本发明专利技术公开了一种防治土壤环境病原菌的芽胞杆菌制剂及制备方法和应用，该芽胞杆菌制剂由三种菌株即解淀粉芽胞杆菌D66、解淀粉芽胞杆菌J3-1和短小芽胞杆菌D31组成，都从土壤环境分离获得。本发明专利技术通过将上述3株菌的发酵液以体积比1:1:1混合，通过草炭吸附菌体，制成微生物制剂。目前发现在畜禽养殖土壤环境中存在大量的动物病原菌，以大肠杆菌为代表的动物病原菌在土壤中可以长期存在并导致畜禽出现腹泻等症状，本发明专利技术的微生物制剂主要应用于防治畜禽养殖环境中动物病原菌大肠杆菌，具有效果明显、见效快的优势，既可以提高畜禽类的免疫能力，又可以抑制和拮抗环境中病原菌的生长繁殖，因此有着广阔的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种防治土壤环境病原菌的芽胞杆菌制剂及制备方法和应用，该芽胞杆菌制剂由三种菌株即解淀粉芽胞杆菌D66、解淀粉芽胞杆菌J3-1和短小芽胞杆菌D31组成，都从土壤环境分离获得。本专利技术通过将上述3株菌的发酵液以体积比1:1:1混合，通过草炭吸附菌体，制成微生物制剂。目前发现在畜禽养殖土壤环境中存在大量的动物病原菌，以大肠杆菌为代表的动物病原菌在土壤中可以长期存在并导致畜禽出现腹泻等症状，本专利技术的微生物制剂主要应用于防治畜禽养殖环境中动物病原菌大肠杆菌，具有效果明显、见效快的优势，既可以提高畜禽类的免疫能力，又可以抑制和拮抗环境中病原菌的生长繁殖，因此有着广阔的应用前景。【专利说明】一种防治土壤环境病原菌的芽胞杆菌制剂及制备方法和应用
本专利技术属于土壤环境治理领域，具体涉及一种防治土壤环境病原菌的芽胞杆菌制剂，同时还涉及一种防治土壤环境病原菌的芽胞杆菌制剂的制备方法，还涉及一种防治土壤环境病原菌的芽胞杆菌制剂的用途，它们对导致鸡大肠杆菌病、仔猪黄痢、仔猪白痢和猪水肿病等疾病的致病性大肠杆菌具有明显的拮抗作用。
技术介绍
近几年畜禽传染病的爆发越来越频繁，不仅危害畜禽类的健康，造成巨大的经济损失，而且还威胁人类的健康。其中，致病性大肠杆菌引发的大肠杆菌病是畜禽养殖业最常见的传染性疾病，主要表现为鸡大肠杆菌病、仔猪黄痢、仔猪白痢和猪水肿病等，这些病不仅发病率和死亡率高，且流行范围广、常年可发生。鸡大肠杆菌病具有易传染、易与其他疾病(如鸡慢性呼吸道病、新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、葡萄球菌病或球虫病等)并发的特点。仔猪黄痢易发病于7日龄内的仔猪，感染仔猪排黄色稀粪，且发病率和死亡率高。仔猪白痢易发病于10至30日龄的仔猪，感染仔猪排白色稀粪，该病发病率高、死亡率低，严重影响患畜的生长发育。猪水肿病常见于断奶前后的仔猪，其典型特征是仔猪全身水肿和神经症状、胃黏膜和结肠系膜水肿，该病发病率低、死亡率高(陈希文等，2007)。大肠杆菌病长期困扰着畜禽养殖业的发展，而近年大量使用的抗生素不仅污染了环境，而且造成了致病性大肠杆菌的多重耐药性，使得大肠杆菌病的防治更加困难。众所皆知，畜禽传染病会给人类带来巨大的经济损失，但人们往往忽视了它们造成的环境污染。受感染畜禽的排泄物等含有高浓度的病原菌和病毒，会加速疫情的蔓延。为了控制疫情人们一般大量使用化学消毒剂进行消毒，但消毒剂给土壤和水体又带来污染，影响了土壤的植被和微生物群落，给水体中动植物的生存也造成威胁。另外，为了防治畜禽传染病而大量使用的抗生素给人类带来的危害更是不可预计，它使得大量的微生物产生耐药性，现在畜禽传染病爆发的频率越来越高与抗生素的滥用关系莫大。由于微生物制剂对大肠杆菌病有较好的防治效果，既可以提高畜禽类的免疫能力，又可以分解环境中的污染物，抑制和拮抗环境中病原菌的生长繁殖，因此有着广阔的发展应用前景。目前微生物制剂研究的方向主要是水产养殖业、畜禽养殖业、种植业和肠道微生物平衡。其中畜禽养殖业中，主要研究的是饲用微生物制剂，利用微生物制剂替代抗生素，预防和治疗畜禽类肠道疾病、提高畜禽类的免疫力、促进生长。对于微生物制剂改善猪舍和鸡舍环境污染和防治环境中病原菌的相关研究较少，畜禽舍病原微生物的污染及有害气体对动物和人的健康构成了极大的威胁。不少微生态制剂(例如EM)还具有扶植正常微生物菌群、拮抗致病菌、减少粪便中氨和硫化氢等有害气体的排出、改善畜舍内空气质量的作用。同时还能减少苍蝇蚊虫的滋生，减少疾病的传播从而也可对环境起到保护作用。另外，某些有益微生物(如芽胞杆菌)可以减少蛋白质向刺激性较强的氨和胺的转化，减少血液和肠道中氨的浓度，减少向外界的排泄量，从而改善饲养环境(刘燕和王静惠，2002)。所以研究这一类降低环境污染的微生物制剂具有重要意义。微生态制剂采用的菌种主要有乳酸菌、芽胞杆菌、酵母菌等。例如常用的EM微生物制剂内含有光合细菌、酵母菌、乳酸菌、放线菌以及发酵型壁状真菌等五科10属80种微生物。美国FDA(1989)规定允许饲喂的微生物有43种，其中乳酸菌28种(包括乳酸杆菌12种、双歧杆菌6种、链球菌6种、片球菌3种、明串珠菌I种)，芽胞杆菌5种，拟杆菌4种，曲霉菌2种，酵母菌2种等。我国农业部2008年12月第1126号公告《饲料添加剂品种目录(2008)》中规定的可以直接饲喂动物的微生物共有16种:地衣芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、两歧双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、乳酸肠球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母、沼泽红假单胞菌、保加利亚乳杆菌。芽胞杆菌也是微生物制剂采用的主要菌种之一。目前广泛使用的有三类产芽胞的细菌，一是需氧芽胞杆菌，如枯草芽胞杆菌、纳豆芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、东洋芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌等；二是芽胞乳杆菌，如菊糖芽胞乳杆菌；三是厌氧梭状芽胞杆菌，如丁酸梭菌(张璐，2008)。芽胞杆菌制成微生物制剂具有多方面的优点。首先，芽胞杆菌具有耐酸、耐碱、耐高温的优点，易于保存，制成微生物制剂稳定性好。其次，芽胞杆菌可以产生有机酸物质，有利于乳酸菌等优势菌群的生长繁殖，维持微生态平衡。再次，芽胞杆菌产生大量的酶类，有助于畜禽类对营养物质的吸收(冯亚强和薛恒平，1995)。最后，芽胞杆菌可以产生抗菌物质，抑制病原菌的生长。
技术实现思路
本专利技术的目的是在于提供了一种防治土壤环境病原菌的芽胞杆菌制剂，该制剂包含两种解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和一种短小芽胞杆菌(Bacilluspumilus)，将三株菌的菌液等体积混合，制得一种防治土壤环境病原菌的芽胞杆菌制剂。由三株芽胞杆菌制成的微生物制剂具有便于存储、运输和稳定性强的特点；另外，解淀粉芽胞杆菌和短小芽胞杆菌是常用的益生菌，可以调节土壤的微生物群落结构，促进有益微生物的生长；最后，本专利技术的芽胞 杆菌微生物制剂可以抑制土壤中致病性大肠杆菌的生长，防治土壤中致病性大肠杆菌的污染。本专利技术的另一个目的在于提供了一种制备芽胞杆菌制剂的方法，本专利技术的微生物制剂的制备方法操作简单，便于大规模的生产。本专利技术的再一个目的是提供了一种芽胞杆菌制剂在防治土壤环境的病原菌污染中的应用。该微生物制剂应用时只需将微生物制剂直接施用到土壤中混合，操作过程简单，另外该微生物制剂应用于处理致病性大肠杆菌污染土壤具有效果显著、见效快的特点。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术措施:一种防治土壤环境病原菌的芽胞杆菌制剂:由三种菌的菌液等体积混合而成，这三种菌均为专利技术人从湖北地区病原菌污染土壤中分离得到，包括一种短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus) D31 (本专利技术中简称为D31 )，一种解淀粉芽胞杆菌(Bacillusamyloliquefaciens) J3_l (本专利技术中简称为J3_l)和一种解淀粉芽胞杆菌(Bacillusamyloliquefaciens) D66 (本专利技术中简称为D66),这三种菌的分离方法是相同的。其分离过程是:A.制备双层平板:I)接种致病性大肠杆菌(本专利技术中所用到的病原菌为大肠杆菌，该菌从猪场土壤中分离，利用小鼠进行了动物回归本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种短小芽胞杆菌，其特征在于：短小芽胞杆菌（Bacillus?pumilus?）D31，CCTCC?NO:?M2012123。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：黄巧云，陈雯莉，姚佳瑜，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：
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