用于生产吩嗪-1-甲酰胺的基因工程菌株及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种用于生产吩嗪-1-甲酰胺的基因工程菌株及其用途；敲除绿针假单胞菌HT66(Psedunomonas?chlororaphis?HT66)CCTCC?NO：M?2013467基因组中的psrA或rpeA基因，即可。本发明专利技术从一株绿针假单胞菌出发，经种子培养、发酵、萃取、浓缩和结晶工艺，获得了纯度达到96％以上的吩嗪-1-甲酰胺。将该菌基因组中psrA和rpeA基因删除后，吩嗪-1-甲酰胺的发酵产量高达1800ppm。经过琼脂平板抑菌试验发现，吩嗪-1-甲酰胺对常见的植物病原性真菌如立枯丝核菌、尖孢镰刀菌、终极腐霉和甜叶菊壳针孢具有明显的抑制作用，且稳定性和活性均较好，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程领域，具体涉及一种。
技术介绍
我国是一个人口大国，因病虫害导致的粮食产量问题非常严峻。农药作为一种农业生产资料，在维护人类的生命、生活及环境的品质、土地与生物资源的永续利用上均扮演着重要而不可或缺的角色。据国家统计局数据显示，全国2012年11月农药原药产量336131吨，较10月产量(303043吨)环比增长10.92%，较去年11月产量(241408吨)同比增长39.2%。但是，由于人类大量使用化学农药和化肥等，造成病虫害泛滥，地力下降，加速野生物物种灭绝，栽培物种的品质退化，自然调整能力降低。为此，我国政府不断推出对高毒农药的管理措施。2011年6月15日，农业部、工信部、环保部等五部委联合发布第1586号公告，决定对高毒农药采取进一步禁限用管理措施，停止受理克百威、氧乐果、甲基硫环磷等22种农药新增田间试验申请、登记申请及生产许可申请；自2011年10月31日起，撤销苯线磷、特丁硫磷等10种高毒农药的登记证、生产许可证，停止生产，并于2013年10月31日起，停止销售和使用。因此，利用生物技术创新，开发高效低毒的微生物源农药，是实现农业高效和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于生产吩嗪?1?甲酰胺的基因工程菌株，其特征在于，敲除绿针假单胞菌HT66(Psedunomonas?chlororaphis?HT66)CCTCC?NO：M2013467基因组中的psrA基因。

【技术特征摘要】
1.一种用于生产吩嗪-1-甲酰胺的基因工程菌株，其特征在于，敲除绿针假单胞菌HT66 (Psedunomonas chlororaphis HT66) CCTCC NO:M2013467 基因组中的 psrA 基因。2.如权利要求1所述的用于生产吩嗪-1-甲酰胺的基因工程菌株，其特征在于，所述psrA基因的碱基序列如SEQ ID N0.1所示。3.如权利要求2所述的用于生产吩嗪-1-甲酰胺的基因工程菌株，其特征在于，所述敲除psrA基因包括如下步骤: A、扩增psrA基因片段，并插入pEX18Tc质粒中； B、扩增庆大霉素抗性基因，插入psrA基因中间，使psrA基因发生插入突变； C、使突变的psrA基因与HT66基因组中的基因发生同源重组，根据抗性筛选出阳性克隆，即可。4.如权利要求1~3中任一项所述的用于生产吩嗪-1-甲酰胺的基因工程菌株，其特征在于，敲除所述绿针假单胞菌HT66基因组中的rpeA基因。5.如权利要求4所述的用于生产吩嗪-1-甲酰胺的基因工程菌株，其特征在于，所述rp...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭华松，张雪洪，张平原，王威，胡洪波，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：