利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法，包括：（1）使用Trizol试剂将脑组织进行总RNA的分离；（2）对步骤（1）得到的总RNA进行反转录，得到的cDNA；（3）将上述cDNA与SYBR荧光染料混合并进行扩增；（4）IBSP的表达通过抗GAPDH进行标准化，使用方程进行比较阈值循环法；（5）构建组织芯片，然后进行免疫组化染色，对免疫组化结果进行统计分析，检测BSP在脑胶质瘤中的表达。本发明专利技术的方法使得检测BSP的表达的灵敏性大大提高，能保证在极少的标本中获得足够的信息；检测BSP的表达具有重要的医学价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于检测BSP在脑胶质瘤中的表达领域，特别涉及一种利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法。
技术介绍
胶质瘤是中枢神经系统(CNS)中最多见的肿瘤，其中70%是恶性胶质瘤，是CNS起源的肿瘤中最常见和最致命的肿瘤，具有高复发率和死亡率。胶质瘤中最有生物学侵袭性的亚型是多形性胶质母细胞瘤(GBM，WHO IV级的星形胶质细胞瘤)，其预后令人沮丧。目前的标准治疗方案包括最大程度的切除肿瘤以及随后使用DNA烷化剂、替莫唑胺进行化疗和放疗。但尽管经过上述的有效治疗，GBM和间变型星形细胞瘤(WHO III级)的预后生存期仍很短，中位生存期分别只有约14-16个月和2-5年。目前已做了大量的 努力来鉴定GBM中的基因学变化或其分子靶标，这些基因变化或分子靶标有助于区分GBM患者的不同亚组，每个亚组有不同的预后和对特异性治疗不同的临床反应。替莫唑胺临床反应最主要的决定因素之一是MGMT的甲基化水平。MGMT启动子甲基化可见于40%-60%的病人，并与对替莫唑胺治疗的良好反应相关。最近，在多达75%的2级和3级弥漫性星形细胞瘤中发现了基因编码的异柠檬酸脱氢酶(IDHl)的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法，包括：（1）使用Trizol试剂将脑组织进行总RNA的分离；（2）对步骤（1）得到的总RNA进行反转录，得到cDNA；（3）将上述cDNA与SYBR荧光染料混合并进行扩增；（4）IBSP的表达通过抗GAPDH进行标准化，使用以下方程进行比较阈值循环法：表达折叠差异=2?(Δ目标基因的ct值–Δ参照ct值)；（5）构建组织芯片，然后进行免疫组化染色，对免疫组化结果进行统计分析，检测BSP在脑胶质瘤中的表达。

【技术特征摘要】
1.种利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法，包括: (1)使用Trizol试剂将脑组织进行总RNA的分离； (2)对步骤(1)得到的总RNA进行反转录，得到cDNA； (3)将上述cDNA与SYBR荧光染料混合并进行扩增； (4)IBSP的表达通过抗GAPDH进行标准化，使用以下方程进行比较阈值循环法:表达折 =2 目标基因的ct值-Δ参照ct值).(5)构建组织芯片，然后进行免疫组化染色，对免疫组化结果进行统计分析，检测BSP在脑胶质瘤中的表达。2.据权利要求1所述的一种利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法，其特征在于:步骤(1)中所述 的脑组织为胶质瘤或正常脑组织。3.据权利要求1所述的一种利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法，其特征在于:步骤(2)中所述的总RNA的质量为2ug，得到cDNA的质量为20ng。4.据权利要求1所述的一种利...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈菊祥，徐涛，秦荣，卢亦成，严勇，周劲旭，王洪祥，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：