藻类细胞的制备方法以及化学物质的毒性评价用试剂盒技术

技术编号:8687424 阅读:183 留言:0更新日期:2013-05-09 07:11
本发明专利技术提供了一种藻类细胞的制备方法,用于利用延迟发光来评价化学物质的毒性,其中包括使对数生长期的藻类细胞冷冻的工序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及藻类细胞的制备方法以及化学物质的毒性评价用试剂盒
技术介绍
在使用藻类的评价化学物质的毒性的情况下,必须以用液体培养或用琼脂培养基等进行维持的细胞为基础实施原代培养(primary culture)以及继代培养(subculture)并制备藻类细胞,并将被检物质添加到制备好的藻类细胞中来进行试验。但是,维持藻类细胞或者每个试验中进行继代培养都很麻烦而不便。为了消除这种麻烦,可以利用冷冻了的藻类细胞(非专利文献I以及2等)。通过就在试验之前解冻已冷冻了的藻类细胞并利用解冻了的藻类细胞,从而可以不对藻类细胞实施继代培养而能够迅速地提供给试·验。现有技术文献专利文献专利文献1:国际公开第2005/062027号非专利文献非专利文献1:桑野和可,2002年《藻类的冷冻保存》;堀辉三 大野正夫 堀口健雄编“21世纪初的藻学的现状”;日本藻类学会,山形,108 111页非专利文献2:森史等,“国立环境研究所微生物系统保存设施之蓝藻和绿藻的冷冻保存”,Microbiol.Cult.Coll.,2002 年 6 月,45-55 页非专利文献3 J.G.Day等,“藻类的超低温保存”本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.09.08 JP 2010-2011421.一种藻类细胞的制备方法,其特征在于: 用于利用延迟发光来评价化学物质的毒性, 包括使对数生长期的藻类细胞冷冻的工序。2.按权利要求1所述的方法,其特征在于: 相对于所述冷冻的藻类细胞的总数,50%以上的藻类细胞具有4.5 y m以上的粒径。3.按权利要求1或者2所述的方法,其特征在于: 所述冷冻的藻类细 胞的粒径分布曲线显示双峰分布。4.按权利要求3所述的方法,其特征在于: 所述所冷冻的藻类细胞是以株号NIES-35被保存于日本国立环境研究所的绿藻(Pseudokirchneriella subcapitata), 相对于所述冷冻的藻类细胞的总数,55%以上的藻类细胞具有所述粒径分布曲线上的谷值粒径以上大小的粒径。5.按权利要求3或者4所述的方法,其特征在于: 所述冷冻的藻类细胞是以株号NIES-35被保存于日本国立环境研究所的绿藻(Pseudokirchneriella subcapitata), 相对于粒径小的峰处的细胞数与粒径大的峰处的细胞数之和,所述粒径分布曲线的粒径大的峰处的细胞数为50%以上。6.按权利要求3所述的方法,其特征在于: 所述冷冻的藻类细胞是以ATCC编号22662被保存于美国典型培养物保藏中心的绿藻(Pseudokirchneriella subcapitata), 相对于所述冷冻的藻类细胞总数,46%以上的藻类细胞具有所述粒径分布曲线上的谷值粒径以上大小的粒径。7.按权利要求3或者6所述的方法,其特征在于: 所述冷冻的藻类细胞是以ATCC编号22662被保存于美国典型培养物保藏中心的绿藻(Pseudokirchneriella subcapitata), 相对于粒径小的峰处的细胞数与粒径大的峰处的细胞数之和,所述粒径分布曲线的粒径大的峰处的细胞数为37%以上。8.按权利要求1 7中的任意一项所述的方法,其特征在于: 在使所述对数生长期的藻类细胞冷冻的工序之前,进一步包括: 在培养液中培养所述对数生长期的藻类细胞的工序, 离心分离含有所述藻类细胞的所述培养液的工序,以及 从所述藻类细胞中完全除去由所述离心分离所分离出的培养上清液的工序。9.按权利要求1 8中的任意一项所述的方法,其特征在于: 进一步包括在_80°C以下的温度下维持被冷冻的所述对数生长期...

【专利技术属性】
技术研发人员:数村公子竹内彩乃胜又政和
申请(专利权)人:浜松光子学株式会社
类型:
国别省市:

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