【技术实现步骤摘要】
—种基于磁分罔的HBsAg核酸适体筛选方法
本专利技术涉及核酸适体筛选
，特别是一种以Fe3O4磁性纳米颗粒为固相载体进行HBsAg核酸适体筛选的方法。
技术介绍
磁性纳米颗粒(MNPs，简称磁珠)具有小尺寸效应、表面效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应等特点。其中，小尺寸效应使其表现出良好的磁响应性和超顺磁性，可以在恒定磁场下聚集和定位、在交变磁场下吸收电磁波产热；表面效应表现在其高的比表面积，从而表现出很高的表面活性，使其易于表面修饰及生物应用。近年来，由于其独特的理化性质和应用潜能而受到广泛关注，目前磁性纳米颗粒已成功应用于生物分离，蛋白质和酶的固定化，分子检测以及临床诊断与治疗等诸多领域。磁性纳米颗粒具有分离速度快、效率高、操作简单、易实现功能化、易实现自动化及不影响分离物质的活性等优越的物理化学性质和生物相容性。在这些磁性纳米颗粒中，Fe3O4是目前研究和应用最为广泛的一种，其制备方法包括共沉淀法，溶剂热法，微乳液法，热分解法等物理或化学方法，根据颗粒的需求不同可采取相应的不同方法。乙型病毒性肝炎是严重威胁人类健康的世界性疾病之一，由于...
【技术保护点】
一种基于磁分离的HBsAg核酸适体筛选方法，其特征在于，以Fe3O4磁性纳米颗粒为固相载体进行筛选，包括如下步骤：步骤一、制备Fe3O4磁性纳米颗粒，在所述Fe3O4磁性纳米颗粒表面包覆一层硅壳，得到Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒，再对Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒表面羧基化修饰，得到羧基化Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒；步骤二、对步骤一制备的羧基化Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒进行羧基活化，之后将活化的羧基化Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒与HBsAg偶联，得到偶联HBsAg的磁性纳米颗粒；步骤三、将步骤二制备的偶联HBsAg的磁性纳米颗粒通过SELEX技术筛选特...
【技术特征摘要】
1.一种基于磁分离的HBsAg核酸适体筛选方法，其特征在于，以Fe3O4磁性纳米颗粒为固相载体进行筛选，包括如下步骤: 步骤一、制备Fe3O4磁性纳米颗粒,在所述Fe3O4磁性纳米颗粒表面包覆一层娃壳,得到Fe3O4OSiO2磁性纳米颗粒，再对Fe3O4OSiO2磁性纳米颗粒表面羧基化修饰，得到羧基化Fe3O4OSiO2磁性纳米颗粒； 步骤二、对步骤一制备的羧基化Fe3O4OSiO2磁性纳米颗粒进行羧基活化，之后将活化的羧基化Fe3O4OSiO2磁性纳米颗粒与HBsAg偶联,得到偶联HBsAg的磁性纳米颗粒； 步骤三、将步骤二制备的偶联HBsAg的磁性纳米颗粒通过SELEX技术筛选特异识别HBsAg的核酸适体； 步骤四、将步骤三筛选出的产物进行克隆、测序，并对测序获得的HBsAg核酸适体进行二级结构分析预测。2.根据权利要求1所述的基于磁分离的HBsAg核酸适体筛选方法，其特征在于，步骤三所述SELEX技术筛选特异识别HBsAg的核酸适体，包括如下步骤:将偶联HBsAg的磁性纳米颗粒与随机单链DNA文库进行孵育，并加入tRNA进行竞争...
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