本发明专利技术公开一种处理高浓度有机废水的菌株、微生物菌剂及其应用。具体包括戈登氏菌(Gordonia sp.)Y-1(保藏登记号为CGMCC NO.10791)和微杆菌(Microbacterium sp.)Y-3(保藏登记号为CGMCC NO.10792)，以及由戈登氏菌Y-1和微杆菌Y-3按照配比为1:1～3混合进行放大发酵，获得浓度为1×109～1×1011CFU/mL菌剂。本发明专利技术的菌株Y-1、Y-3以及微生物菌剂能维持较强的有机物的降解能力，可用于高浓度有机废水的污染物消减和降解处理领域。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术设及，属于环境保 护
，也属于生物强化技术的范畴。
技术介绍
生物处理是目前废水处理最常用的方法之一，具有应用范围广、适应性强及运行 费用低等优点。炼油、化工等行业均产生大量高浓度有机废水，运类废水不仅含有高浓度难 降解有机污染物、成分复杂且含盐量较高，运类废水回收价值不高，若采用物理化学手段处 理成本很高，因此对作为首选的生化处理工艺的高效、稳定运行带来极大的难度。 传统生物处理工艺中的微生物对高浓度有机废水中的复杂的难降解污染物的降 解和耐受能力不高，处理效果不理想，而且系统受冲击后恢复过程较长。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于，提供能够处理高浓度有机废水的高效菌株、由 菌株制备的高效微生物菌剂，使得微生物菌剂具有活性强、抗冲击能力高和处理彻底的优 点，能有效处理高浓度有机废水。 为解决上述技术问题，本专利技术采用W下技术方案予W实现： 本专利技术对炼油和化工行业的污水处理设施中的混合污泥样品，利用混合高浓度有 机废水进行驯化培养、筛选和分离后，获得两种高效菌株。-种高效菌株是菌株Y-1，菌株Y-1经过分子生物学鉴定为戈登氏菌属（Gordonia sp.)，该菌株已于2015-5-11日保藏在中国普通微生物菌种保藏中屯、，地址为北京市朝阳 区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏登记号为CGMCCNO. 10791。该戈登 氏菌Y-1菌落颜色为粉红色；圆形边缘整齐光滑，菌株个体成杆状状，无芽抱，能运动；革兰 氏染色为阳性，氧化酶为阴性，能利用多种碳源。 另一种高效菌株是Y-3菌株经过分子生物学鉴定为微杆菌属（Microbacterium sp.)，该菌株已于2015-5-11日保藏在中国普通微生物菌种保藏中屯、，地址为北京市朝阳 区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏登记号为CGMCCNO. 10792。该微杆 菌Y-3菌落颜色为乳白色，圆形细小边缘整齐光滑，菌株个体呈微杆状，无芽抱，能运动；革 兰氏染色为阳性，接触酶阳性，能利用多种碳源。 本专利技术还提供了一种微生物菌剂，该微生物菌剂由戈登氏菌（GordoniaSP.) Υ-1(保藏登记号为CGMCCNO. 10791)和微杆菌（Microbacteriumsp.)Y-3(保藏登记号 为CGMCCNO. 10792)按照体积配比为1:1~3混合进行放大发酵获得的浓度为1X109~ lXl〇iiCFU/mL菌剂。 本专利技术还提供了上述微生物菌剂在高浓度有机废水处理中的应用，尤其在化工、 炼油或炼化废水中的应用。 进一步，本专利技术还提供了上述微生物菌剂的一种具体制备方法，包括W下内容： 1)将所述戈登氏菌（Gordoniasp. )Υ-1 和微杆菌（Microbacteriumsp. )Υ-3 分别 接种于BPD液体培养基、30~35°C、150~24化pm好氧条件下震荡培养1~3d至对数生长 期，将获得的戈登氏菌（Gordoniasp.)Y-l和微杆菌（Microbacteriumsp.)Y-3种子液混 合，配比为1:1~3; 2)按体积百分比1% -10%的接种量将戈登氏菌Y-1和微杆菌Y-3混合种子液 移至含有放大发酵培养基的发酵罐进行发酵培养，培养条件为：罐溫为30~37Γ，罐压为 0. 03~0. 06MPa，通气量为0.8~1. 5V/V/min，揽拌速度100~300巧m、发酵时间12~2地， 使发酵液中浓度为1X1〇9~1X10 "CFU/mL;获得的菌体加入常用保护剂后制备成液态菌 剂，或者利用本领域的现有常规技术制成干粉状菌剂； 其中所述放大发酵培养基的配方为：葡萄糖15~30g/l，KH2PO45~10. 5g/l， (畑4)2HPO43~6g/L，巧樣酸0. 9~1. 84g/L，酵母膏9. 3~19. 5g/L，微量元素溶液5血，消 泡剂0. 1%，蒸馈水1000ml，调节抑至6. 8-7. 2。 本专利技术提供的高效菌株（戈登氏菌Y-1和微杆菌Y-3)能够处理高浓度有机废水 的有机污染物。特别是由上述两种菌株复配制得的微生物菌剂，其耐受的有机负荷高、抗冲 击能力强，可用于生化系统快速启动、增效处理和冲击后快速恢复，并可根据现场使用需要 提供高活性液态菌剂或长期保存、便于运输的干粉状菌剂。该菌剂的制备方法具备操作简 单、使用方便、成本低廉的优点，适合于规模化生产和实际工程应用，可广泛用于对炼油和 化工等行业的高浓度有机废水的生物处理。【附图说明】 图1本专利技术实施例1中微生物菌剂连续生物强化过程中反应器的运行情况；图2本专利技术实施例2戈登氏菌Y-1单一菌株制剂快速启动情况。【具体实施方式】 下面结合实施例和附图对本专利技术的技术方案进行进一步详细说明。W下实施例仅 用于说明本专利技术，并不限制本专利技术的范围。 实施例1微生物菌剂的制备方法和在苯酪丙酬废水中的应用 本专利技术的菌株Y-1和Y-3是从炼油、化工、医药和染料等行业的混合污泥样品通过 混合高浓度有机废水驯化培养、筛选和分离而获得。 对菌株Y-1和菌株Y-3分别进行16SrDNA鉴定，具体步骤如下： 使用正向引物Fl:5' -AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'，反向引R1:5' -AAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3' 进行DNA扩增（PCR)。PCR反应条件：95°C预 变性5111111，95°(：变性453,55°(：退火453,72°(：延伸9〇3,30个循环，72°(：最终延伸1〇111111， 4°C保存。PCR产物用0.8%的琼脂糖凝胶分离，纯化与回收后测序。所测序列使用NCBI Blast比对分析，确定菌株Y-1从属于戈登氏菌（Gordoniasp.)，菌株Y-3从属于微杆菌 (Microbacteriumsp.)。 戈登氏菌（Gordoniasp.)Y-1的16SrDNA序列见序列表中第1个序列，该菌株已 于2015-5-11日保藏在中国普通微生物菌种保藏中屯、，地址为北京市朝阳区北辰西路1号 院3号，中国科学院微生物研究所，保藏登记号为CGMCCNO. 10791。微杆菌（Microbacteriumsp. )Υ-3的16SrDNA序列见序列表中第2个序列，该菌 株已于2015-5-11日保藏在中国普通微生物菌种保藏中屯、，地址为北京市朝阳区北辰西路 1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏登记号为CGMCCNO. 10792。 本专利技术的戈登氏菌Y-1和微杆菌Y-3菌株的培养方法，包括如下步骤： 1、种子液的制备[002引1)配制BPD固体培养基，培养基组成为：牛肉膏：5g，蛋白腺：10g，化C1 :5g，蒸馈 水：1000ml，琼脂粉：15g，pH:7.0-7.2; 2)将上述培养基高溫蒸气（12rC，30min)灭菌后，在超净台中倒于灭菌的平板 上，培养基凝固后待用； 3)分别将菌Y-1和菌Y-3通过划线的方法接种于上述平板上，将平板倒置于30°C 培养箱培养3天待菌落长出；[003。 4)用接种环取平板上的生长良好的Y-1和Y-3菌落刮下，分别接种于BPD液体培 养基中，Ξ角瓶装液量为50 %，在溫度30°C、150巧m、培养时间3d至对数生长期，获得Y-1 和Y-3的种子液； 2、本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种戈登氏菌(Gordonia sp.)Y‑1，其特征在于，所述的菌株保存登记号CGMCC NO.10791。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：顾锡慧，官赟赟，雷太平，李亮，张艳芳，滕厚开，
申请(专利权)人：中国海洋石油总公司，中海油天津化工研究设计院，中海油能源发展股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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