本发明专利技术申请提供一种检测EB病毒抗体的试剂装置及其方法，所述的试剂装置为长条状，包括具有八个孔位的基体和位于基体一端的手柄，八个孔位的排列顺序从近手柄端开始依次为样本孔、辅剂孔、酶结合物孔、底物孔、终止液孔、稀释液孔、反应孔和稀释孔。本发明专利技术申请基于酶联免疫检测的原理，利用上述的试剂装置对EB病毒抗体进行检测，是一种独立的、单人份的分析检测方法，并且可以与相应的特定分析仪器配合使用，在检测过程中，用全自动的精密加液器来加注检测试剂或样本，具有操作自动化，加量精确，检测结果的准确度和精密度高的优点，具有广阔的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术申请涉及一种检测EB病毒抗体的试剂装置及其方法，属于临床免疫学检测
技术介绍
EB 病毒(epstein-barr virus, EBV),又称人类疱疫病毒(Human herpesvirus4,HHV-4)，其形态与其他疱疹病毒相似，为圆形，直径180nm，基本结构含核样物、衣壳和囊膜三部分。囊膜由感染细胞的核膜组成，其上有病毒编码的膜糖蛋白，有识别淋巴细胞的EB病毒受体及与细胞融合等功能，此外在囊膜与衣壳之间还有一层蛋白被膜。EB病毒是一种嗜B细胞的人类疱疹病毒，主要侵犯B细胞，对人的B淋巴细胞、咽上皮细胞和腺细胞有亲和力。过去认为只有B细胞表面有EBV受体，但最近发现在腮腺管、咽以及宫颈外的某些上皮细胞亦有EBV受体，因此EBV亦可以感染上皮细胞。一旦感染，EBV将长期潜伏在人体B细胞中，受感染者将成为终生带毒者。在一定的条件或某些诱导因子的作用下，潜伏感染细胞中的EBV基因组被激活而表达，转化为增殖性感染。由EBV感染引起或与EBV感染有关疾病主要有传染性单核细胞增多症、非洲儿童淋巴瘤(即Burkitt淋巴瘤)、鼻咽癌。被病毒感染的细胞具有EBV的基因组，可产生各种抗原，主要有:EBV核抗原(EBNA)、早期抗原(EA)、膜抗原(MA)、衣壳抗原(VCA)和淋巴细胞识别膜抗原(Iydma)，人体感染EBV后能诱生抗EBNA抗体，抗EA抗体，抗VCA抗体及抗MA抗体。EB病毒衣壳抗原IgG和IgM抗体阳性通常是传染性单核细胞增多症的血清学诊断指标。EB病毒感染的恢复期时，衣壳抗原IgG抗体阳性，可终生存在；EB病毒既往感染时，EBV VCA IgG轻度升高；有慢性活动性EB病毒感染时，出现高滴度的EBV VCA IgG。EB病毒感染处于急性期时，EB病毒抗衣壳抗原抗体IgM阳性；近期感染或病毒持续活动状态时，EBV VCA IgM升高，故早期EBV VCA IgM检查是EB病毒感染的可靠的指标之一。抗EB病毒核心抗原抗体一般于发病I个月后开始出现，逐渐升高，终生持续存在。在染上单核白血球增多症的过程中，病毒衣壳抗原抗体最早产生，核心抗原抗体之后产生，主要是IgG类抗体，而IgA类抗体主要应用于鼻咽癌的血清学诊断。EB病毒早期抗原IgG、IgM、IgA抗体主要应用于鼻咽癌的血清学诊断。临床上通常可以根据需要同时检测两种或两种以上的抗体，作为鼻咽癌早期发现、预后判断以及疗效观察的有用指标。临床检测EB病毒抗体的常见方法包括金标法、间接免疫荧光法、滴金免疫测定法、酶联免疫吸附试验的方法，但这些方法都存在着不足之处。一、金标法金标法是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，胶体金已经广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。该方法快速、敏感性高，但其特异性差，假阳性率较高，且只能做定性检测，不能定量。二、间接免疫荧光法该法的基本原理是用特异性的抗体与载玻片中的抗原结合后形成抗原抗体复合物，继用荧光抗体与抗原抗体复合物结合，形成抗原抗体荧光复合物。在荧光显微镜下，根据复合物的发光情况来确定所检测的抗体。该方法由于结合在抗原抗体复合物上的荧光抗体增多，发出的荧光亮度强，因而其敏感性强。但是其不足也是明显的:(I)在分析结果时无法根据分子量的大小区分非特异性识别；(2)操作相对复杂，需要价格较昂贵的荧光显微镜，在很多基层医院难以推广，也不太适用于标本量较多的实验室；(3)荧光测定中的本底较高，荧光免疫技术用于定量测定有一定困难；(4)结果判定需要有经验的专业人员，分析结果的客观性不足；(5)只能进行定性检测，不能进行定量检测。三、滴金免疫测定法(滴金法)滴金免疫测定法是在80年代后期发展起来的一种简便快速的斑点免疫结合试验，其基本原理是以微孔滤膜为载体，以胶体金为免疫标记物，通过膜的渗滤作用，使抗原抗体反应在膜上迅速完成，最终阳性结果在膜上出现红色斑点。滴金法的特点是操作简便、快速，可在短时间内完成测定，且为单份测定，也不需任何仪器设备。但该方法成本价格昂贵，特异性差，假阳性率较高，且只能做定性检测，不能定量。四、酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法(ELISA)被广泛应用于检测EB病毒抗体，但该方法也存在着下述的不足之处:(I)使用12 X 8型、6 X 8型、8 X 12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原包被用具和反应容器，在使用时只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，无法进行独立的、单人份的检测；(2)测定所用的试剂种类较多，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类多，加注试剂的操作也极为繁琐；(3)缺少对检测信息的相应标注，只能通过查看试剂盒外包装盒的标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中不受控，具有很大的随意性；(4)检测试剂在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果的准确性；(5)检测过程多采用手工操作，试剂或样本的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测结果的准确度和精密度较差；(6)在检测项目成套试剂的数量配置及使用上均为项目数X48/96人份，如果需要检测10个项目，则试剂的配置及使用数须为10X48/96人份，如果只有一份样本需要检测10个不同的项目，也需要配置10X48/96人份的试剂，存在着不够经济合理的缺点。
技术实现思路
本专利技术专利申请即是针对目前对于EB病毒抗体的检测中存在的上述不足之处，提供一种能够进行独立单人份检测的试剂装置及其检测方法。本专利技术专利申请基于酶联免疫检测的原理来实现EB病毒抗体的检测，是一种独立的、单人份的、一次性的检验方法；进一步的，本专利技术申请还提供了与该方法配套的相应的试剂装置，该试剂装置将EB病毒抗体酶联免疫检测所需要的多种试剂盛装在一个独立的、多孔结构的试剂装置内，通过分步加注、移弃完成检测步骤；进一步的，所述的试剂装置还可以通过专用的免疫分析仪进行相应的全自动检测。本专利技术申请的目的之一是提供一种检测EB病毒抗体的试剂装置，该目的是通过下述的技术方案实现的:具体来说，本专利技术申请所述的检测EB病毒抗体的试剂装置为长条状，包括具有八个孔位的基体和位于基体一端的手柄，八个孔位的排列顺序从近手柄端开始依次为样本孔、辅剂孔、酶结合物孔、底物孔、终止液孔、稀释液孔、反应孔和稀释孔，样本孔内盛有待测样本，辅剂孔供检测有需要时加入辅助试剂使用，酶结合物孔内盛有酶结合物溶液，底物孔内盛有底物溶液，终止液孔内盛有终止液，稀释液孔内盛有稀释液，反应孔为平底且具有高的光通透性，孔内包被有EB病毒蛋白抗原，并作为反应容器加注待测的液体样本和检测试剂及洗涤液，反应终止后进行吸光度测定，稀释孔作为样本稀释容器，供稀释样本时用。进一步的，所述的试剂装置中，当检测EB病毒抗体IgG时，辅剂孔不加入任何试齐U，当检测EB病毒抗体IgM时，吸附剂加入辅剂孔内或与稀释液一起加入稀释液孔中。进一步的，所述的试剂装置中，辅剂孔、酶结合物孔、底物孔、终止液孔和稀释液孔上覆盖有密封薄膜本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种检测EB病毒抗体的试剂装置，其特征在于：所述的试剂装置为长条状，包括具有八个孔位的基体和位于基体一端的手柄，八个孔位的排列顺序从近手柄端开始依次为样本孔、辅剂孔、酶结合物孔、底物孔、终止液孔、稀释液孔、反应孔和稀释孔，样本孔内盛有待测样本，辅剂孔供检测有需要时加入辅助试剂使用，酶结合物孔内盛有酶结合物溶液，底物孔内盛有底物溶液，终止液孔内盛有终止液，稀释液孔内盛有稀释液，反应孔为平底且具有高的光通透性，孔内已包被有EB病毒蛋白抗原，并作为反应容器加注待测的液体样本和检测试剂及洗涤液，反应终止后进行吸光度测定，稀释孔作为样本稀释容器，供稀释样本时用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：胡德明，刘清波，何林，阳辉，
申请(专利权)人：深圳市亚辉龙生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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