本发明专利技术公开了一种检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器，其特征在于：免疫传感器是在玻碳电极的表面覆盖有氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜，在所述氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜的表面通过1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺处理后固定有人白介素6抗体。本发明专利技术通过电致化学发光免疫传感器实现了对人白介素6的检测，方法简单、灵敏度高，易于操作。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器，其特征在于：免疫传感器是在玻碳电极的表面覆盖有氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜，在所述氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜的表面通过1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺处理后固定有人白介素6抗体。本专利技术通过电致化学发光免疫传感器实现了对人白介素6的检测，方法简单、灵敏度高，易于操作。【专利说明】
本专利技术涉及，更具体地说是涉及一种基于氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点(GO/PANI/CdSe)复合物的电致化学发光免疫传感器。
技术介绍
自英国科学家在2004年发现石墨烯以来，石墨烯作为一种密集堆积的单层碳原子二维材料已经迅速成为了碳材料研究中的热点。氧化石墨烯表面存在大量含氧基团，表现出优异的电、热以及机械性能，在微电子器件、液晶器件以及太阳能电池等领域中有潜在的应用价值。利用聚合物对氧化石墨烯进行功能化修饰，可以大大提高了石墨烯的水溶性和导电性能。在众多功能化石墨烯中，聚苯胺功能化的氧化石墨烯除具备大的比表面积外，还具有良好的生物相容性和导电性。电致化学发光是电极反应产物之间或者电极产物与体系中某组分进行化学反应所产生的一种光辐射，具有成本低，分析范围广和高灵敏度等很多优点。自2002年，Bard等在2002年发现了量子点的电致化学发光(ECL)现象以来，ECL免疫传感器已经引起了人们极大的兴趣。然而与传统的ECL发光试剂相比，发光效率低和生物相容性差等问题限制了它们在生命分析中的应用。因此，寻找新型高效、价廉、生物相容性好的发光材料仍是构建ECL免疫传感器的重要研究目标。人白介素6是一种多效性细胞因子，其在炎症反应中具有关键作用，与一些炎症性疾病，如牛皮癣、炎症性关节炎、心血管疾病、发炎性肠道疾病等疾病的发病机制具有密切联系。传统的检测人白介素6的方法是酶联免疫法。该方法虽然准确，但是它的检测步骤繁琐，分析时间长，样品消耗量大，需要专业的实验室，且需要昂贵的仪器和专门的底物显色剂，不利于进行现场检测。因此，急需发展一种简单、快速和高灵敏度的分析方法实现人白介素6的快速检测。将氧化石墨烯纳米片、聚苯胺纳米线阵列和硒化镉量子点的优点结合起来制备氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物，可以充分发挥三者的优点，能提高电致化学发光性能，良好的生物相容性，较大的比表面积和极好的稳定性，是用于研究ECL免疫传感器的良好的纳米材料，在免疫生物学和临床诊断等领域将会有广阔的应用前景。目前，基于氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物的电致化学发光免疫传感器还尚无报道。
技术实现思路
本专利技术为解决上述现有技术所存在的不足之处，提供一种基于氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物的检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器及其制备方法和检测方法，以期可以以高电致化学发光、高生物相容性的电致化学发光免疫传感器实现对人白介素6的简单、快速的检测。本专利技术解决技术问题采用如下技术方案:本专利技术检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器，其结构特点在于:所述免疫传感器是在玻碳电极的表面覆盖有氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜，在所述氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜的表面通过1-乙基-3- (3- 二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺处理后固定有人白介素6抗体。本专利技术检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器，其结构特点也在于:所述氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜是以苯胺和氧化石墨烯为原材料，通过原位反应得到氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列复合物，再和硒化镉量子点混合后获得。本专利技术检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器的制备方法，其特点在于按如下步骤进行:步骤一、将50ul的苯胺溶于20ml浓度为lmol/L的浓硫酸溶液中，超声处理0.5h后获得苯胺的硫酸溶液；向20ml浓度为0.5mg/ml的氧化石墨烯溶液中滴加所述苯胺的硫酸溶液，室温下搅拌30min后，再加入0.1512g过硫酸铵，持续搅拌12h，然后用去离子水离心洗涤至pH为6?7，65°C下真空干燥，获得墨绿色产物，即为氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列复合物，以去离子水为溶剂，将氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列复合物配制成浓度为0.5mg/ml的氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列复合物溶液；步骤二、将步骤一所制得的氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列复合物溶液与以去离子水为溶剂、浓度为8.2 X 10_5mol/L硒化镉量子点溶液按体积比1:3混合，获得氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物溶液；步骤三、将玻碳电极依次用中位粒径为1.0 ii m、0.3 ii m和0.05 ii m的三氧化二铝抛光粉抛光至镜面，然后超声清洗，并用氮气吹干，得备用玻碳电极；步骤四、在步骤三制得的备用玻碳电极上滴加IOiU步骤二所制得的氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物溶液，室温晾干后在备用玻碳电极上形成氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜，再滴加IOiil由20-30mg/mll-乙基-3- (3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和10_20mg/ml N-羟基琥珀酰亚胺组成的混合溶液于所述氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜的表面，静置20-30min，得中间样；步骤五、将步骤四所制得的中间样浸入以浓度为lOmmol/ml的pH7.4磷酸盐缓冲液为溶剂、浓度为0.lmg/ml的人白介素6抗体的溶液中反应12-20小时,取出后用浓度为10mmol/ml的pH7.4磷酸盐缓冲液清洗，再浸入质量浓度为2_3%的牛血清蛋白中封闭1_2小时，取出清洗即得检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器。利用本专利技术检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器的检测方法，其特点是按如下步骤获得待测人白介素6样品浓度:步骤a、将所述检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器浸入IOul待测人白介素6样品中，并在37°C下温育50分钟后取出清洗，得待测免疫传感器；步骤b、将步骤a所得的待测免疫传感器在含有0.lmol/L K2S2O8和0.lmol/L KCl的0.lmol/L的pH7.4磷酸盐缓冲液中进行电致化学发光的测试，获得发光强度，利用发光强度与待测人白介素6样品浓度的标准关系曲线，判断待测人白介素6样品的浓度。本专利技术的检测方法，其特点也在于:所述标准关系曲线是通过对以浓度分别为0.0005ng/ml、0.0lng/ml、0.lng/ml、lng/ml 和 lOng/ml 的人白介素 6 样品所制备的待测免疫传感器进行电致化学发光的测试，获得各浓度人白介素6样品所对应的发光强度，如图1所示，各线条所对应浓度分别为:a为0ng/ml、b为0.0005ng/ml、c为0.0lng/ml、d为0.lng/ml、e为lng/ml和f为10ng/ml ;然后以人白介素6样品的浓度的对数值为横坐标、以发光强度为纵坐标进行拟合，如图1的插图所示。检测表明当人白介素本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种检测人白介素6的电致化学发光免疫传感器，其特征在于：所述免疫传感器是在玻碳电极的表面覆盖有氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜，在所述氧化石墨烯纳米片/聚苯胺纳米线阵列/硒化镉量子点复合物膜的表面通过1?乙基?3?（3?二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐和N?羟基琥珀酰亚胺处理后固定有人白介素6抗体。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：毛昌杰，胡晓炜，石阳阳，王程，殷畅，刘苹贞，张胜义，牛和林，宋吉明，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：
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