【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学
,尤其涉及一种采用磁珠法提取病毒DNA或RNA的试剂盒及其使用方法。
技术介绍
核酸研究是现代生物学、医学研究中的重要课题。核酸作为遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础,除了在生物体正常的生长、发育、和繁殖等生命活动中具有十分重要的作用外,它与生命的异常情况,如肿瘤发生、放射损伤、遗传疾病等也有密切关系。因此核酸是现代生物学、医学研究中的重要课题。无论是进行核酸结构与功能的研究,还是进行基因工程、蛋白质工程等的研究,首先都需要对核酸进行分离纯化。在分子生物学研究的初期,核酸分离技术包含沉淀,离心等过程,这些纯化方法的步骤繁杂,费时长,接触有毒试剂,产物纯度和回收率难于满足实验要求,而且难以实现自动化和大规模运用。目前核酸分离技术虽然得到了很大的发展,但均存在一些缺点:例如, 有机法:有机法提取核酸一般是指用平衡酚、氯仿等按不同比例混合,提取核酸。有机法提取核酸应用范围广,适合各种生物样本,对富含蛋白质、多脂的生物样本更为有效。但是有机法应用有毒有机试剂,对人体有害,污染环境;多次换管,容易引起样本交叉污染。NaOH法=NaOH ...
【技术保护点】
一种采用磁珠法提取病毒DNA或RNA的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括裂解液、清洗液1、清洗液2、清洗液3、洗脱液和磁珠悬浮液;其中,清洗液2:体积分数为75%的乙醇水溶液;清洗液3:?0.01?0.03?mol/L的Tris水溶液,pH值为4.0~5.0;?洗脱液:去离子水;磁珠悬浮液:磁珠含量为40?60mg/ml,磁珠颗粒直径为1.5?2.5μm。
【技术特征摘要】
2012.11.26 CN 201210484419.X1.一种采用磁珠法提取病毒DNA或RNA的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括裂解液、清洗液1、清洗液2、清洗液3、洗脱液和磁珠悬浮液;其中, 清洗液2:体积分数为75%的乙醇水溶液; 清洗液3: 0.01-0.03 mol/L的Tris水溶液,pH值为4.0 5.0 ; 洗脱液:去离子水; 磁珠悬浮液:磁珠含量为40-60mg/ml,磁珠颗粒直径为1.5-2.5 μ m。2.根据权利要求1所述的采用磁珠法提取病毒DNA或RNA的试剂盒,其特征在于,所述裂解液的配置方法为:称取472.6 768.0g异硫氰酸胍或477.7 716.5g盐酸胍、12.Γ6.1gTris或29.Γ14.7g柠檬酸钠,用去离子水溶解后,调整pH至6.0 6.8,加入7(Tl50mlTriton X_100、20ml 0.5M EDTA_2Na 和 50ml Acryl Carrier,混匀后,用去离子水定容至IOOOml03.根据权利要求1所述的采用磁珠法提取病毒DNA或RNA的试剂盒,其特征在于,所述清洗液I的配置方法为:称取472.6 590.1g异硫氰酸胍或382.2 573.2g盐酸胍、12.Γ6.1g Tris或29.4 14.7g柠檬酸钠,用去离子水溶解后,调整pH至6.0 6.8,加入350 600ml的无水乙醇,混勻后,用去离子水定容至1000ml。4.权利要求1所述采用磁珠法提取病毒DNA或RNA的试剂盒的使用方法,其特征在于,按照如下步骤进行: 1)在1.5ml的离心管中加入200ul血清/血浆样本和400_500ul的裂解液,迅速震荡混勻2min,再加入30_4 0ul磁珠悬...
【专利技术属性】
技术研发人员:李旭新,杨玉芬,
申请(专利权)人:福州泰普生物科学有限公司,
类型:发明
国别省市:
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