蛋白多糖的大量制备方法技术

本发明专利技术以高效地从水生动物组织中提取蛋白多糖为课题。本发明专利技术涉及从鱼类软骨中提取蛋白多糖的方法，只要是包括在水中加热冷冻鱼类软骨小片的工序的蛋白多糖提取方法，就可以简便并且非常高效地从鱼类软骨中提取蛋白多糖。特别是，就该方法而言，可以提取高分子量的蛋白多糖。而且，就该方法而言，由于可以仅使用水进行提取，因此与现有的使用有机溶剂或者酸·碱的提取方法相比，提取作业及所得的蛋白多糖是安全的，也不需要除去有机溶剂的烦杂工序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术以高效地从水生动物组织中提取蛋白多糖为课题。本专利技术涉及从鱼类软骨中提取蛋白多糖的方法，只要是包括在水中加热冷冻鱼类软骨小片的工序的蛋白多糖提取方法，就可以简便并且非常高效地从鱼类软骨中提取蛋白多糖。特别是，就该方法而言，可以提取高分子量的蛋白多糖。而且，就该方法而言，由于可以仅使用水进行提取，因此与现有的使用有机溶剂或者酸·碱的提取方法相比，提取作业及所得的蛋白多糖是安全的，也不需要除去有机溶剂的烦杂工序。【专利说明】
本专利技术涉及蛋白多糖的制备方法。更具体来说，本专利技术特别是涉及能够大量地制备高分子量的蛋白多糖的、高效率的蛋白多糖的提取方法。
技术介绍
蛋白多糖是与胶原蛋白等一起形成结缔组织的细胞外基质中的基质的主要生物高分子。以往，蛋白多糖是将哺乳动物(特别是牛)的软骨中所含的物质提取分离而得到，然而，由于报告过牛脑海绵状症(BSE)的发病，因此希望避免从哺乳动物软骨中提取，需要将其取而代之的蛋白多糖供给源。此外，以往的蛋白多糖提取工序烦杂且产量不高，因此制造成本非常高，不能充分地实现工业应用，因此需要一种更加简便且产量高的制造方法。水生动物组织是有力的蛋白多糖供给源替代候选。尝试过提取作为水生动物的鲸、鲨鱼的软骨中所含的蛋白多糖。但是，这些水生动物的捕获量存在限制，很难制造大量的蛋白多糖。此外，提取分离操作也很烦杂，提取所用的溶剂等中存在有毒性不低的物质为了解决这些问题，尝试过从大量废弃的水生动物组织(例如鲑鱼鼻软骨)中提取蛋白多糖。专利文献I中记载有由鲨鱼的鼻软骨来制造含有蛋白多糖的组合物(鼻软骨粉末)的方法。特别给出了以下启示，即，源自鲑鱼鼻软骨的蛋白多糖对炎症性肠疾病具有治疗以及预防效果，蛋白多糖的需求正在提高。然而，就专利文献I的方法而言，其蛋白多糖的制造效率并非很高，在效率方面还存在着改善余地。在先技术文献专利文献专利文献1:日本特开2009 - 173702号公报
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术的课题在于，高效率地从水生动物组织中提取蛋白多糖。用于解决课题的方法本专利技术人等惊奇地发现，在将鱼类软骨冷冻并将其小片化后，在水中进行加热，可以高效率地提取蛋白多糖，从而进一步改良并完成本专利技术。S卩，本专利技术包含例如以下项目I?11所述的蛋白多糖提取方法(也可以称为蛋白多糖制造方法)、以及提闻蛋白多糖提取效率的方法。项目1.一种蛋白多糖提取方法，其为从鱼类软骨中提取蛋白多糖的方法，包含:(A)在水中加热冷冻鱼类软骨小片的工序。项目2.根据项目I所述的蛋白多糖提取方法，其中，每I小片的冷冻鱼类软骨小片为0.0Ol ?0.5g。项目3.根据项目I或2所述的蛋白多糖提取方法，其中，冷冻鱼类软骨小片是将鱼类软骨冷冻后小片化而成。项目4.根据项目3所述的蛋白多糖提取方法，其中，鱼类软骨是经脱脂处理的鱼类鼻软骨。项目5.根据项目I?4中任意一项所述的蛋白多糖提取方法，其中，提取的蛋白多糖中包含分子量为90万以上的蛋白多糖。项目6.根据项目I?5中任意一项所述的蛋白多糖提取方法，其中，在水中进行长于3小时的加热。项目7.根据项目I?6中任意一项所述的蛋白多糖提取方法，其中，加热时的水的温度在80°C以上。项目8.根据项目I?7中任意一项所述的蛋白多糖提取方法，其中，供于加热的冷冻鱼类软骨小片总体的质量与水的质量之比为1:1?1:10。项目9.根据项目I?8中任意一项所述的蛋白多糖提取方法，其特征在于，一直加热到加热后回收的残渣质量达到供于加热的冷冻鱼类软骨小片的质量以下为止。项目10.根据项目9所述的蛋白多糖提取方法，其中，加热后回收的残渣是加热后在5000rpm、20分钟、4°C下通过离心分离处理而得到的沉淀。项目11. 一种提高来自鱼类软骨的蛋白多糖的提取效率的方法，其包含在水中加热冷冻鱼类软骨小片的工序。专利技术的效果根据本专利技术的蛋白多糖提取方法，可以简便并且非常高效地从鱼类软骨提取蛋白多糖。特别是，就本专利技术的提取方法而言，可以提取高分子量的蛋白多糖。而且，就本专利技术的提取方法而言，由于可以仅使用水进行提取，因此与现有的使用有机溶剂或者酸?碱的提取方法相比，提取作业以及所得到的蛋白多糖是安全的，也不需要除去有机溶剂的烦杂工序。【专利附图】【附图说明】图1a为置于托盘中的冷冻鲑鱼鼻软骨块的照片。图1b为置于塑料袋中的冷冻鲑鱼鼻软骨小片的照片。图1c为置于塑料袋中的脱脂冷冻鲑鱼鼻软骨粉末的照片。图2为表示在冷冻的鲑鱼鼻软骨小片中加入水并在100°C下提取时的、蛋白多糖产量随时间的变化的图表。图3为对由脱脂鲑鱼鼻软骨粉末(粉末)，冷冻鲑鱼鼻软骨块(块)或者冷冻鲑鱼鼻软骨小片(小片)提取蛋白多糖时的、糖醛酸量(以葡萄糖醛酸的简写GlcA表示)及蛋白质(以Protein表示)的产量进行比较图表。将GlcA及Protein的产量值换算为由每IOOg冷冻鲑鱼鼻软骨块提取的情形。需要说明的是，糖醛酸量反映蛋白多糖量。图4为使用凝胶过滤色谱法将包含提取自冷冻鲑鱼鼻软骨小片的蛋白多糖的回收上清液分离，测定各馏分中的糖醛酸量(GlcA)及280nm的吸光度，并根据所得到的测定值绘制成的色谱图。图5为使用阴离子交换色谱法将包含提取自冷冻鲑鱼鼻软骨小片的蛋白多糖的回收上清液分离，测定各馏分中的糖醛酸量(GlcA)及280nm的吸光度，并根据所得到的测定值绘制成的色谱图。【具体实施方式】以下，对本专利技术进一步详细地进行说明。需要说明的是，“质量”与“重量”可以替换。本专利技术的蛋白多糖提取方法是从鱼类软骨提取蛋白多糖的方法，包含:(A)在水中加热冷冻鱼类软骨小片的工序。鱼类软骨是鱼类的软骨。作为鱼类，优选鲑鱼科鲑鱼属的鱼，具体而言优选例示出鳟鱼(细鳞大马哈鱼、樱鳟鱼、五月鳟等)、鲑鱼(白鲑、红鲑、银鲑、大鳞大马哈鱼、虹鳟等)、鲨鱼、鳕鱼等。特别优选鲑鱼或者鳟鱼 。此外，作为软骨，没有特别限制，但是优选头部软骨，尤其是鼻软骨。此外，因为在将鱼类加工成食品产品等时通常将头部废弃，所以具有头部软骨的获得成本低，可以大量且稳定供给的优点。冷冻鱼类软骨小片可以通过下述方法得到:(i)冷冻鱼类软骨后将其小片化，或者(i i )将鱼类软骨小片化后冷冻。此外，也可以是(i i i )冷冻鱼类软骨后的鱼类软骨本身。在本专利技术中特别优选通过(i)得到的冷冻鱼类软骨小片。本专利技术还包含蛋白多糖的提取方法，其中，所述蛋白多糖的提取方法在(A)工序之前，还包括(a )将鱼类软骨冷冻的工序、和/或(P )将冷冻鱼类软骨小片化的工序。冷冻方法没有特别限定，可以使用公知的冷冻方法。例如，可以例示出使用冷冻机，在一 20?一 80°C左右将鱼类软骨保存24?72小时左右的方法。小片化可以利用公知的方法进行。例如，可以使用公知的搅拌器或研磨机等，将鱼类软骨(优选冷冻鱼类软骨)小片化。优选尽可能在低温(例如4°C以下)下进行小片化操作。优选每I小片的冷冻鱼类软骨小片为0.001?0.5g左右，更优选为0.005?0.3g左右，进一步优选为0.001?0.1g左右。优选以能够得到这样的冷冻鱼类软骨小片的方式进行小片化操作。此外，在将鱼类软骨冷冻后即已得到前述程度重量的小片的情况下，也可以不特别地进行小片化操作。此外，虽然没有特别限制，但是在供于本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：加藤阳治，
申请(专利权)人：国立大学法人弘前大学，
类型：
国别省市：