一种荧光标记的肿瘤靶向示踪剂及制备方法和应用技术

一种荧光标记的肿瘤靶向示踪剂及制备方法和应用，属于荧光标记技术领域。本发明专利技术示踪剂由异硫氰酸荧光素FITC与7肽IF7构成，记为FITC-IF7；7肽IF7为异亮氨酸－苯丙氨酸－亮氨酸－亮氨酸－色氨酸－谷氨酰胺－精氨酸。其制备方法为：取FITC加入于IF7碱性溶液中，4℃反应24h，NH4Cl终止反应，制备型HPLC分离纯化得到FITC－IF7。FITC－IF7具有良好的稳定性，对肿瘤细胞亲和力高，能进入不同的肿瘤细胞：人表皮癌细胞（A431）、人肺腺癌细胞（A549）、人肝癌细胞（Bel-7402）、小鼠黑色素瘤细胞（B16）。FITC-IF7利用FITC等荧光材料作为示踪剂，检测方便，各种荧光显微镜、流式细胞仪都可检测，还可用于肿瘤诊断的荧光成像。

【技术实现步骤摘要】
一种荧光标记的肿瘤靶向示踪剂及制备方法和应用
荧光标记的肿瘤靶向示踪剂及制备方法和应用，属于荧光标记
。本专利技术示踪剂FITC-1F7可用于检测其进入不同肿瘤细胞的能力，在抗肿瘤药物研制和光学成像等生物应用领域具有重要的作用。
技术介绍
在生命科学及现代分子生物学领域里，研究和应用高灵敏度的非同位素检测方法一直是各国学者共同努力的方向。荧光标记技术是指利用一些能发荧光的物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。该技术具有闻灵敏度、闻稳定性和闻选择性等特点。糖模拟肽(carbohydrate mimetic peptide, CMP),是一短序列肽分子，能模拟生物大分子或细胞表面复杂的糖结构，常用于替代糖分子进行诱导免疫反应制备特异性抗体。CMP分子小，血浆清除快，在药代动力学方面极具优势，备受研究者青睐，现在也多用于筛选受体或抗体的特异性高亲和力配体。如能筛选出一种与肿瘤新生血管特异性结合的CMP,将有较高应用前景。Shingo Hatakeyama等在研究糖模拟肽的过程中，发现了一个名为IF7的七肽片段，能有效靶向肿瘤血管，而且基本不引起免疫反应。Anxal是钙磷脂结合蛋白Anx家族的成员之一，高表达于肿瘤新生血管，是EGFR的底物，可以特异性调节MAPK/ERK信号传导通路，同时作为PLA2的抑制剂等参与信号转导、细胞凋亡、钙离子通道的形成等众多生理过 程，在肿瘤的形成及发展中起重要作用。结合Shingo Hatakeyama等的研究，我们发展了以IF7为基础，以Anxal为靶点，荧光为标记的肿瘤靶向示踪剂，检测其进入不同肿瘤细胞的能力，这对研究抗肿瘤药物和光学成像等生物应用领域具有重要的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种荧光标记的肿瘤靶向示踪剂及制备方法和应用。用荧光基团标记IF7制备肿瘤靶向示踪剂，并且检测其进入肿瘤细胞的能力，在抗肿瘤药物研制和光学成像等生物应用领域具有重要的作用。本专利技术的技术方案:一种荧光标记的肿瘤靶向示踪剂，该示踪剂由异硫氰酸荧光素FITC与7肽IF7构成，记为FITC-1F7 ；7肽IF7为异亮氨酸一苯丙氨酸一亮氨酸一亮氨酸一色氨酸一谷氨酰胺一精氨酸。FITC -1F7的结构式为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种荧光标记的肿瘤靶向示踪剂，其特征在于该示踪剂由异硫氰酸荧光素FITC与7肽IF7构成，记为FITC??IF7；7肽IF7为异亮氨酸－苯丙氨酸－亮氨酸－亮氨酸－色氨酸－谷氨酰胺－精氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种荧光标记的肿瘤靶向示踪剂，其特征在于该示踪剂由异硫氰酸荧光素FITC与7肽IF7构成，记为FITC-1F7 ；7肽IF7为异亮氨酸一苯丙氨酸一亮氨酸一亮氨酸一色氨酸一谷氨酰胺一精氨酸。2.权利要求1所述荧光标记的肿瘤靶向示踪剂的制备方法，其特征在于:(1)IF7、FITC分别用DMSO溶解配制成10mg/mL溶液，再用0.5mol/L的碳酸氢钠缓冲溶液稀释成lmg/mL溶液；(2)取lmg/mL的FITC溶液10μ L缓慢加入于lmg/mL的IF7 100 μ L溶液中，边加边轻轻晃动使其混合均匀，暗处4V反应24 h ；(3)加入5mol/L的NH4C1至终浓度50mmol/L，4°C终止反应2h。3.权利要求1所述的肿瘤靶向示踪剂的分离纯化方法，其特征在于:(1)制备型高效液相HPLC纯化FITC标记的IF...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋孟军，吴鹏西，殷莹，李小雯，谢平，
申请(专利权)人：蒋孟军，吴鹏西，殷莹，李小雯，谢平，
类型：发明
国别省市：