基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法，包括：FA连接到NH2-PEG-COOH上形成COOH-PEG-FA；水热法合成PEI包覆的Fe3O4纳米颗粒（Fe3O4-PEI）；Fe3O4-PEI纳米颗粒表面修饰异硫氰酸荧光素(FI)；COOH-PEG-FA连接到Fe3O4纳米颗粒的表面；最后对Fe3O4纳米颗粒表面PEI剩余氨基进行乙酰化修饰以增加其生物相容性，用于MRI成像诊断。本发明专利技术工艺简单，反应条件温和，易于操作；制备的Fe3O4磁性纳米颗粒具有良好的胶体稳定性、生物相容性和肿瘤靶向性，在体内肿瘤靶向诊断领域具有潜在的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法
本专利技术属于核磁共振成像造影剂的制备领域，特别涉及一种基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法。
技术介绍
一直以来，恶性肿瘤都是危害人类生命的头号杀手，具有死亡率高、难治疗以及恶化迅速等特点。因此，肿瘤的早期诊断和特异性治疗显得尤为重要。目前，肿瘤的检测手段各种各样，主要有:超声成像、CT成像、核医学PET成像以及核磁共振成像(MRI)。随着核磁共振技术的发展，其扫描时间逐渐缩短，分辨率逐渐提高，对于小病灶的检测也更加准确，这也使得核磁共振成像技术成为近几年发展起来的新型疾病检测手段。为了提高MRI成像诊断的灵敏度和特异性，有必要选择合适的MRI造影剂。常规的MRI造影剂主要分为两类:一类是T1加权的MRI造影剂，一类是T2加权的MRI造影剂。T1加权的MRI造影剂主要是Gd基配合物，然而，Gd为重金属元素，小分子Gd试剂在体内停留时间过短，其临床注射剂量较大，且Gd试剂具有很强的肾毒性，特别是对肾功能不全患者危害尤甚。而T2加权的MRI造影剂主要是超顺磁Fe3O4为代表的金属铁氧化物纳米粒子，超顺本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法，包括：（1）将亚铁盐溶解于超纯水中，加入NH3·H2O并于空气气氛下搅拌，然后将混合溶液转移到高压反应釜中，并将0.1g/mL的超支化聚乙烯亚胺PEI水溶液也加入到高压反应釜中，搅拌混合均匀后，于130～140℃反应2～4小时；反应结束后，自然冷却至室温，将沉淀分离洗涤纯化后，即得PEI包裹的四氧化三铁纳米颗粒Fe3O4?PEI；（2）将FA溶解于DMSO中后，先用EDC和NHS活化2～4h，然后逐滴加入到NH2?PEG?COOH的DMSO溶液中，搅拌反应2～4天，透析，然后真空冷冻干燥，即得COOH?PEG?FA；（3）将步骤...

【技术特征摘要】
1.一种基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法，包括: (1)将亚铁盐溶解于超纯水中，加入NH3.H2O并于空气气氛下搅拌，然后将混合溶液转移到高压反应釜中，并将0.lg/mL的超支化聚乙烯亚胺PEI水溶液也加入到高压反应釜中，搅拌混合均匀后，于130 140°C反应2 4小时；反应结束后，自然冷却至室温，将沉淀分离洗涤纯化后，即得PEI包裹的四氧化三铁纳米颗粒Fe3O4-PEI ； (2)将FA溶解于DMSO中后，先用EDC和NHS活化2 4h，然后逐滴加入到NH2-PEG-C00H的DMSO溶液中，搅拌反应2 4天，透析，然后真空冷冻干燥，即得C00H-PEG-FA ； (3)将步骤(I)中制备的Fe3O4-PEI纳米颗粒用DMSO洗涤后，重新分散于DMSO中，再将DMSO溶解的FI溶液加入到上述Fe3O4-PEI的DMSO溶液中，搅拌反应I 3天后，产物Fe3O4-PE1-FI分离洗涤，然后分散到DMSO中； (4)步骤(2)中制备的C00H-PEG-FA以及EDC和NHS溶解于DMSO后，搅拌活化2 4h;然后将活化的C00H-PEG-FA溶液加入到步骤(3)制备的Fe3O4-PE1-FI溶液中，搅拌反应2 4天，再分离洗涤，并分散于超纯水中，得到Fe3O4-PE1-F1-PEG-FA纳米颗粒水溶液； (5)向步骤(4)制备的Fe3O4-PE1-F1-PEG-FA纳米颗粒水溶液中加入三乙胺，并搅拌20 40分钟；然后向上述溶液中加入乙酸酐，继续搅拌反应20 30小时；分离洗涤并分散于超纯水中，即得。2.根据权利要求1所述的一种基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法，其特征在于:所述步骤(I)中的亚铁盐为FeCl2.4Η20，亚铁盐、超纯水、NH3 -H2O的配比为I 1.5g: 7....

【专利技术属性】
技术研发人员：沈明武，李静超，蔡红东，史向阳，张贵祥，郑林丰，
申请(专利权)人：东华大学，上海市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：