【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】交叉引用美国相关专利申请本专利技术要求美国临时专利申请的优先权(申请号:N0.61/362，078，申请日:2010年7月7日)，在此将其作为参考文献整体引用并到本专利技术中。关于美国联邦资助研究的说明本专利技术得到美国政府的资助，获得NIH基金，合同号为GM086703。因此政府拥有本专利技术的某些权利。
技术介绍
沉默信息调控蛋白2 (Sir2)或者叫去乙酰化酶(Sirtuins)，是一个具有辅酶(nicotinamide adenine dinucleotide, NAD)依赖蛋白去乙酰活性的进化保守的酶家方矣(A.A.Sauve, et al., Annu.Rev.Biochem.75:435 (2006) ；S.-1.1mai, et al., Trendsin Pharmacological Sciences 31:212(2010) ；M.C.Haigis, et al., Annual Reviewof Pathology:Mechanisms of Disease 5:253 (2010)).自从最初发现 sirtuin 的去乙酸活性(S._1.1m...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.07 US 61/362,0781.一种识别Sirt5脱丙二酰或脱琥珀酰活性的调节剂的方法，包括: 提供候选化合物； 提供底物，所述底物包含与指示剂部分连接的丙二酰或琥珀酰赖氨酸； 在上述候选药物存在的情况下，将底物和Sirt5接触，使底物被Sirt5脱丙二酰和脱琥珀酰化； 用裂解剂接触所述脱丙二酰化或脱琥珀酰化的底物，所述裂解剂裂解所述赖氨酸和所述指示剂部分间的连接，以释放出所述指示剂部分，从而产生可检测的信号；以及 建立信号强度和Sirt5脱丙二酰或脱琥珀酰活性间的相关性；其中，存在所述候选化合物时Sirt5脱丙二酰或脱琥珀酰活性相对于不存在所述候选化合物情况时Sirt5脱丙二酰或脱琥珀酰活性的变化将所述候选化合物识别为Sirt5脱丙二酰或脱琥珀酰活性的调节剂。2.按权利要求1所述的方法，其中所述底物是肽，所述肽包含丙二酰或琥珀酰赖氨酸，所述丙二酰或琥珀酰赖氨酸通过肽键与所述指示剂部分共价连接。3.按权利要求2所述的方法，其中所述裂解剂是蛋白水解酶。4.按权利要求3所述的方法，其中所述蛋白水解酶是胰蛋白酶。5.按权利要求1所述的方法，其中所述指示剂部分有荧光性质。6.按权利要求5所述的方法，其中所述指示剂部分包含荧光团，所述荧光团在指示剂部分被裂解和释放时会改变其发射波长。7.按权利要求5所述的方法，其中所述指示剂部分包含荧光团，并且所述底物也用淬火基团标记，当所述指示剂部分从底物上裂解时，其会产生荧光信号。8.按权利要求5所述的方法，其中所述指示剂部分包含荧光团，所述荧光团是供体-受体荧光团对中的一个，并且所述荧光团对中的一个和赖氨酸残基的羧基末端相连，另一个直接或间接地和赖氨酸残基的氨基末端相连。9.按权利要求8所述的方法，其中所述指示剂荧光团从底物上裂解时会减弱基于荧光共振能量转移(FRET)的信号强度。10.按权利要求5所述的方法，其中所述指示剂部分是7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)。11.按权利要求10所述的方法，其中所述底物是ISGASE(SuK)-AMC(SEQ ID NO: 11)。12.按权利要求1所述的方法，其中所述候选化合物是小分子。13.按权利要求12所述的方法，其中所述候选化合物具有下式:14.按权利要求1所述的方法，进一步包括检测候选分子影响Sirtl、2、或3中任何一个的脱乙酰活性的能力。15.一种识别或测定Sirt5脱...
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