一种快速分离纯化基因组DNA的方法及试剂盒技术

技术编号:8932046 阅读:187 留言:0更新日期:2013-07-17 23:45
本发明专利技术公开了一种快速分离纯化基因组DNA的方法及试剂盒,所述试剂盒包括裂解液、磁性微粒、清洗液和洗脱液,本发明专利技术提供了一种用磁性微粒法全过程不需加热可快速分离纯化得到高纯度基因组DNA的方法及试剂盒;提取时间短、操作简单,20分钟内可完成一次操作;灵敏度高,小到2ul大到1ml的样本都可处理。纯化得到的DNA可用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等等下游实验。

Method and kit for quickly separating and purifying genomic DNA

The invention discloses a method for rapid separation and purification of genomic DNA reagent kit, the kit includes cracking liquid, magnetic particles, cleaning liquid and washing liquid, the invention provides a magnetic particle method in the whole process without heating can be rapid purification method and reagent to obtain high purity genomic DNA kit; short extraction time, simple operation, 20 minutes can complete an operation; high sensitivity, small to 2ul to 1ml sample processing. The purified DNA can be used for enzyme digestion, PCR, library construction, Southern hybridization, and so on.

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速分离纯化基因组DNA的试剂盒,所述试剂盒包括裂解液、磁性微粒、清洗液和洗脱液,其特征在于所述试剂盒由如下试剂组成:a??所述裂解液包括裂解液Ⅰ和裂解液Ⅱ;所述裂解液Ⅰ包括10?70mM三羟甲基氨基甲烷、0.1?50mM螯合离子、50?500mM钠盐、0.2?5%阴性离子去污剂、0.5?10%中性去污剂和0.1?0.5mg/ml的蛋白酶K,所述裂解液Ⅰ的pH值7?9;所述裂解液Ⅱ包括30?100mM三羟甲基氨基甲烷、0.2?5%阴性离子去污剂、2?6M胍盐和10?40%的醇,所述裂解液Ⅱ的pH值6?7.5;b??所述磁性微粒包括磁性微粒的悬浮液和磁性微粒,所述磁性微粒悬浮液包括5?50mM三羟甲基氨基甲烷及50?100%乙醇或异丙醇两种中的一种;所述磁性微粒为纳米级或微米级硅包被的磁性微球,每毫升的磁性悬浮液中的磁性微粒为20?100mg;c??所述清洗液包括清洗液Ⅰ和清洗液Ⅱ;所述清洗液Ⅰ包括0?5M胍盐、0?50%的醇、0?10mM三羟甲基氨基甲烷、0?200mM醋酸钾和0?5%中性去污剂,所述清洗液Ⅰ的pH值6?7;所述清洗液Ⅱ为10?80%的醇;d??所述洗脱液为10?20mM三羟甲基氨基甲烷,所述洗脱液的pH值7.5?9。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王兴晟郭丽敏
申请(专利权)人:兰州美伯生物医药技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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