本发明专利技术公开了一种高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1含量的方法，包括以下步骤：(1)制备供试样品；(2)高效液相色谱测定；条件如下：色谱柱：Si柱；柱温：25-35℃；流动相：V(二氯甲烷)：V(正己烷)=40-60：60-40V/V；流速：0.8-1.2mL/min；洗脱时间：8-12分钟；检测波长：265-275nm。本发明专利技术的高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1含量的方法前处理简单，基质干扰小且准确度高，能适用于各种不同类型化妆品中维生素K1含量的准确测定，也非常适合化妆品中维生素K1的批量检测；为化妆品产品的质量控制和安全监测提供重要技术支持，具有良好的经济与社会效益。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化妆品分析领域，特别是涉及一种高效液相色谱法测定化妆品中维生素Kl的方法。
技术介绍
维生素Kl属维生素类药物，主要用于各种维生素K缺乏引起的出血性疾病的治疗。在化妆品方面，维生素Kl特别用于治疗酒糟鼻和弥漫性红斑，并用于在外科手术后使用的膏霜中。然而，由于使用含有维生素Ki的化妆品容易引发严重的过敏反应，法国健康品卫生安全局于2006年3月8日签发了关于禁止生产、包装、进口、批发、无偿提供或出售、为了销售或无偿分发或有偿分销而持有以及使用的含有维生素Kl化妆品的法规。2009年，欧盟新发布化妆品指令，在化妆品中禁止使用维生素K1。然而，我国暂未出台相关的化妆品规范和标准对维生素Kl在化妆品中的使用进行限制。目前，关于维生素类物质的检测研究报道众多，而针对维生素Kl的检测方法主要有液相色谱/紫外检测法、液相色谱-电化学检测法、液相色谱-柱后衍生法和液相色谱-串联质谱法。研究对象主要是奶粉、食品及药品注射液等，而关于化妆品中维生素Kl的检测方法较少，由于化妆品样品种类繁多，基质复杂，以上方法较难应用化妆品中维生素Kl的检测。谭建华等建立了反相高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1，但该方法前处理较为繁琐，对于膏霜等样品需要采用固相萃取进行净化，且很难应用于精油样品的检测。综上所述，采用新型色谱分离技术对各种类型的化妆品中的维生素Kl进行准确定量测定，能促进对日用化工产品的产品质量进行有效地监督和管理，对保证消费者的健康安全具有非常重要的意义。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种前处理简单、能适用各种类型的化妆品的高效液相色谱法测定化妆品中维生素Kl含量的方法。一种高效液相色谱法测定化妆品中维生素Kl含量的方法，包括以下步骤:(I)、制备供试样品精确称取样品，加入正己烷提取2-3次，或加入乙腈将所述样品分散，再加入正己烷提取2-3次，合并提取液，正己烷定容，冷冻离心，上清液过滤膜，即为供试样品；(2)、高效液相色谱测定将步骤⑴的供试样品进行高效液相色谱测定，色谱条件为:色谱柱:Si柱；柱温:25-35O;流动相:二氯甲烷:正己烷=40-60:60-40V/V ；流速:0.8-1.2mL/min ；洗脱时间:8-12分钟；检测波长:265_275nm。在其中一个实施例中，步骤(2)中所述色谱柱的规格为4.6χ250_，5μπι。在其中一个实施例中，步骤⑵中所述柱温为30°C。在其中一个实施例中，步骤(2)中所述流动相为体积比40:60的二氯甲烷和正己烧。在其中一个实施例中，步骤(2)中所述流速为lmL/min,洗脱10分钟。在其中一个实施例中，所述步骤⑴为:准确称取1.0g水剂类化妆品，加入5mL正己烧，充分润旋提取2min, 15000r/min离心5min,取上清液,再加5mL正己烧,重复以上步骤，合并上清液，正己烷定容至10mL，0.45 μ m滤膜过滤，得到供试样品。在其中一个实施例中，所述步骤(I)为:准确称取1.0g膏霜或乳液类化妆品，力口入4mL乙腈,镟润振荡使样品分散,加入5mL正己烧,充分润旋提取2min, 15000r/min离心5min,取上清液，再加5mL正己烷，重复以上步骤，合并上清液，正己烷定容至10mL，0.45 μ m滤膜过滤，得到供试样品。在其中一个实施例中，所述步骤(I)为:准确称取1.0g精油类化妆品，加入正己烷并定容至IOmL,充分润旋提取2min,超声提取IOmin, 15000r/min离心5min, 0.45 μ m滤膜过滤，得到供试样品。本专利技术采用正相高效液相色谱法测定化妆品中维生素Kl的含量，对维生素Kl含量的定量限(S/N=10)为5.0mg/kg，平均回收率为92.4% 102.0%，相对标准偏差小于8.6%。采用本专利技术的方法检测化妆品中维生素Kl的含量，前处理简单，基质干扰小且准确度高，能适用于各种不同类型化妆品中维生素Kl含量的准确测定，也非常适合化妆品中维生素Kl的批量检测；为化妆品产品质量控制，化妆品产品安全监测提供重要技术支持，具有良好的经济与社会效益。附图说明图1为本专利技术实施例1的维生素Kl的标准溶液色谱图；图2为本专利技术实施例1的维生素Kl的标准曲线图；图3为本专利技术实施例1的化妆水供试样品色谱图；图4为本专利技术实施例2的添加浓度为50mg/kg维生素Kl的化妆水供试样品色谱图；图5为本专利技术实施例3的霜膏供试样品色谱图；图6为本专利技术实施例4的添加浓度为50mg/kg维生素Kl的霜膏供试样品色谱图；图7为本专利技术实施例5的精油供试样品色谱图；图8为本专利技术实施例6的添加浓度为50mg/kg维生素Kl的精油供试样品色谱图。具体实施例方式以下结合附图和具体实施方式对本专利技术做进一步的阐述。实施例1高效液相色谱法测定化妆水中维生素Kl的含量(I)、制备供试样品准确称取1.0g(精确至0.0Olg)试样，于IOmL具塞塑料离心管中，加入5mL正己烧，充分润旋提取2min, 15000r/min离心5min,取出上层清液；再加5mL正己烧于原离心管中，重复以上步骤。将两次提取的正己烧上清液合并，用正己烧定容至IOmL,用0.45μηι滤膜过滤，过滤过的澄清液，即为供试样品；(2)、高效液相色谱测定精密吸取步骤⑴的供试样品10 μ L，进行高效液相色谱测定，条件如下:色谱柱:菲罗门Si柱，规格为4.6x250mm，半径为5μπι;柱温为:30°C;流动相为:V (二氯甲烷):V(正己烷)=40:60 ;恒流速为:lmL/min；洗脱时间:10分钟；检测器:WaterS 二级管矩阵检测器(PDA)，检测波长为271nm。(3)、建立维生素Kl对照品色谱图准确称取维生素Kl (纯度大于99.0%，Sigma-Aldrich)，配制500.0mg/L的维生素Kl标准溶液，精密吸取IOyL,按照步骤(2)的高效液相色谱条件进行测定，得到维生素Kl对照品的色谱图；所述维生素Kl对照品的色谱图如图1所示；由图1可知，维生素Kl的出峰时间为8.012min;(4)、绘制维生素Kl的标准曲线以正己烧为溶剂，分别配制浓度为0.0mg/L、0.5mg/L、l.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L,50.0mg/L的维生素Kl标准溶液，按浓度由低到高精密吸取10 μ L，按照步骤(2)的高效液相色谱条件依次进行检测，以色谱峰面积为纵坐标，以维生素Kl标准溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线，获得R2值，所述标准曲线如图2所示。由图2可知，维生素Kl浓度在0.5 50.0mg/L范围内，浓度与其对应的峰面积值呈良好线性关系，求得线性回归方程为y=20523x+1066.4，R2为0.9998。(5)、按步骤⑵的色谱条件对步骤⑴的供试样品进行测定，得到供试样品的色谱图；所述供试样品的色谱图如图3所示，化妆水的供试样品在8.012min附近没有峰出现，即化妆水的供试样品中未检测出维生素K1。实施例2高效液相色谱法测定添加浓度为50mg/kg维生素Kl的化妆水中维生素Kl的含量(I)、制备供试样品同实施例1的步骤(I);(2)、高效液相色谱测定同实施例1的步骤⑵；(3)、供试样品的色谱图如图4所示，由图4可知，供试样品化妆水在8.045min有峰出现，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、制备供试样品精确称取样品，加入正己烷提取2?3次；或加入乙腈将所述样品分散，再加入正己烷提取2?3次；合并提取液，正己烷定容，冷冻离心，上清液过滤膜，即为供试样品；(2)、高效液相色谱测定将步骤(1)的供试样品进行高效液相色谱测定，色谱条件为：色谱柱：Si柱；柱温：25?35℃；流动相：二氯甲烷：正己烷=40?60:60?40V/V；流速：0.8?1.2mL/min；洗脱时间：8?12分钟；检测波长：265?275nm。
【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱法测定化妆品中维生素Ki含量的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)、制备供试样品 精确称取样品，加入正己烷提取2-3次；或加入乙腈将所述样品分散，再加入正己烷提取2-3次；合并提取液，正己烷定容，冷冻离心，上清液过滤膜，即为供试样品； (2)、高效液相色谱测定 将步骤(1)的供试样品进行高效液相色谱测定，色谱条件为: 色谱柱=Si柱；柱温:25-35 0C ； 流动相:二氯甲烷:正己烷=40-60:60-40V/V ；流速:0.8-1.2mL/min ； 洗脱时间:8-12分钟；检测波长:265-275nm。2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定化妆品中维生素Kl含量的方法，其特征在于，步骤(2)中所述色谱柱的规格为4.6x250mm, 5 μ m。3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定化妆品中维生素Kl含量的方法，其特征在于，步骤(2)中所述柱温为30°C。4.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定化妆品中维生素Kl含量的方法，其特征在于，步骤(2)中所述流动相为体积比40:60的二氯甲烷和正己烷。5.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定化妆品中维生素Kl含量的方法，其特征在于，步骤...
【专利技术属性】
技术研发人员：席绍峰，李慧勇，谭建华，
申请(专利权)人：广州市质量监督检测研究院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。