BACILLUS VELEZENSIS AH2菌株的纯培养物以及用于植物致病真菌的生物防治的产品制造技术

技术编号:4526095 阅读:247 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及Bacillus?velezensis?AH2菌株的纯培养物以及用于生物防治植物致病真菌的产品。本发明专利技术涉及用于生物防治植物致病真菌的新型杀真菌剂产品,其含有一种新的Bacillus?velezensis?AH2菌株分离物,该分离物保藏于西班牙普通微生物保藏中心(CECT),保藏号为CECT-7221,其对这些类型的病原体具有高拮抗剂活性,同时其可以利用不同的机制刺激植物生长。本发明专利技术也涉及一种液体配制品,其在环境温度下具有良好稳定性并可有效治疗由植物致病真菌所引起的疾病以及刺激植物生长。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】BACILLUS VELEZENSISAH2菌株的纯培养物以及用于植物致 病真菌的生物防治的产品专利技术目的本专利技术的目的是用于植物致病真菌生物防治的产品,其由新的 Bacillusvelezensis (RuizGarcia et al.,2005) AH2菌株的新分离物的活细胞所形成,具 有高抗真菌活性,特别是抗不同的植物致病真菌,同时具有通过不同机制刺激植物生长的 良好能力。该产品通过经发酵肉汤得以配制,发酵肉汤通过振荡深层培养获得,其被直接用 于该配制品中。该配制品在环境温度下可维持至少6个月的高活性。本专利技术的另一目的是 提供用于制备该配制品的Bacillus velezensis AH2菌株。
技术介绍
为了减少农业中大范围使用的化学产品的不利影响,作为替代,发展并扩大综合生产和有机农业生产过程的需求和重要性早已为人所知。在这样的背景之下,利用来自微 生物的生物制品对害虫和疾病进行生物防治以及对具有商业价值的作物进行施肥是最有 前途的替代之一。更进一步地,由于可能通过可再生资源进行生产,这些生物制品在可持续 农业模式中扮演了重要角色(Altieri,1997)。该路线的主要优点在于由于基于天然机制,其为环境友好型、无污染的生态学替 代,其大大减少病原体获得抗性的风险。同时,由于其作用模式是选择性的,其通常很少可 能伤害其他有益生物体,并且在许多情况下,它们有益于生态系统并刺激植物生长,由此使 得农业生产更可持续发展,而同时对人类健康的影响最小或是没有影响。事实上,所有害虫 和疾病在某种程度上都会受到敌对生物体的影响。在许多情况下,这些生物体代表了自然 界中调节病原生物体群体的最重要因素。在引起植物疾病的生物体中最重要的一类是植物致病真菌,包括例如葡萄孢属 (Botrytis)、腐霉属(Pythium)、丝核菌属(Rhizoctonia)、链格孢属(Alternaria)、镰孢 属(Fusarium)、疫霉属(Phytophthora)、串珠根霉属(Thielaviopsis)以及葡萄座腔菌属 (Botryosphaeria),它们能够在土壤中生存多年。在寻找具有商业价值的生物防治物质时,必须考虑一系列因素,对它们同时进行 研究才可以可获得成功的结果。其中例如可以提及的是可单独使用也可在混合接种物中使 用的生物体、特定的生物活性、对抗病原体的作用机制、使用的生产系统以及配方的类型及 其稳定性(Warrior,2000)。已经有几种机制描述并解释了这些病原体生物防治的现象,例如寄生、交叉保护、 抗生、竞争和抗性诱导(Shoda,2000,Walsh et al. ,2001) 由于植物和其他生物体之间在本文所建立的联系,研究的最多的生态位之一是 根际(Warrior,2000)。从1980年代就已经开始对根际微生物作为化学杀虫剂的可能替 代物来控制大量疾病进行了研究。由于它们在土壤中的大量分布、移植到植物根系中的 能力和产生大量有益化合物及大量病原体拮抗剂的能力,这些生物体非常适用于害虫和 疾病的生物防治(Angaiah 等,1998 ;Hill 等,1994 ;Maurhofer 等,1991 ;Rodriguez,和Pfender. 1997 ;Ross 等,2000 和 Thomashow 等,1997)。在根际的微生物群体中,已被作为生物防治由所述微生物导致的害虫和微生物所 致疾病的物质进行广泛研究的是由真菌所形成的群。它已经被成功用于病原体真菌的防 治,所述真菌包括葡萄孢属、镰孢属、腐霉属、疫霉属、丝核菌属、核盘菌属(Sclerotinia)、 青霉属(Penicillium)和大壳球孢属(Macrophomina)等(Whipps and Lumsden,2001, McQuilken等,2001,Jones and Whipps,2002等)。由于它的各种代谢作用,该微生物群能 够产生大量各种可用于生物防治的物质。基于这些原因,基于真菌的菌株和产物的数量不 断增大且更加多样化(Cook 等,1996,Whipps, 1997, Fravel 等,1998,EPA USA 2006.美国 专利6,306,386和美国专利6,890,530等)。疾病的生物防治机制是复杂的,并且已知其 可能是几种机制的加合或协同的结果。在这当中竞争是针对营养和空间、产生防止孢子萌 发(抑真菌作用)或者引起细胞死亡(抗生作用)和通过酸化土壤、防止病原体的增殖来 对根际进行修饰的能力。生物防治也可能是病原体和生物防治物质(寄生现象)之间直接 相互作用的结果,例如通过如几丁质酶、葡聚糖酶之类的水解酶,或者后者与毒性代谢物的 联合作用(Benitez等,2004)。 促进植物生长的根际细菌(rizobacterias) (PGPR)在害虫和疾病的生物防治中 的用途也已经被广泛研究。该类物质的主要特性除了它们的保护作用外还具有较强的移 植到植物根系中的能力和较强的刺激植物生长的能力,这使得作物的健康得到了全面地 改善,并由此植物对病原体的攻击也具有更强的抗性。这类物质已经用于由如丝核菌属、 镰孢属、腐霉属、串珠根霉属、青霉属、链格孢属及葡萄孢属的植物致病真菌所引起的疾病 (Emmert 和 Handelsman,1999,Iigon 等,2000, Cavaglieri 等,2004 以及 Roberts 等,2005, 美国专利7,118,739等)。由于假单胞菌属(Pseudomonas)是根际中最活跃且占优势的物质之一,在过去几 年中其已经成为许多研究的目标(Geel和Schippers,1983,deFreitas和Germida 1991, de la Cruz等,1992,Ligon等,2000,美国专利7,087,424)。该属成员产生与植物疾病的 减少和抑制紧密相关的不同抗生素。在该现象中其重要作用的另一因素是铁载体的产生, 其通过铁供应途径进一步促进植物生长。该能力在假单胞菌属成员中高度扩张。然而,该 菌属无法在其生长期内产生抗性结构,这在一定程度上限制了用该种菌属菌株获得的生物 制品的稳定性和有效性。由于芽孢杆菌属(Bacillus)在这方面具有高度潜力,对它也已经进行了广泛研 究。作为主要特点,它实际遍布于所有类型的土壤中,这赋予其高耐热性、在液体介质中快 速生长以及形成使其长时间生存的抗性孢子。所有这些赋予该属菌株具有作为生物防治 物质的高潜力。美国环境保护局(EPA)已经登记了超过10个该属不同种的菌株作为生物 杀虫剂并且特别是作为生物杀真菌剂(EPA 2006)。该属菌株对植物致病真菌生物防治相 关的主要机制也包括产生抗生素、铁载体、表面活性剂以及如几丁质酶的水解酶(Utkhede, 1984,Acea 等,1988,Stanghellini 和 Miller 1996,Shoda2000, Banat 等,2000,zhang 等, 2001,Ruiz-Garcia 等,2005,美国专利 7,087,424 及 EP1647188)。也已经对其它细菌菌属作为生物防治物质进行了广泛研究,所述细菌包括肠杆菌 属(Enterobacter)、产碱菌属(Alcaligenes)、寡本文档来自技高网...

【技术保护点】
BacillusvelezensisAH2菌株的纯培养物及其突变体,其特征在于由于其能产生拮抗剂物质的能力,其具有高抗真菌活性,特别是针对植物致病真菌的抗真菌活性;以及其具有良好的刺激植物生长的能力;该菌株能够溶解磷酸盐,产生吲哚-3-乙酸和铁载体,以及能够在作为唯一氮源的1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)中生长,所述菌株已保藏于西班牙普通微生物保藏中心(CECT),保藏号为CECT-7221。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:AI费尔南德斯马丁内斯MJ比利亚韦德费尔南德斯JA卡萨诺瓦罗加J马洛洛佩斯罗曼JA尼古拉斯马丁内斯I布兰卡比科
申请(专利权)人:普罗贝尔特公司
类型:发明
国别省市:ES[西班牙]

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