一种鉴别丹参药材或衍生品的方法技术

本发明专利技术涉及一种鉴别丹参药材或衍生品的方法，包括：1）对丹参药材或衍生品进行提取，得到含有活性成分组的丹参酮特征提取物和丹酚酸特征提取物；2）对所述丹参酮或丹酚酸特征提取物均进行IGD核磁共振碳谱指纹图谱检测，根据指纹图谱得到特征提取物中若干个活性成分特征峰峰强度；并用相同方式测定出所述各活性成分相应标准参照品的特征峰峰强度；3）通过定量分析手段得到所述标准参照品的绝对含量；4）利用所述特征峰峰强度的比值和所述绝对含量，计算出丹参药材或衍生品中各活性成分的含量及活性成分组的含量。本发明专利技术可以反映丹参中含有哪些丹参酮类和丹酚酸类化合物以及它们之间的比例，达到对丹参药材品种或衍生品质量鉴定的目的。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及，包括：1）对丹参药材或衍生品进行提取，得到含有活性成分组的丹参酮特征提取物和丹酚酸特征提取物；2）对所述丹参酮或丹酚酸特征提取物均进行IGD核磁共振碳谱指纹图谱检测，根据指纹图谱得到特征提取物中若干个活性成分特征峰峰强度；并用相同方式测定出所述各活性成分相应标准参照品的特征峰峰强度；3）通过定量分析手段得到所述标准参照品的绝对含量；4）利用所述特征峰峰强度的比值和所述绝对含量，计算出丹参药材或衍生品中各活性成分的含量及活性成分组的含量。本专利技术可以反映丹参中含有哪些丹参酮类和丹酚酸类化合物以及它们之间的比例，达到对丹参药材品种或衍生品质量鉴定的目的。【专利说明】
本专利技术属于天然药用植物的鉴别领域，具体地，涉及。
技术介绍
丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)是唇形科鼠尾草属植物丹参的干燥根及根莖，是我国常用传统中药之一。丹参归心、肝经，药性微寒，味苦、无毒，具有祛癖止痛、活血调经、养心除烦的功效。其活性成分可分为脂溶性成分和水溶性成分两部分。脂溶性成分主要为丹参酮类(主要是邻醌酮类、二萜醌类及其衍生物)化合物，具有扩张血管、改善微循环、抗菌消炎的作用。水溶性成分主要为丹酚酸类(多个丹参素和咖啡酸缩合体)，为治疗心脑血管疾病的活性成分。由于丹参酮类与丹酚酸类两部分极性相差较大，所以两种成分综合提取困难，相同的方法难以兼顾，需分别提取。定性鉴别上述两类成分或定量测定其某种活性成分含量，已成为评价丹参及其制剂质量的重要方法(例如中国药典2010版是对丹参药材中脂溶性成分丹参酮II A和水溶性成分丹酚酸B进行定性和定量分析)；这种针对单一成分进行定性、定量分析的质量检测模式不能有效控制中药材或衍生品的内在质量，无法满足当前对于客观有效地评价和控制丹参及其制剂质量的迫切要求。指纹图谱是目前国际公认的控制中药或天然药物质量最有效的方式。人们凭借实用的指纹图谱不仅可确认该产品的真伪，同时能判断其稳定性。目前，丹参药材及其制剂的指纹图谱研究工作，集中为HPLC指纹图谱、毛细管电泳指纹图谱(HPCE法)、近红外光谱法(IR)、高效液相色谱-质谱联用法(LC-MS)等。其中主流方法HPLC指纹图谱由于受非色谱条件(如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分比例、柱温、进样量、检测器灵敏度等)影响较大和需用标准品等等原因，重复性、和可行性均存在许多局限性；HPCE法虽以其高效、快速、简便且柱不易受污染而优于HPLC法，但仍存在重现性较差、线性范围窄和灵敏度较低等不足；单一 LC-MS分析方法由于中药复方的复杂性和缺乏标准品的现状，MS还有离子化程度和基质干扰等问题，通常不足以对多种成分进行准确的结构定性；IR采集过程中受环境变化影响较大且不易解析，重复性和可行性较差。I⑶核磁共振碳谱偶联(I⑶13C NMR coupling)指纹图谱技术，也叫反门控去偶核磁共振碳谱偶联指纹图谱技术，该技术是在已研究多年的核磁共振氢谱(1H NMR)指纹图谱技术的基础上联合其他技术(例如目前应用最广泛的高效液相(HPLC)指纹图谱技术)提出的一种新的非单一手段综合指纹图谱技术。丹参的品质不在于某个单一成分，其疗效是多个成分协同配比的结果。因此，建立不仅能控制丹参活性成分，而且能控制这些活性成分之比例的IGD核磁共振碳谱偶联指纹图谱势在必行。丹参药材或衍生品核磁共振碳谱偶联指纹图谱的研究与应用，不仅可以解决我国丹参药材鉴别和评价的难题，也为加强丹参药材或衍生品内在成分研究的系统化与标准化，实现与国际接轨提供了科学的保证。随着该技术在其他中药材或衍生品中的推广应用，该技术的重大科学价值必将日趋突出。
技术实现思路
为了解决现有技术的问题，本专利技术的目的是提供。为了实现上述目的，本专利技术提供的鉴别丹参药材或衍生品的方法，包括以下步骤:I)对丹参药材或衍生品进行提取，得到含有活性成分组的丹参酮特征提取物和丹酚酸特征提取物；2)对所述丹参酮特征提取物和丹酚酸特征提取物均进行IGD核磁共振碳谱指纹图谱检测，根据指纹图谱得到特征提取物中若干个活性成分特征峰峰强度；并用相同方式(IGD核磁共振碳谱指纹图谱)测定出所述各活性成分相应标准参照品的特征峰峰强度；3)通过定量分析手段得到所述标准参照品的绝对含量；4)利用所述特征峰峰强度(各活性成分特征峰峰强度及相应标准参照品的特征峰峰强度)的比值和所述绝对含量，计算出丹参药材或衍生品中各活性成分的含量及该类活性成分的总含量，即活性成分组的含量。其中，步骤I)中，从丹参药材或饮片中提取丹参酮特征提取物的方法，包括:取丹参药材或饮片粉碎，用6~10倍量90、5% (体积百分数)乙醇回流提取2~3次，滤液合并后减压浓缩，回收溶剂蒸干至粉末，即得丹参药材或饮片乙醇提取物；取上述丹参药材或饮片乙醇提取物回流提取或超声提取两遍，第一遍加入8~12倍量乙酸乙酯，7(T80°C下回流提取或5(T60°C下超声提取18~22min ;离心，沉淀后，第二遍加入8~12倍量乙酸乙酯，5(T60°C下回流提取或3(T40°C下超声提取18~22min，上清液合并后减压浓缩，回收溶剂至干，即得丹参酮特征提取物(CET )。进一步地，将丹参药材或饮片粉碎后，用6倍量95%乙醇回流提取。进一步地，第一遍回流提取或超声提取的条件为:加入10倍量乙酸乙酯，75°C下回流提取或55°C下超声提取20min。进一步地，第二遍回流提取或超声提取的条件为:加入10倍量乙酸乙酯，55°C下回流提取或35°C下超声提取20min。其中，步骤I)中，从丹参药材或饮片中提取丹酚酸特征提取物的方法，包括:取丹参药材或饮片粉碎，用6~10倍量759^95%乙醇(体积百分数)回流提取2~3次，滤液合并后减压浓缩，回收溶剂蒸干至浸膏；取上述浸膏超声提取两遍，第一遍加入8~12倍量乙酸乙酯，5(T60°C下超声提取2~3次，每次18~22min ;离心，沉淀后，第二遍加入8~12倍量乙酸乙酯，4(T50°C下超声提取18~22min ;沉淀后，再加水8~20倍水回流2~3次，每次28~32min，取出，即得丹酚酸特征提取物(CES )。进一步地，将丹参药材或饮片粉碎后，用6倍量909^95%乙醇回流提取2~3次。进一步地，第一遍超声提取的条件为:加入10倍量乙酸乙酯，55°C下超声提取疒3次，每次20min。进一步地，第二遍超声提取的条件为:加入10倍量乙酸乙酯，45°C下超声提取20mino进一步地，超声提取完毕，用水回流的条件为:加水8~20倍，溶解后回流2次，每次30mino其中，步骤2)中，对丹参酮特征提取物进行IGD核磁共振碳谱指纹图谱检测，溶解丹参酮特征提取物的溶剂为氘代氯仿(CDC13)、氘代丙酮(CD3CO CD3)或氘代二甲基亚砜(DMS0-d6)，优选CDCl3 ;丹参酮特征提取物和相应溶剂的质量体积比为55:1~65: l(mg:mL),优选60:1。其中，步骤2)中，对丹酚酸特征提取物进行IGD核磁共振碳谱指纹图谱检测，溶解丹酚酸特征提取物的溶剂为氘代甲醇(⑶30D)、氘代丙酮(⑶3co ra3)或氘代二甲基亚砜(DMS0-d6)，优选CD3OD ;丹酚酸特征提本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴别丹参药材或衍生品的方法，包括以下步骤：1）对丹参药材或衍生品进行提取，得到含有活性成分组的丹参酮特征提取物和丹酚酸特征提取物；2）对所述丹参酮特征提取物和丹酚酸特征提取物均进行IGD核磁共振碳谱指纹图谱检测，根据指纹图谱得到特征提取物中若干个活性成分特征峰峰强度；并用相同方式测定出所述各活性成分相应标准参照品的特征峰峰强度；3）通过定量分析手段得到所述标准参照品的绝对含量；4）利用各活性成分特征峰峰强度及相应标准参照品的特征峰峰强度的比值和所述绝对含量，计算出丹参药材或衍生品中各活性成分的含量及活性成分组的含量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张海艳，赵天增，董建军，陈荣峰，
申请(专利权)人：河南省科高植物天然产物开发工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：