一种地衣芽孢杆菌的固体发酵生产方法技术

本发明专利技术涉及一种地衣芽孢杆菌的固体发酵制备方法及其在养殖中的应用，采用地衣芽孢杆菌作为发酵菌种，在优化的固体培养基中，35~37.5℃培养，经过三级放大而进行大规模发酵生产。生产工艺简单稳定，活菌体密度高，发酵产物无需分离纯化可以直接使用，易于生产和推广。将地衣芽孢杆菌作为饲料添加剂添加到饲料中，能够促进饲料中营养成分的吸收，提高饲料的利用率，同时还能抑制肠道中病害微生物的生长，提高动物的免疫力和成活率。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种地衣芽孢杆菌培养物的制备方法包括以下步骤：??（1）?菌种活化：???本专利技术采用地衣芽孢杆菌（Bacillus?Subtilis）作为发酵菌种，将?80℃保存的地衣芽孢杆菌菌种在种子培养基（胰化蛋白胨?10g，酵母提取物?5g，NaCl?10g，25%浓度MnSO4添加至0.2%，琼脂粉15g，高温高压灭菌备用）固体平板上划线，37℃培养18~20小时；???（2）制备一级种子：???将活化的酿酒酵母菌种，用接种环挑取一环接种于200?mL?液体种子培养基中种子培养基（胰化蛋白胨?10g，酵母提取物?5g，NaCl?10g，25%浓度MnSO4添加至0.2%，高温高压灭菌备用），将三角瓶置于摇床中，37℃，250rpm，振荡培养16~20小时后，制得一级种子液；???（3）配制固体发酵培养基：固体干基：以豆饼粉和玉米粉为基础料（豆饼粉与玉米粉的质量之比为10:1），葡萄糖1.0%，尿素0.3~0.5%，NaCl?1.0%。将固体干基加入质量比为1:1~2的无菌水，pH值为自然条件，搅拌均匀。将固体培养基经121℃、20min高温高压灭菌，待冷却后即可作为固体发酵培养基使用；???（4）固体发酵：将经过灭菌处理的固体发酵培养基按照8~10%的接种量接入一级种子菌，搅拌均匀，保持湿度为50~70%，温度为35~37.5℃培养18~20个小时，制得二级种子。将二级种子按照8~10%的接种量加入灭菌固体发酵培养基中进行扩大培养，搅拌均匀，保持湿度为50~70%，温度为35~37.5℃培养18~20个小时，制得三级种子。可以根据具体的培养用量，进一步将三级种子按照8~10%的接种量进一步扩大培养。将地衣芽孢杆菌培养物进行菌落计数，要求活菌体浓度可达9.15×1010?CFU/g?鲜曲,?芽孢浓度可达7.50×1010?CFU/g?鲜曲，芽孢形成率在80%以上。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：印遇龙，李本涛，夏新界，何宏轩，王从峰，李爱科，佘锐萍，李刚，李帅伟，
申请(专利权)人：广州格拉姆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：