一种用枯草芽孢杆菌工程菌联合降解植物的木质素的方法技术

本发明专利技术公开了一种用枯草芽孢杆菌工程菌联合降解植物的木质素的方法。属生物技术领域。从微生物中克隆锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶和漆酶基因；构建含锰过氧化物酶基因的表达载体、含木质素过氧化物酶基因的表达载体和含漆酶基因的表达载体。分别将以上所述的三种表达载体转化枯草芽孢杆菌，用G418抗性筛选而获得含锰过氧化物酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌、含木质素过氧化物酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌和含漆酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌。将这三种工程菌与植物原料作用而联合降解植物的木质素。本发明专利技术的优点体现于：这三种枯草芽孢杆菌工程菌对木质素的降解作用强于当前应用于降解植物的木质素的天然的微生物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及构建和应用微生物工程菌的方法。具体是应用微生物工程菌降解植物原料的木质素的方法。
技术介绍
猛过氧化物酶(Manganese Peroxidase, MnP)、木质素过氧化物酶(LigninPeroxidase, LiP)和漆酶(Laccase)具有共同降解木质素的作用。植物资源不断再生，十分丰富。植物的基本成分是纤维素、半纤维素和木质素。其中在制造沼气和乙醇业中有用的成分是纤维素，次之是半纤维素。前者由葡萄糖构成，而后者由戊糖构成。这些糖都是转化为乙醇和沼气的物质。但是纤维素分子之间被木质素镶嵌，被镶嵌着的纤维素不能被水解。木质素是广泛存在于植物体中的无定形的、分子结构中含有氧代苯丙醇或其衍生物结构单元的芳香性高聚物，形成纤维支架，结构十分稳定。欲利用纤维素则必须先降解木质素。当前用于降解木质素的方法有物理、化学和生物的方法。物理法主要是机械粉碎法、高温热解预处理以及辐射预处理等，但是物理法耗能大，并且需要特殊设备；化学法主要是酸或碱处理的方法。化学处理法具有工艺简单的特点，但是处理后的纤维素和半纤维素损失大，并 且产生大量的酸碱废气物污染环境。与本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用枯草芽孢杆菌工程菌联合降解植物的木质素的方法，其特征在于：通过分子生物学技术从微生物中克隆锰过氧化物酶基因、木质素过氧化物酶基因和漆酶基因；构建含锰过氧化物酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌表达载体、含木质素过氧化酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌表达载体和含漆酶基因表达框架的表达载体；分别将上述构建的枯草芽孢杆菌表达载体转化枯草芽孢杆菌，并通过G418抗性筛选分别获得表达载体高拷贝重组的含锰过氧化物酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌、含木质素过氧化物酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌和含漆酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌；将以上所述的三种枯草芽孢杆菌工程菌混合应用，通过表达和分泌锰过氧化物酶、木...

【技术特征摘要】
1.一种用枯草芽孢杆菌工程菌联合降解植物的木质素的方法，其特征在于:通过分子生物学技术从微生物中克隆锰过氧化物酶基因、木质素过氧化物酶基因和漆酶基因；构建含锰过氧化物酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌表达载体、含木质素过氧化酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌表达载体和含漆酶基因表达框架的表达载体；分别将上述构建的枯草芽孢杆菌表达载体转化枯草芽孢杆菌，并通过G418抗性筛选分别获得表达载体高拷贝重组的含锰过氧化物酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌、含木质素过氧化物酶基因表达框架...

【专利技术属性】
技术研发人员：张爱联，符仙，杨穗珊，尹慧祥，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：