抗喹乙醇单克隆抗体及其杂交瘤细胞株、其制备方法及用于检测饲料中喹乙醇的试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种具有高效价及灵敏度的高特异性抗喹乙醇单克隆抗体，并公开了能够生产抗喹乙醇单克隆抗体的具有保藏号为CGMCCNo.6260的杂交瘤细胞株、其制备方法及用于检测饲料中喹乙醇的试剂盒。本发明专利技术的有益效果为：本发明专利技术提供的抗喹乙醇单克隆抗体具有较高特异性和灵敏度，并且线性范围大，能够用于建立快速检测饲料中喹乙醇非法添加的免疫学方法，其应用方法为间接竞争ELISA酶联免疫试剂盒与胶体金试纸条，该方法对仪器设备和人员操作的要求较低，检测成本低，能够满足对大批量饲料样品检测的需要。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及小分子免疫化学分析与检测
，具体涉及喹乙醇单克隆抗体及其杂交瘤细胞株、其制备方法及用于检测饲料中喹乙醇的试剂盒。
技术介绍
喹乙醇(o-laquindox，OLA)又称喹酰胺醇，化学名称为2_羟乙基氨基甲酰_3_甲基-喹喔啉-1，4- 二氧化物，具有良好的广谱抗菌效果，对大肠杆菌、沙门氏杆菌等革兰氏阴性致病菌所致的消化道疾病具有良好的疗效，并且能够促进畜禽对饲料的消化利用，提高生长速度，在动物性食品生产中发挥了一定的作用。大量的国内外研究报告表明:残留于动物组织中的喹乙醇是一种基因毒剂和生殖腺诱变剂，不但能使动物发生中毒或死亡，并且残留在畜产品中对人体也有较大的危害。因此，2001年农业部发布的《饲料药物添加剂使用规范》规定，禁止喹乙醇用于家禽及水产养殖，并且只能用于低于35 kg体重的猪饲料，使用量为50 g/t饲料。近几年来，一些饲料生产企业和养殖户受经济利益驱动，违规大剂量、长期使用喹乙醇的现象仍很严重，为了确保人类安全与健康，开展饲料及饲料添加剂中喹乙醇含量检测的工作有重要意义。饲料中喹乙醇的检测方法主要是高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法，但此方法不本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有保藏号为CGMCC?No.6260的小鼠脾细胞?骨髓瘤杂交瘤细胞。

【技术特征摘要】
1.具有保藏号为CGMCCN0.6260的小鼠脾细胞-骨髓瘤杂交瘤细胞。2.根据权利要求1所述的具有保藏号为CGMCCN0.6260的杂交瘤细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)制备喹乙醇衍生物一载体蛋白偶联物，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清白蛋白或钥孔嘁血蓝蛋白；所述喹乙醇衍生物为结构式为式(I )的化合物3.具有高特异性的抗喹乙醇单克隆抗体，其特征在于，是由保藏号为CGMCCN0.6260的杂交瘤细胞株产生的。4.根据权利要求3所述的具有高特异性的抗喹乙醇单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: а)腹水的制备:取成年BALB/C雌性小鼠按0.5ml/只腹腔注射液体石蜡，10天后腹腔注入权利要求1所述杂交瘤细胞株，注入量为I 5 X IO6个/只，注射10 14天后进行无菌操作采集腹水，将采集到的腹水以转速1000 rpm离心10 min，收集中间层澄清液体，SP得到腹水型单克隆抗体； b)抗体纯化:将步骤a)得到的离心后的腹水上清用饱和硫酸铵沉淀，获得抗喹乙醇单克隆抗体粗品j^Sephacryl S-200层析柱进行纯化分离，收集阳性管的腹水蛋白，得到抗喹乙醇单克隆抗体。5.根据权利要求3所述的具有高特异性的抗喹乙醇单克隆抗体在定性和定量检测饲料中喹乙醇中的应用。6.一种利用具有高特异性的抗喹乙醇单克隆抗体检测饲料中喹乙醇的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括以下组成: 1)用含有喹乙醇衍生物一卵清白蛋白偶联物的包被缓冲液包...

【专利技术属性】
技术研发人员：李建喜，张景艳，王磊，杨志强，张凯，王学智，张宏，秦哲，孟嘉仁，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，
类型：发明
国别省市：