【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分析检测
,更具体地讲,涉及一种检测邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate, DBP)的酶联免疫分析测定试剂盒及其制备、使用方法。
技术介绍
邻苯二甲酸酯类(PAEs)是增塑剂的主体,广泛应用于农膜、黏合剂、服装、农药、肥料、油漆、化妆品、儿童玩具等行业,具有三致(致癌、致畸、致突)作用,属于环境内分泌干扰物,是环境中常见的痕量有机污染物之一。最常使用的为邻苯二甲酸二乙酯(DEP)JP苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二辛酯(DOP)、邻苯二甲酸二异辛酯(DHEP)和邻苯二甲酸二甲酯(DMP)等。这几种化合物已被美国国家环保局(USEPA)列为“优先监控污染物”。中国已将DMP、DBP、D0P列入优先控制污染物黑名单。《国家饮用水标准》(GB5749-2006)要求DOP < 0.008mg/L,DBP < 0.003mg/L,DEP < 0.3mg/L。《食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准》(GB9685-2008)规定食品、食品添加剂中的DOP < 1.5mg/kg、DINP < 9.0mg/kg>DBP < 0.3mg/kg。由此可见,急需研制出方便、快捷、检出限低的DBP测试方法已迫在 眉睫。目前最引起广泛关注的是DBP的生殖毒性和发育毒性(包括胚胎毒性)。美国NTP的一系列研究表明,DBP可致雄性啮齿类动物睾丸标志酶活性下降、重量减轻、曲细精管变萎缩、生殖道畸形等。2006年11月起,DBP被列入California Proposition65 (1986)可疑致 ...
【技术保护点】
一种检测邻苯二甲酸二丁酯(DBP)酶联免疫检测试剂盒,所述试剂盒包括邻苯二甲酸二丁酯(DBP)标准溶液,固相载体,酶标记物,DBP抗试剂,底物显色液,包被液,酶稀释工作液,终止液及浓缩洗涤液。
【技术特征摘要】
1.一种检测邻苯二甲酸二丁酯(DBP)酶联免疫检测试剂盒,所述试剂盒包括邻苯二甲酸二丁酯(DBP)标准溶液,固相载体,酶标记物,DBP抗试剂,底物显色液,包被液,酶稀释工作液,终止液及浓缩洗涤液。2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述固相载体为微孔板,所述微孔板由邻苯二甲酸二丁酯(DBP)抗原包被,所述酶标记物为辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗,所述DBP抗试剂为DBP抗体,所述底物显色液含四甲基联苯胺(TMB),所述包被液为碳酸盐缓冲液,所述酶稀释工作液为含TWeen20的PBS溶液,所述终止液含浓硫酸,所述浓缩洗涤液为磷酸盐缓冲液。3.根据权利要求2所述试剂盒,其特征在于,所述抗原为邻苯二甲酸二丁酯的高亲和力的完全抗原,所述酶标记物为辣根过氧化物酶标记的DBP抗抗体,DBP酶标物的浓度:250ng/mL, DBP 抗体浓度:200ng/ml,样品稀释液:PH9.6。4.根据权利要求1 3任一项所述试剂盒,其特征在于,所述浓缩洗涤液含有:5.根据权利要求4所述试剂盒,其特征在于,所述浓缩洗涤液含有:6.一种检测邻苯二甲酸二丁酯(DBP)试剂盒的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤: A.制备固相载体:将0.05mol/L的包被液与邻苯二甲酸二丁酯(DBP)完全抗原以适当比例混合,将混合液负载与载体上,用洗涤液清洗酶标板,拍干后用酶标板保护液封闭保护上述洗涤后的载体。B.制备辣根过氧化物标记的羊抗鼠二抗:采用棋盘滴定法选择最佳的酶标记物的工作浓度。酶标二抗溶于酶稀释液中以制备二抗工作液。C.制备DBP抗试剂:用一抗稀释液配制200ng/ml的一抗溶液。D.制备底物显色液:以DMSO为稀释液配制成较低浓度的TMB溶液即成。E.制备浓缩洗涤液: 所述浓缩洗涤液含有:7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述浓缩液含有: Na2HPO4-12H20 2.2...
【专利技术属性】
技术研发人员:时国庆,李谷丰,孙清,
申请(专利权)人:北京普赞生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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