绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒及其拯救方法和应用技术

本发明专利技术公开了绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒及其拯救方法和应用。本发明专利技术将绿色荧光蛋白编码基因插入到猪瘟病毒感染性克隆Npro蛋白编码区的第13位与第14位氨基酸之间，通过转染PK-15细胞、传代，拯救出可视化的绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒。所述重组猪瘟病毒的生长特性与其亲本病毒一致，感染PK-15细胞后通过荧光显微镜直接可视，用其建立的改进中和试验方法（EGFP-NT）能够借助荧光显微镜直接观察猪瘟病毒的存在与否并确定待检血清中的中和抗体效价，无需额外的免疫荧光试验步骤，其特异性和敏感性与传统的中和免疫荧光试验一致，却更加方便快捷，可替代中和免疫荧光试验方法用于猪瘟血清学检测和流行病学调查。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及重组猪瘟病毒，尤其涉及绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒及其拯救方法，本专利技术进一步涉及该绿色荧光蛋白标记重组猪瘟病毒在诊断猪瘟或定量检测血清猪瘟中和抗体效价中的应用，属于猪瘟病毒的诊断或检测领域。
技术介绍
猪痕(classicalswine fever, CSF)是由猪痕病毒(classical swine fever virus, CSFV)引起的猪的一种以高热和出血为特征的高度接触性传染病，猪瘟的流行能够在全世界范围内引起重大经济损失。CSFV与牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virusl, BVDV-1 )、BVDV-2、边界病病毒(border disease virus, BDV)同属于黄病毒科痕病毒属成员(Moser C，Stettler P, Tratschin JD, et al.Cytopathogenic and noncytopathogenic RNA replicons of classical swine fever virus.J.Virol.1999, 73:7787-7794.)。CSFV基因组为线状单本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒，其特征在于：包括猪瘟病毒和绿色荧光蛋白编码基因。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：仇华吉，李永锋，孙元，李素，罗玉子，
申请(专利权)人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，
类型：发明
国别省市：