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一种分解玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌及其应用制造技术

技术编号:9791306 阅读:134 留言:0更新日期:2014-03-21 01:43
本发明专利技术涉及一种分解玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌及其应用。本发明专利技术所述的菌株的保藏号为:CCTCC?NO:M2013408,该菌株16s?rDNA的Genbank登录号为KF512666。应用时,将菌株制备成能对玉米赤霉烯酮毒素降解的液体菌剂或固体菌剂,用于降解饲料产品或谷物中的玉米赤霉烯酮毒素。本发明专利技术的优点是:利用该菌生物降解玉米赤霉烯酮毒素,安全性高,可专一、高效地降解饲料产品和农产品污染的玉米赤霉烯酮毒素,达到提高饲料产品的质量。

【技术实现步骤摘要】
一种分解玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌及其应用
本专利技术涉及一种分解玉米赤霉烯酮毒素的菌种,尤其是一种分解玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌,以及该菌在饲料产品中的应用。
技术介绍
玉米赤霉烯酮(Zearalenone, ZEN),又称F-2毒素,是一种酹的二羟基苯酸的内酯结构,有较强的雌激素活性。该毒素热稳定,并不因长期储存、烘烤或丙酸或霉菌生长抑制剂的加入而受到破坏。玉米赤霉烯酮在人和动物体内积累可诱发一系列雌激素效应症状,包括影响雌性哺乳动物乳房发育、外阴阴道炎、发情周期紊乱、假孕不孕、流产、死胎畸胎等,此外有研究证实,玉米赤霉烯酮还有遗传毒性,细胞毒性,免疫毒性,致肿瘤毒性。玉米赤霉烯酮存在于世界范围的多种谷物作物中,如:玉米、大麦、燕麦、小麦、稻、和高粱。在收获前玉米赤霉烯酮的产生通常没有显著的量的发生,但在合适的环境条件下,易在储减中的玉米和小谷粒上广生。 在乙醇生产中使用谷物颗粒并消耗淀粉时,玉米赤霉烯酮集中在发酵副产品(如:蒸馏干酒糟)中。发酵副产品中的玉米赤霉烯酮含量相对于谷物颗粒可能还会增加。在CN102010838A (采用蜡样芽孢杆菌E33L)、CN102559555A (采用不动杆菌Acinetobacter sp.SM04)、CN102796694A (导入了脱氧雪腐镰刀烯醇和玉米赤霉烯酮两种降解酶编码基因的工程菌)中分别公开了采用不同的微生物来分解玉米赤霉烯酮,但是它们所使用的微生物均为目前未被列入可用于饲料添加使用的安全微生物。在CN102406098A (采用黑曲霉发酵液干粉)、CN102181376A (采用枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ANSB0IG)中也分别公开了使用微生物分解玉米赤霉烯酮的应用。因此,仍有必要寻找可用于饲料产品添加的分解真菌毒素玉米赤霉烯酮的新的微生物,并将其应用于受玉米赤霉烯酮毒素污染的动物饲料产品中分解毒素。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供一种分解真菌毒素玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌(Bacillus pseudomycoides),从而解决饲料中残留玉米赤霉烯酮毒素的问题。本专利技术所述的一种分解玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌(Bacilluspseudomycoides),其菌株的保藏号为CCTCC NO: M2013408 ;保藏单位为中国典型培养物保藏中心(CCTCC),地址是中国湖北省武汉市武汉大学;保藏日期为2013年9月10日。所述菌株能在营养肉汁琼脂培养基上生长,菌落圆形,白色,扁平,边缘完整,菌落有螺纹,菌体为短棒状,大小为I JX2~3 wm,菌体连成链状,革兰氏阳性;芽孢大小为1.0~1.2^XLO~2.0 wm,椭圆形,中生或次端生,孢囊不明显膨大;所述菌株能利用的碳源有:淀粉、D-葡萄糖、玉米粉、D-乳糖、果糖、N-乙酰葡萄糖胺、熊果苷、七叶苷、水杨苷、纤维二糖、麦芽糖、海藻糖、糖原、核糖;不能利用的碳源有:甘油、L-阿拉伯糖、D-阿拉伯糖、赤藓糖醇、蔗糖、甘露糖、甘露醇、葡糖酸酯。本专利技术的另一个目的在于提供所述的假蕈状芽孢杆菌的用途,具体是用于制备分解玉米赤霉烯酮的菌剂的应用。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,所述的菌剂为液体菌剂,通过以下方法制备:a)将所述假蕈状芽孢杆菌的菌株于种子培养基中培养,获得菌种;b)将上述种子液接种入含有种子培养基的种子罐,培养至对数生长期,获得种子液; c)将获得的种子液接种入含有发酵培养基的生产发酵罐发酵培养,出罐形成能分解玉米赤霉烯酮的液体菌剂。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,所述的种子培养基为由下列组分组成:蛋白胨10.0g/L,牛肉浸取物3.0g/L, NaC15.0g/L, pH7.0~7.2。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,所述的发酵培养基为由以下组分组成:蔗糖 15g/L,豆饼粉 15g/L, CaCl20.2g/L,K2HPO4 ? 3H204.0g/L, KH2P042.0g/L,MgSO4 ? 7H200.5g/L, pH7.0 ~7.2。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,所述的种子培养基和发酵培养基需要121°C高温湿热灭菌后冷却至30~35°C使用。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,所述的菌种按种子罐种种子培养基的3 - 10%接种量种入种子罐,优选5%接种量,更优选10%的接种量。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,所述的种子液按生产罐种发酵培养基的3 - 10%接种量接种入生产罐,优选5%接种量,更优选10%的接种量。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,在种子罐的种子培养和生产罐的发酵培养过程种无菌空气的同期量为1:0.5~1.5,搅拌速度为100~250转/分,培养时间为24~60小时,培养温度为25~35°C,优选为28~32°C。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,发酵结束后获得液体菌剂中,菌体数量≥IO9个/ml,优选≥IO12个/ml,或者更优选≥IO15个/ml。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,将所述的假蕈状芽孢杆菌液体菌剂稀释之后喷施到饲料产品中以降解饲料产品中的玉米赤霉烯酮毒素;稀释后的液体菌剂中菌体数量至少达到IO6个/ml。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,所述的假蕈状芽孢杆菌液与糠麸或黏土吸附剂按Iml:1 — 20g的比例吸附,优选Iml:5 — IOg的比例吸附,形成固体菌剂,其中菌体数量> IO8个/g,优选> IOltl个/g,或者更优选> IO15个/g。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,所述的假蕈状芽孢杆菌固体菌剂的剂量是0.5g菌剂/kg饲料,优选Ig菌剂/kg饲料,或更优选2g菌剂/kg饲料。根据本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的应用的进一步特征,所述饲料是选自以下谷物的饲料产品:玉米、小麦、大麦、稻谷、高粱、或蒸馏干酒糟。本专利技术的有益效果在于:假蕈状芽孢杆菌具有抗逆性强、耐高温、对营养要求简单、易贮存等独特的特性,本专利技术用于污染饲料产品中的玉米赤霉烯酮毒素的降解,可有效降低饲料产品中的玉米赤霉烯酮毒素。【附图说明】图1是本专利技术所述的假蕈状芽孢杆菌的液体菌剂对玉米赤霉烯酮毒素的降解效果 。【具体实施方式】以下对本专利技术的说明书所涉及的名词做出说明。玉米赤霉烯酮术语“玉米赤霉烯酮”包括自某些镰孢属菌种(Fusarium sp.)产生的真菌毒素玉米赤霉烯酮。IUPAC名称为(4S,12E)- 15,17 一二羟基一 4 一甲基一 3 —氧杂二环[12.4.0]十八碳一12,15,17,19 —四烯一2,8 —二酮((4S, 12E)-15, 17-Dihydroxy-4-methyl-3-oxabicyclo[12.4.0]octadeca-12, 15, 17, 19-tetraene_2, 8_d ione)。术语“玉米赤霉烯酮”还包括任何玉米赤霉烯酮的衍生物。动物饲料产品术语“动物”包括所有动物,包括人。动物的实例是牛,包括但不限于乳牛/母牛和牛犊;单胃动物,例如猪,包括但不限于小猪、饲育猪和母猪;本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种分解玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌(Bacillus?pseudomycoides),其特征在于:所述假蕈状芽孢杆菌的菌株的保藏号为CCTCC?NO:M2013408;所述菌株能在营养肉汁琼脂培养基上生长,菌落根状,扁平,大小不规则,丝状边缘,不透明;菌体为短棒状,大小为1.0~1.2μm×3.0~5.0μm,革兰氏阳性,菌体多连成链状;芽孢大小为0.5~0.7μm×0.5~1.2μm,椭圆形,中生,孢囊不膨大;所述菌株能利用的碳源有:D?葡萄糖、淀粉、柠檬酸盐、丙酸盐、L?阿拉伯糖、D?木糖、D?甘露醇;不能利用的碳源有:甘油;所述菌株的16S?rDNA全基因序列的Genbank登录号为:KF512666。

【技术特征摘要】
1.一种分解玉米赤霉烯酮的假蕈状芽孢杆菌(Bacillus pseudomycoides),其特征在于:所述假蕈状芽孢杆菌的菌株的保藏号为CCTCC N0:M2013408 ; 所述菌株能在营养肉汁琼脂培养基上生长,菌落根状,扁平,大小不规则,丝状边缘,不透明;菌体为短棒状,大小为1.0~1.2 iimX 3.0~5.0ii m,革兰氏阳性,菌体多连成链状;芽孢大小为0.5~0.7iimX0.5~1.2 y m,椭圆形,中生,孢囊不膨大; 所述菌株能利用的碳源有:D-葡萄糖、淀粉、柠檬酸盐、丙酸盐、L-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露醇;不能利用的碳源有:甘油; 所述菌株的16S rDNA全基因序列的Genbank登录号为:KF512666。2.根据权利要求1所述的假蕈状芽孢杆菌用于制备分解玉米赤霉烯酮的菌剂的应用。3.根据权利要求2所述的假蕈状芽孢杆菌的应用,其特征在于:所述的菌剂为液体菌剂,通过以下方法制备: a)将所述假蕈状芽孢杆菌的菌株于种子培养基中培养,获得菌种; b)将上述种子液接种入含有种子培养基的种子罐,培养至对数生长期,获得种子液; c)将获得的种子液接种入含有发酵培养基的生产发酵罐发酵培养,出罐形成能分解玉米赤霉烯酮的液体菌剂。4.根据权利要求3所述的假蕈状芽孢杆菌的应用,其特征在于: 所述的种子培养基为由下列组分组成:蛋白胨10.0g/L,牛肉浸取物3.0g/L,NaC15.0g/L, pH7.0 ~7.2 ; 所述的发酵培养基为由以下组分组成:蔗糖15g/L,豆饼粉15g/L,CaCl20.2g/L,K2HPO4 ? 3H204.0g/L, KH2P042.0g/L, MgSO4 ? 7H200.5g/L, pH7.0 ~7.2。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:姚冬生刘大岭孙志轩冼钰茵周妮谢春芳黄炯威梁郁强杨舜莲
申请(专利权)人:暨南大学开平牵牛生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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