【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学发光酶联免疫检测
,特别涉及ー种黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒及使用方法。
技术介绍
黄曲霉毒素(Aflatoxins)是真菌产生的毒性代谢产物,广泛存在于各种粮食、食品和饲料中,对人类和动物表现出很强的毒性。黄曲霉毒素1993年被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为I类致癌物。黄曲霉毒素^(Aflatoxin M1,縮写AFM1)属于黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的ー种,该类毒素是由常见的黄曲霉菌(Asperillus Flavus)和寄生曲霉菌(Asperillus Parasiticus)产生的代谢产物,在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。AFM1物理化学性质相当稳定,不被巴氏消毒破坏。黄曲霉毒素M1的危害主要表现在致癌性和致突变性,对人及动物肝脏组织有破坏作用,可导致肝癌甚至死亡。动物的AFM1中毒主要表现为食欲不振、体重下降、生长迟缓、繁殖能力降低、产蛋及产奶量減少等。中毒病变主要在肝脏,表现为肝细胞变性、坏死、出血、胆管增生等。急性中毒后期,动物出现体温升高、血性腹泻、心脏出现出血瘀点和瘀斑、胆 ...
【技术保护点】
一种黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述检测试剂盒包括包被有黄曲霉毒素M1抗原的化学发光酶标板,黄曲霉毒素M1标准品,黄曲霉毒素M1抗体,酶标抗抗体,化学发光液和洗涤液。
【技术特征摘要】
1.种黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述检测试剂盒包括包被有黄曲霉毒素M1抗原的化学发光酶标板,黄曲霉毒素M1标准品,黄曲霉毒素M1抗体,酶标抗抗体,化学发光液和洗漆液。2.据权利要求1所述的黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述的化学发光酶标板为96孔可拆不透明白色发光板;所述的黄曲霉毒素M1抗原为黄曲霉毒素M1与牛血清白蛋白的偶联物;所述的黄曲霉毒素M1抗原的包被浓度为0.625mg/し3.据权利要求1所述的黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述的黄曲霉毒素M1标准品的浓度为lmg/mL,使用时用0.01mol/L PBST将标准品稀释成浓度为0.0、0.01、0.03、0.1、0.3、1、3 ii g/L的一系列黄曲霉毒素M1标准品溶液。4.据权利要求1所述的黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于: 所述的黄曲霉毒素M1抗体为黄曲霉毒素M1单克隆抗体或兔多克隆抗体; 所述的酶标抗抗体为辣根过氧化酶标记的羊抗鼠IgG或羊抗兔IgG。5.据权利要求4所述的黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于: 所述的黄曲霉毒素M1抗体 为黄曲霉毒素M1单克隆抗体,其原浓度为2mg/mL,使用时用0.01mol/L PBST 稀释 6000 倍; 所述的酶标抗抗体为辣根过氧化酶标记的羊抗鼠IgG,其原浓度为10mg/mL,使用时用0.01mol/L PBST 稀释 6000 倍。6.据权利要求1所述的黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述的化学发光液由A液和B液组成,A液为将20mg对碘苯酹、8mg鲁米诺、1.21g Tris溶于IOOmL去离子水,用盐酸调pH至8.4得到;B液为将体积分数0.40%H202、1.21g Tris溶于IOOmL去离子水,用盐酸调pH至7.0得到;使用时将A液和B液按体积比1:1的比例混合。7.据权利要求1所述的黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述的洗涤液为20倍浓缩洗涤液,为含有体积浓度0.5%Tween20的pH7.40.4mol/L的磷酸盐缓冲液,使用时用去离子水稀释成I倍洗涤液。8.利要求1 7任一项所述的黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒的使用方法,其特征在于包含如下步骤: (1)将试剂盒置于15 35°C平衡30min以上; (2)取出化学发光酶标板,往标准孔中加入不同浓度的黄曲霉毒素M1标准品溶液,样品孔中加入待测样品,然后每孔加入黄曲霉毒素M1抗体,盖上盖板膜振摇混匀,孵育; (3)吸除板孔中的反应液,加入洗涤液洗涤,将酶标板拍干; (4)往各孔中加入酶标抗抗体,轻拍混匀...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨金易,孙远明,王弘,雷红涛,沈玉栋,徐振林,李萍,
申请(专利权)人:华南农业大学,
类型:发明
国别省市:
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