用于中国南瓜‘广蜜1号’杂交种子纯度鉴定的引物及方法技术

本发明专利技术公开了用于鉴定中国南瓜‘广蜜1号’杂交种子纯度的引物及方法。所用引物为：VRISSRPMK8-F：5’-TAATTAAGGCGTGAAATTGG-3’和VRISSRPMK8-R:5’-GAAAAGAAACATAAACAGGGC-3’。鉴定方法如下：1）提取南瓜幼苗基因组DNA；2）以南瓜基因组DNA为模板，使用SSR引物VRISSRPMK8进行PCR扩增；3）对扩增的产物进行凝胶电泳；4）对电泳结果进行分析，只有同时具有亲本特异性条带的单株才为真正的杂交种，缺少其中的任意一条带记为假杂种。本发明专利技术的引物和方法可对‘广蜜1号’杂交种子和其母本、父本种子进行有效区分，快速、准确检测出杂交种子纯度。本方法具有快速、准确、低成本、操作简单等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子检测领域，具体涉及一种用于中国南瓜‘广蜜I号’杂交种子纯度鉴定的引物及方法。
技术介绍
种子纯度是种子质量检验的最主要的质量指标之一。植物新品种特异性(Distinctness)、一致性(Uniformity)和稳定性(Stability)的测试(简称 DUS 测试)是农业部植物新品种保护办公室对申请品种授予新品种权进行实质审查最重要的工作内容。“广蜜I号”是一个杂交一代南瓜品种。制种的时候，母本和父本分别种在不同的地块，雌花开花前，把母本上所有的雄花花蕾摘掉。开花期用父本的花粉授到母本的雌花柱头上，从而产生杂交种子。如果母本雄花摘得不彻底，母本的花粉就有可能落到母本的雌花柱头上产生自交种子，出现假杂种，这是制种过程导致种子不纯的最主要原因。因此杂交种子在销售前必须要做纯度鉴定，符合国家对杂交种子的纯度要求才能出售给客户。一直以来，人们把制种的种子种到地里，根据植株的形态特征对南瓜品种种子纯度进行识别，但是由于形态学鉴定一般需要30-60天时间，周期长，受环境影响大，准确性较低。20世纪后期，分子生物学技术得到迅猛发展，使从DNA分子的角度准确可靠地对品种纯度进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于中国南瓜‘广蜜1号’杂交种子纯度鉴定的SSR引物VRISSRPMK8，序列如下所示：VRISSRPMK8?F：5’?TAATTAAGGCGTGAAATTGG?3’（SEQ?ID?NO:1）,?VRISSRPMK8?R:?5’?GAAAAGAAACATAAACAGGGC?3’（SEQ?ID?NO:2）。

【技术特征摘要】
1.一种用于中国南瓜‘广蜜I号’杂交种子纯度鉴定的SSR引物VRISSRPMK8，序列如下所示:VRISSRPMK8-F:5’ -TAATTAAGGCGTGAAATTGG-3’ (SEQ ID N0:1),VRISSRPMK8-R: 5’ -GAAAAGAAACATAAACAGGGC-3’ (SEQ ID NO:2)。2.一种用于中国南瓜‘广蜜I号’杂交种子纯度鉴定的方法，包括如下步骤: 1)提取南瓜幼苗基因组DNA； 2)以南瓜基因组DNA为模板，使用权利要求1的SSR引物VRISSRPMK8进行PCR扩增； 3)对扩增的产物进行凝胶电泳； 4)对电泳结果进行分析，只有同时具有亲本特异性条带的单株才为真正的杂交种，缺少其中的任意一条带记为假杂种，计算种子纯度，其中，SSR引物VRISSRPMK...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄河勋，吴廷全，王瑞，黄智文，林毓娥，梁肇均，
申请(专利权)人：广东省农业科学院蔬菜研究所，广东科农蔬菜种业有限公司，
类型：发明
国别省市：