利技术提供(a)分离的免疫原性PAA多肽；(b)编码免疫原性PAA多肽之分离的核酸分子；(c)包含免疫原性PAA多肽或编码免疫原性PAA多肽之分离的核酸分子的疫苗组合物；(d)与使用多肽、核酸分子及组合物相关之方法；及(e)基于疫苗之免疫治疗疗法，其包括共同施用疫苗与免疫抑制细胞抑制剂及免疫效应细胞增强剂之组合。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术是申请日为2013年4月29日，申请号为201380023480.7，标题为“前列腺相关抗原及基于疫苗的免疫治疗疗法”的专利申请的分案申请。对相关申请之参考本申请要求2012年5月4日申请之美国临时申请第61/642,844号之权益，该申请以全文引用的方式并入本文中。对序列表之参考本申请正与呈电子格式之序列表一起提交。序列表以名称为“PC71854ASEQLISTING_ST25.TXT”之.txt格式文档提供，其创建于2013年4月4日且大小为257KB。该.txt文档中所含之序列表为本说明书之一部分且以全文引用的方式并入本文中。
本专利技术大体上涉及免疫治疗且具体而言，涉及治疗或预防赘生性病症之疫苗及方法。现有技术在世界范围内，癌症为死亡之一个主要诱因。传统癌症管理疗法已成功地管理循环癌症及实体癌症之选择性群组。然而，许多肿瘤对传统方法具有抗性。近年来，已研究治疗癌症之免疫疗法，该方法包括通过在远离肿瘤之部位施用疫苗组合物来产生宿主源全身性肿瘤特异性主动免疫反应。已提出多种类型疫苗，包括含有分离之肿瘤相关抗原的疫苗。在全世界发达国家中，前列腺癌为第二最常诊断出之癌症且为人类之癌症相关死亡之第四主要诱因。已证明与正常对应物相比，前列腺癌细胞过度表达各种前列腺相关抗原(PAA)，诸如前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺特异性膜抗原(PSMA)及前列腺干细胞抗原(PSCA)。因此，此等抗原代表经由使用基于疫苗之免疫疗法诱导针对表达所述抗原之癌症之特异性免疫反应的可能标靶。(参看例如Marrari,A.,M.Iero等人,(2007).“Vaccinationtherapyinprostatecancer”.CancerImmunolImmunother56(4):429-45。)PSCA为123个氨基酸之膜蛋白。全长人类PSCA之氨基酸序列由SEQIDNO:21之氨基酸4-123组成。PSCA具有高度组织特异性且表达于超过85％前列腺癌样本上，其中表达量随着格里森分数(Gleasonscore)提高及雄激素非依赖性增强而增加。其表达于80-100％前列腺癌骨转移患者中。PSA为激肽释放酶样丝氨酸蛋白酶，其完全由前列腺之腺泡及导管衬层中之柱状上皮细胞产生。PSAmRNA翻译为具有261个氨基酸之非活性前原PSA前体。前原PSA具有24个额外残基，所述残基构成前区(信号多肽)及原多肽。原多肽之释放产生具有237个氨基酸之成熟细胞外形式，该形式具有酶活性。人类全长PSA之氨基酸序列提供于SEQIDNO:15中。PSA具有器官特异性，且因此，其由良性前列腺增生(BPH)组织、原发性前列腺癌组织及转移性前列腺癌组织之上皮细胞产生。PSMA，亦称为叶酸水解酶1(FOLH1)，由750个氨基酸组成。人类全长PSMA之氨基酸序列提供于SEQIDNO:1中。PSMA包括细胞质域(氨基酸1-19)、跨膜域(氨基酸20-43)及细胞外域(氨基酸44-750)。PSMA为表达于前列腺癌细胞表面上及新生血管上之II型二聚跨膜蛋白。其亦表达于正常前列腺细胞、脑、唾液腺及胆道系统上。然而，在前列腺癌细胞中，发现其表达量为正常组织的1000倍。其充分表达于诸如结肠癌、乳癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、肺癌、肾癌以及黑素瘤及肉瘤之多种其它实体肿瘤之新生血管上。因此，PSMA不仅被视为前列腺癌细胞特异性标靶，而且为其它癌症之全癌标靶。PSMA之表达似乎为前列腺癌之通用特征且其增强之表达与肿瘤侵袭有关。PSMA表达在高等级肿瘤、转移性病变及雄激素非依赖性疾病中最高。虽然已鉴别许多肿瘤相关抗原且已研究许多此等抗原作为基于蛋白质或基于DNA之疫苗用于治疗或预防癌症，但迄今大部分临床试验未能产生治疗性产品。开发癌症疫苗之挑战之一在于癌症抗原通常来源于自身且因此具有不良免疫原性，此系因为免疫系统经自身调节而不识别自身蛋白质。因此，需要一种可增强癌症疫苗之免疫原性或治疗效应的方法。已研究许多方法以便增强免疫原性或增强癌症疫苗之抗肿瘤效力。此种方法之一包括使用各种免疫调节剂，诸如TLR激动剂、TNFR激动剂、CTLA-4抑制剂及蛋白激酶抑制剂。Toll样受体(TLR)为表达于造血细胞及非造血细胞上之1型膜受体。在TLR家族中，已鉴别至少11个成员。此等受体之特征在于其能够识别病原性生物体所表达之病原体相关分子模式(PAMP)。已发现触发TLR将通过增强细胞因子产生、趋化因子受体表达(CCR2、CCR5及CCR7)及协同刺激分子表达而引起深远炎症反应。因而，此等受体在先天免疫系统中对随之而来之后天免疫反应的极性发挥控制作用。在TLR中，已广泛研究TLR9在免疫反应中之功能。刺激TLR9受体通过增加促炎性细胞因子之产生及协同刺激分子对T细胞之呈递而将抗原呈递细胞(APC)导向激活强效TH1主导型T细胞反应。发现CpG寡核苷酸，即TLR9配体，为一类强效免疫刺激因子。已针对多种肿瘤模型在小鼠中测试CpG疗法，且一致显示促进肿瘤抑制或消退。细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)为免疫球蛋白超家族之成员且表达于辅助T细胞表面上。CTLA-4为CD28依赖性T细胞活化之负调节剂，且充当适应性免疫反应之抑制检查点。类似于T细胞协同刺激蛋白质CD28，CTLA-4结合抗原呈递细胞上之CD80及CD86。CTLA-4向T细胞传递抑制信号，而CD28传递刺激信号。针对人类CTLA-4之人类抗体已描述为许多疾病病状中之免疫刺激调节剂，诸如治疗或预防病毒性及细菌性感染以及用于治疗癌症(WO01/14424及WO00/37504)。各种临床前研究已显示单克隆抗体所致之CTLA-4阻断可增强针对免疫原性肿瘤之宿主免疫反应且甚至可排斥已确立之肿瘤。已在治疗各种类型实体肿瘤之临床试验中研究两种完全人类抗人类CTLA-4单克隆抗体(mAb)，即伊匹单抗(ipilimumab，MDX-010)及曲美目单抗(Tremelimumab，亦称为CP-675206)。肿瘤坏死因子(TNF)超家族为接合特定同源细胞表面受体TNF受体(TNFR)超家族之一组细胞因子。肿瘤坏死因子超家族之成员通过配体介导之三聚合而起作用，从而募集若干个细胞内接附子以活化多个信号转导路径，诸如细胞凋亡、NF-kB路径、JNK路径，以及免疫及炎症反应。TNF超家族之实例包括CD40配体、OX40配体、4-1BB配体、CD27、CD30配体(CD153)、TNF-α、TNF-β、RANK配体、LT-α、LT-β、GITR配体及LIGHT。TN本文档来自技高网...

【技术保护点】
免疫效应细胞增强剂在制备用于增强疫苗之治疗效应以便治疗哺乳动物之赘生性病症的药物中的用途，其中所述药物与免疫抑制细胞抑制剂联合施用。

【技术特征摘要】
2012.05.04 US 61/642,8441.免疫效应细胞增强剂在制备用于增强疫苗之治疗效应以便治疗哺乳动物之赘生性
病症的药物中的用途，其中所述药物与免疫抑制细胞抑制剂联合施用。
2.免疫效应细胞增强剂在制备用于增强疫苗之免疫原性以便治疗哺乳动物之赘生性
病症的药物中的用途，其中所述药物与免疫抑制细胞抑制剂联合施用。
3.如权利要求1或2之用途，其中该哺乳动物为人类。
4.如权利要求3之用途，其中该赘生性病症为癌症。
5.如权利要求4之用途，其中该免疫抑制细胞抑制剂选自蛋白激酶抑制剂、COX-2抑制
剂或PDE5抑制剂；且其中该免疫效应细胞增强剂选自CTLA-4抑制剂、CD40激动剂、TLR激动
剂、4-1BB激动剂、OX40激动剂、GITR激动剂、PD-1拮抗剂或PD-L1拮抗剂。
6.如权利要求5之用途，其中：
1)该蛋白激酶抑制剂选自如下一组：伊马替尼(imatinib)、索拉非尼(sorafenib)、拉
帕替尼(lapatinib)、扎克替玛(zactima)、MP-412、达沙替尼(dasatinib)、来他替尼
(lestaurtinib)、拉帕替尼(lapatinib)、苹果酸舒尼替尼(sunitinibmalate)、阿西替尼
(axitinib)、埃罗替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、博索替尼(bosutinib)、坦罗莫
司(temsirolismus)及尼勒替尼(nilotinib)；
2)该CTLA-4抑制剂选自如下一组：伊匹单抗(ipilimumab)及曲美目单抗
(Tremelimumab)；
3)该CD40激动剂为选自如下一组的抗CD40抗体：G28-5、mAb89、EA-5、S2C6、CP870893及
达西珠单抗(dacetuzumab)；且
4)该TLR激动剂为选自如下一组的CpG寡核苷酸：CpG24555、CpG10103、CpG7909及
CpG1018。
7.如权利要求6之用途，其中该免疫抑制细胞抑制剂为蛋白激酶抑制剂且其中该免疫
效应细胞增强剂为CTLA-4抑制剂。
8.如权利要求7之用途，其中该蛋白激酶抑制剂选自索拉非尼、达沙替尼、伊马替尼、阿
西替尼或苹果酸舒尼替尼，且其中该CTLA-4抑制剂为曲美目单抗。
9.免疫效应细胞增强剂在制备用于治疗人类赘生性病症的药物中的用途，其中所述药
物与疫苗和免疫抑制细胞抑制剂联合施用，且其中该疫苗能够引发针对与该赘生性病症相
关之肿瘤相关抗原之免疫反应。
10.如权利要求9之用途，其中该赘生性病症为前列腺癌。
11.如权利要求10之用途，其中该疫苗包含编码选自如下一组的免疫原性PSMA多肽之
核酸分子：
1)由SEQIDNO:9之氨基酸序列组成的多肽；
2)由SEQIDNO:3之氨基酸4-739组成的多肽；
3)由SEQIDNO:5之氨基酸4-739组成的多肽；及
4)由SEQIDNO:7之氨基酸4-739组成的多肽。
12.如权利要求11之用途，其中该分离的核酸分子包含选自如下一组的核苷酸序列：
1)包含SEQIDNO:4之核苷酸10-2217的核苷酸序列；
2)包含SEQIDNO:6之核苷酸10-2217的核苷酸序列；
3)包含SEQIDNO:8之核苷酸10-2217的核苷酸序列；及
4)包含SEQIDNO:10之核苷酸10-2217的核苷酸序列，或任一所述核苷酸序列之简并
变体。
13.如权利要求11之用途，其中该疫苗进一步包含编码免疫原性PSA多肽之核酸分子且
其中该免疫原性PSA多肽选自如下一组：
1)包含SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·J·宾德，H·K·赵，M·R·德迈尔，K·U·约斯，B·G·皮尔斯，J·T·谭，V·T·蔡，
申请(专利权)人：辉瑞公司，
类型：发明
国别省市：美国;US