本发明专利技术涉及用于植物病原线虫生物防治的新型杀线虫产品，包含苏云金芽孢杆菌(Bacillus?thuringiensis)菌株N11、莫海威芽孢杆菌(Bacillus?mojavensis)菌株SR11和巴西固氮螺菌(Azospirillum?brasilense)菌株ALo1三种新分离物，其分别以保藏号CECT-7665、CECT-7666和CECT-5856保藏在西班牙典型培养物保藏中心(CECT)，其具有抗此类型病原体的高拮抗能力，以及具有通过不同机理刺激植物生长的性质。本发明专利技术还涉及所述产品的液体和固体制剂，其在室温下具有良好的稳定性，且可有效对植物致病线虫进行生物防治和刺激植物的生长。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术的目的是在苗床、温床、温室和广义种植业中具有强杀线虫活性并进一步具有生根和植物生长刺激和生物施肥能力的液体或固体生物学制备物。所述制备物的微生物组分的新分离物，苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株Nn、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株 SR11 和巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)菌株 ALo1,以及生产制剂的方法也是本专利技术的目的。
技术介绍
多年以前，人们已认识到开发和扩展用于综合生产和生态农业的方法在作为农业中滥用化学产品的替代物以降低后者有害作用方面的需要和重要性。使用微生物生物制备物进行病虫害的生物防治和经济作物的施肥使其成为此背景下最具发展前景的替代方法之一。此外，由于可由可再生资源产生，这些生物制备物对可持续农业模式具有重要作用(Altieri, 1997)。植物的寄生线虫破坏大多数植物的根或气生部份，若不对这些生物体进行一些防治，几乎不可能保持经济上可行的农业。许多寄生线虫在根部完成它们的生命周期，并以根部为食(通常与植物相关)。一些是内寄生虫，即它们生活在根、块茎、嫩枝、种子等的内部并以其为食。其它是外寄生虫，它们从植物壁取食。少数物种对宿主高度专一，例如大豆中的大豆胞囊线虫(Heterodera glycinis)和马铃薯中的马铃薯金线虫(Globoderarostochiensis),但大多数物种具有很广的宿主(Guerena, 2006)。从根外取食的内寄生虫是重要的经济害虫，包括瘤形成线虫(根结线虫属(Meloidogyne))、包囊形成线虫(胞囊线虫属(Heterodera))和枯斑形成线虫(短体线虫属(Pratylenchus))。然而，从根外取食的大多数经济重要的外寄生虫尤其包括拟毛刺线虫属(Paratrichodorus)、毛刺线虫属(Trichodorus)、剑线虫属(Xiphinema)、长针线虫属(Longidorus)、拟长针线虫属(Paralongidorus)、小环线虫属(Criconemella)、矮化线虫属(Tylenchorhynchus)、默林线虫属(Merlinius)、短体线虫属(Pratylenchus)、螺旋线虫属(Helicotylenchus)、盘旋线虫属(Rotylenchus)和盾线虫属(Scutellonema)的物种(Guerena, 2006)。植物致病线虫的防治通常以预防为主。为此，解决此问题的最好方法是将彼此互补的不同策略组合。基于间接使用农用化学品、物理和栽培方法、利用生物防治以及保持多种作物和栽培种的生物多样性，Bridge (1996)提出了四种处理植物致病线虫的策略，这增加了对线虫的抗性和耐性。此作者表明，尽管全部研究与此主旨相关，但是对于可持续农业系统中线虫的防治，实际中仍有许多问题尚待解决。植物致病线虫与极其不同的微生物共存在根围中，由于起到一些生物防治作用，它们中的许多是后者的拮抗物(Sikora 1992)。线虫的生物防治涵盖了生活在土壤中的极其不同的生物，包括病毒、立克次氏体、细菌、食线虫真菌、原生动物和缓步类，以及捕食者例如涡虫、线虫、线蚓科、螨虫、跳虫和其它昆虫(Kerry，1995)。除上述之外，真菌和细菌显示出最强的作为生物防治剂的潜力(BCA) (Spiegel等，2005)。根据Mahdy，M.，2002，真菌包括例如节丛抱属(Arthrobotrys)、拟青霉属(Paecilomyces)和轮枝抱属(Verticillium)(或轮枝菌(Lecanicillium))(尤其是 JP11246323 ；DE202005020816 ；CN1663394)；细菌特别包括例如 Pasteuria penetran (EP0217378 ;EP1967068)、芽抱杆菌属(Bacillus)的一些菌株(EP1922931 ；EP1967068 ；US6004774 ；US5651965 ；US5378460 ；US5350577 ；Sela 等，I8 ；Giannakou 等，2004 ；Guo 等，2OO8)和微变冢村氏菌(Tsukamurellapaurometabolum)，且它们可用作有效的生物杀虫剂(EP2154121 ;Mena，2002)。大量的细菌已被用作不同作物中的生物防治剂，且其对线虫的防治具有很强潜力。长久以来，基于苏云金芽孢杆菌(Bt)的杀虫剂的使用局限于防治由小范围鳞翅目昆虫产生的害虫。然而，近些年，有证据表明这些杀虫剂对更大范围的害虫十分有效。例如，苏云金芽孢杆菌以色列亚种(B.thuringiensis subsp.1sraelensis)、苏云金芽孢杆菌莫氏亚种(B.thuringiensis subsp.morrisoni)等，目前它们已分别被用于防治双翅目昆虫和鞘翅目昆虫。最近有报道称，尽管特异且已知其变种，但是Cry蛋白对更广谱的昆虫有毒。目前已知不同的Bt菌株能够产生大于550种不同毒素，其中一些具有杀线虫活性(Crickmore 等，2009)。广泛用于线虫生物防治的策略是使用定殖根围的生物体，特别是细菌。这些微生物可以在根围中生长，因此它们形成保护根免受病原体侵扰的屏障，因此它们作为生物防治生物体通常很有效(Weller, 1988)。根围菌具有定殖植物根的能力(Schroth和Hancock, 1982)，因此它们对植物生长也具有有益作用。Sikora (1992) 指出，甜菜、马铃薯和番茄根围细菌分离物中的7%至10%对形成包囊和瘤的线虫具有拮抗活性。Sikora和Hoffmann-Hergarten (1993)指出，植物促长根围菌(PGPR, plant growth-promoting rhizobacteria)对建立在寄生线虫和它们宿主植物之间的这种密切关系具有重要作用，其在寄生虫穿透入根的早期调节线虫的行为，这对作物产量及其重要。在1988年，Sikora发现枯草芽孢杆菌分离物能有效防治棉花和甜菜中的南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、花生中的花生根结线虫(M.arenaria)和棉花中的肾形肾状线虫(Rotylenchulus reniformis)。在1994年,Smith报道芽孢杆菌菌株23a降低番爺中爪睡根结线虫(M.javanica)的密度。突光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)菌株Pfl降低番爺根中南方根结线虫瘤和卵的数量(Santhi和Sivakumar, 1995)。腊状芽孢杆菌(Bacillus cereus)菌株S18也降低马铃薯中南方根结线虫的密度(Keuken, 1996)。此外，Giannakou等，2004和Terefe等，2009表明基于坚硬芽抱杆菌(Bacillus firmus)的产品Bionem在实验室、盆和田间条件下对根结线虫(Meloidogyne spp.)防治具有高活性。在引起植物疾病的生物体中，另一类重要的群体是植物致病真菌，其特别包括葡萄孢属(Botrytis)、腐霉属(Pythium)、丝核菌(Rhizoctonia)、交链孢属(Altern本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.03.31 ES P2010004251.云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)的菌株N11的纯培养物,其特征在于具有高杀线虫活性以及胶原酶活性，不产生β -外毒素且具有溶解磷酸盐的能力，保藏于西班牙典型培养物保藏中心(CECT)，保藏号为CECT-7665。2.海威芽孢杆菌(Bacillusmojavensis)的菌株SR11的纯培养物,其特征在于其溶解土壤磷酸盐和刺激植物生长的能力，能够产生吲哚-3-乙酸且能够在1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)作为单一氮源下生长，所述菌株保藏在CECT，保藏号为CECT-7666。3.西固氮螺菌(Azospirillumbrasilense)的菌株ALo1的纯培养物,其特征在于以70%-90%的转化百分比转化添加于培养基中的色氨酸产生吲哚-3-乙酸，产生铁载体和其它植物生长调节物质，以及大气固氮，具有在1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)作为单一氮源下生长的能力，所述菌株保藏在西班牙典型培养物保藏中心(CECT)，保藏号为CECT-5856。4.物杀线虫剂和植物生长刺激物的生物学制备物，其特征在于包含苏云金芽孢杆菌菌株N11 (CECT-7665)、莫海威芽孢杆菌菌株SR1 i (CECT-7666)和巴西固氮螺菌菌株ALo1 (CECT-5 856)。5.权利要求4的生物杀线虫剂和植物生长刺激物的生物学制备物，其特征在于所述微生物细胞通过一或多种浸没发酵方法获得，其中达到大于109CFU/mL的细胞浓度。6.权利要求4或5的生物杀线虫剂和植物生长刺激物的生物学制备物，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·I·费尔南德斯马丁内斯，M·J·维拉维尔德费尔南德斯，J·A·卡萨诺瓦罗加，J·A·尼古拉斯马丁内斯，J·马洛洛佩兹罗曼，C·巴莱斯塔赫曼，
申请(专利权)人：普罗贝尔特公司，
类型：
国别省市：
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