一种复合污染河流底泥微生物总DNA提取的前处理方法技术

本发明专利技术公开了一种复合污染河流底泥微生物总DNA提取的前处理方法。它是将复合污染河流底泥样品置于去腐试剂中，65℃振荡混匀，然后离心去上清收集沉淀底泥；再加入去腐试剂中，振荡混匀，离心去上清收集沉淀底泥，如此重复洗涤，直至上清为无色，即得到前处理后的样品；所述的去腐试剂为含有0.1M?EDTA，pH8.0?0.1M?Tris-HCl，1.5M?NaCl，0.1M?NaH2PO4和0.1M?Na2HPO4，余量为水。利用常规方法提取前处理后的复合污染河流底泥中微生物总DNA，能够获得完整的、高质量的微生物总DNA，可较好地满足后续微生物群落结构及其生态功能研究的相关要求，有利于后续分子操作，为污染河流监测和修复的研究提供技术保障。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体涉及一种复合污染河流底泥微生物总DNA提取的前处理方法。
技术介绍
:河流沉积物中的微生物可对污染物进行有效地分解和转化，并快速、灵敏地反映河流的污染状况，在河流生态修复和健康状况监测方面发挥着重要的作用。现已知所能培养得到的微生物只占总微生物数量的不到1%。随着现代分子生物学、基因组学、生物信息学的快速发展，研究者们可以利用免培养的手段开展微生物的相关研究，为了解河流健康状况和发展河流污染治理的微生物技术提供科学依据和理论指导。其中，完整的、高质量的、有利于后续分子操作的微生物总DNA的获取，是开展相关工作的重要保障。然而，由于污染河流沉积物成分复杂，其中的污染物成份不仅能抑制提取过程中所使用试剂(SDS、溶菌酶、蛋白酶K)的作用，影响DNA的抽提效果，而且有些与DNA沉降性质相似的腐殖酸等污染物可与DNA共同沉淀析出，导致其质量的下降，从而影响其后续分子水平的操作，甚至实验数据的可靠性。如何在DNA提取过程中有效地去除河流沉积物中的污染物，是保证河流沉积物微生物总DNA质量的关键。 从环境样品中直接分离DNA的过程中，去除样品中的抑制物的策略大体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合污染河流底泥微生物总DNA提取的前处理方法，其特征在于，将复合污染河流底泥样品置于去腐试剂中，65℃振荡混匀，然后离心去上清收集沉淀底泥；再加入去腐试剂中，振荡混匀，离心去上清收集沉淀底泥，如此重复洗涤，直至上清为无色，即得到前处理后的样品；所述的去腐试剂为含有0.1M?EDTA，pH8.00.1M?Tris?HCl，1.5M?NaCl，0.1M?NaH2PO4和0.1M?Na2HPO4，余量为水。

【技术特征摘要】
1.一种复合污染河流底泥微生物总DNA提取的前处理方法，其特征在于，将复合污染河流底泥样品置于去腐试剂中，65°C振荡混匀，然后离心去上清收集沉淀底泥；再加入去腐试剂中，振荡混匀，离心去上清收集沉淀底泥，如此重复洗涤，直至上清为无色，即得到前处理后的样品； 所...

【专利技术属性】
技术研发人员：许玫英，方云，陈杏娟，孙国萍，
申请(专利权)人：广东省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：