本发明专利技术涉及一种以淀粉废水及麦芽根制备培养基来发酵普鲁兰多糖的方法。所述以淀粉废水及麦芽根制备培养基来发酵普鲁兰多糖的方法，培养基的制备制备包括以下步骤：培养基的制备、菌株活化、发酵培养、乙醇处理干燥即得到白色或浅黄色多糖粗品。其中所述培养基制备方法包括：(1)麦芽根粉碎，过筛，制备麦芽根汁；(2)将麦芽根汁与工业淀粉废水混合，浸渍；控温进行蛋白质（Pr）休止；控温进行糖化；升温，过滤，洗糟，调pH，添加无机盐，灭菌。本发明专利技术利用工业废弃物—淀粉工业废水进行普鲁兰多糖的制备，不仅能变废为宝，大大降低普鲁兰多糖的生产成本，还会减少淀粉工业废水对环境所造成的污染，起到了资源和环境双赢的效果。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种发酵普鲁兰多糖的方法，具体涉及一种以淀粉废水及麦芽根制备培养基来发酵普鲁兰多糖的方法。
技术介绍
普鲁兰多糖是一类具有重要应用价值的微生物胞外多糖，成膜性、成纤维、阻气性、生物安全且无毒的特点，使其在食品、医药、化工和石油领域得到广泛应用。淀粉废水是加工淀粉过程中不可避免的一种副产物，营养丰富；麦芽根为麦芽制造过程中的副产物，含有丰富的淀粉酶、麦芽酶、果酸酶及蛋白酶，富含B族维生素，并含有大量未知生长因子。目前文献中报道的普鲁兰多糖发酵培养基的碳源较多的是使用耐高温淀粉酶酶解后的淀粉或者蔗糖，价格昂贵，工艺复杂，增加了普鲁兰多糖发酵成本。此外目前缺少色素产生少和胞外多糖合成能力高的菌株，这些都促使普鲁兰多糖整体成本的上升。
技术实现思路
为了解决上述由于技术不足产生的问题，进一步降低普鲁兰多糖的成本，本专利技术的目的在于提供一种以淀粉废水及麦芽根制备培养基来发酵普鲁兰多糖的方法，原料来源广泛，利用麦芽根所含有的丰富酶系和生长因子来酶解淀粉工业废水，培养基简单，既提高了多糖产量，降低了多糖生产成本，也解决了由淀粉废水及麦芽根带来的环境问题。此外，通过该方法培养的菌株色素产生能力明显下降，减少了脱色这个步骤，大大降低了普鲁兰多糖的成本。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是:一种以淀粉废水及麦芽根制备培养基来发酵普鲁兰多糖的方法，包括以下步骤:所述培养基制备方法如下:(I)将麦芽根粉碎，过20目筛，制备麦芽根汁，质量浓度20%_50% ；(2)将麦芽根汁与工业淀粉废水按照质量比20 40:100添加混合，在38 40°C浸溃25-40min ;控制温度为45°C进行蛋白质(Pr)休止，保持20_40min，控制温度为55°C进行第二次蛋白质休止保持30分钟，控制温度在63°C进行第一段糖化，保持时间40min ;第二段糖化温度为68°C，至碘液反应为无色；升温到76 78°C，过滤，洗糟，调pH到5.6-7.4，添加2 3g/L的NaCU0.2 0.4g/L的MgSO4,3 5g/L的K2HPO4,灭菌成为培养基。所述发酵培养方法如下:(I)将出芽短梗霉(Aureobsidium pullulans)CGMCCN0.7055 菌株活化，即将其从蔗糖琼脂培养基斜面上转接到500ml的挡板瓶中，挡板瓶装液量为80ml，在恒温28°C转速180r/min，培养 30h。(2)以4%体积比将(I)所得种子菌液转接到500ml培养基的挡板瓶中，挡板瓶装液量为100ml，在恒温28°C转速200r/min，培养84 104h后，取发酵液离心去除菌丝体。(3)在上层清液中加入三倍体积的无水乙醇，搅拌，4°C放置过夜，使普鲁兰多糖充分沉淀，沉淀液以5000r/min离心30min得普鲁兰多糖沉淀,沉淀用无水乙醇洗漆2次,干燥得到白色或浅黄色多糖粗品。本专利技术的优点如下:本专利技术利用工业废弃物-淀粉工业废水进行普鲁兰多糖的制备，不仅能变废为宝，大大降低普鲁兰多糖的生产成本，还会减少淀粉工业废水对环境所造成的污染，起到了资源和环境双赢的效果。本专利技术利用了麦芽制造厂的副产物一麦芽根中的丰富酶系代替水解酶进行废水中的淀粉水解，还利用了麦芽根中丰富的生长因子促进出芽短梗霉菌的生长代谢，提高了普鲁兰多糖的产量。经本专利技术培养的菌株色素产生明显降低，从而减少产品脱色步骤，大大降低了成本。具体实施实例下面结合具体实例对本专利技术作进一步的说明。实施例1一种以淀粉废水及麦芽根制备材料来发酵普鲁兰多糖的方法，包括以下步骤:一、将麦芽根粉碎，过20目筛，制备麦芽根汁浓度50%。二、将麦芽根汁 与工业淀粉废水按照质量比20:100的添加混合一浸溃(38 40°C，30min) — Pr 休止 I (45°C，30min) — Pr 休止 II (55°C，30min)—第一段糖化(63°C，40min)—第二段糖化(68°C，至碘液反应为无色一升温(76 78°C )—过滤一洗槽一调节pH至5.8，添加2g/L的NaCl、0.2g/L的MgS04、3g/L的K2HPO4经灭菌成为培养基。三、将CGMCCN0.7055活化，即将其从蔗糖琼脂培养基斜面上转接到500ml的挡板瓶中，挡板瓶装液量为80ml，在恒温28°C转速180r/min，培养30h。三、以4%体积比将种子菌液转接到500ml的挡板瓶中，挡板瓶装液量为100ml，在恒温28°C转速200r/min，培养84h后，取发酵液离心去除菌丝体。四、在上层清液中加入三倍体积的无水乙醇，搅拌，4°C放置过夜，使普鲁兰多糖充分沉淀，沉淀液以5000r/min离心30min得普鲁兰多糖沉淀,沉淀用无水乙醇洗漆2次,干燥得到白色或浅黄色多糖粗品，产量98g/L。实施例2一、将麦芽根粉碎，过20目筛，制备麦芽根汁浓度30%。二、将麦芽根汁与工业淀粉废水按照质量比30:100添加混合一浸溃(38 40°C，30min) — Pr 休止 I (45 °C, 30min) — Pr 休止 II (55 °C, 30min)—第一段糖化(63 °C,40min)—第二段糖化(68°C，至碘液反应为无色)一升温(76 78°C )—过滤一洗槽一调节pH至6.6，添加3g/L的NaCl、0.3g/L的MgS04、4g/L的K2HPO4经灭菌成为培养基。三、将CGMCCN0.7055活化，即将其从蔗糖琼脂培养基斜面上转接到500ml装有上述培养基的挡板瓶中，挡板瓶装液量为80ml，在恒温28°C转速180r/min，培养30h。三、以4%体积比将种子菌液转接到500ml装有上述培养基的挡板瓶中，挡板瓶装液量为100ml，在恒温28°C转速200r/min，培养96h后，取发酵液离心去除菌丝体。四、在上层清液中加入三倍体积的无水乙醇，搅拌，4°C放置过夜，使普鲁兰多糖充分沉淀，沉淀液以5000r/min离心30min得普鲁兰多糖沉淀,沉淀用无水乙醇洗漆2次,干燥得到白色或浅黄色多糖粗品，产量105g/L。实施例3一、将麦芽根粉碎，过20目筛，制备麦芽根汁浓度20%。二、将麦芽根汁与工业淀粉废水按照质量比40:100添加混合一浸溃(38 40°C，30min) — Pr 休止 I (45 °C, 30min) — Pr 休止 II (55 °C, 30min)—第一段糖化(63 °C,40min)—第二段糖化(68°C，至碘液反应为无色)一升温(76 78°C )—过滤一洗槽一调节pH至7.1，添加2g/L的NaCl、0.4g/L的MgS04、5g/L的K2HPO4经灭菌成为培养液。三、将CGMCCN0.7055活化，即·将其从蔗糖琼脂培养基斜面上转接到500ml的挡板瓶中，挡板瓶装液量为80ml，在恒温28°C转速180r/min，培养30h。三、以4%体积比将种子菌液转接到500ml的挡板瓶中，挡板瓶装液量为100ml，在恒温28°C转速200r/min，培养104h后，取发酵液离心去除菌丝体。四、在上层清液中加入三倍体积的无水乙醇，搅拌，4°C放置过夜，使普鲁兰多糖充分沉淀，沉淀液以5000r/min离心30min得普鲁兰多糖沉淀,沉淀用无水乙醇洗漆2次,干燥得到白色或浅黄色多糖粗品，产量102g本文档来自技高网...
【技术保护点】
淀粉废水及麦芽根制备培养基的制备方法，包括如下步骤：(1)将麦芽根粉碎，过20目筛，制备麦芽根汁，质量浓度控制20?50%；(2)将麦芽根汁与工业淀粉废水按照质量比20～40:100添加混合，在38～40℃浸渍25?40min；控制温度为45℃进行蛋白质休止，保持20?40min，控制温度为55℃进行第二次蛋白质休止保持30分钟，控制温度在63℃进行第一段糖化，保持时间40min，第二段糖化温度为68℃，至碘液反应至无色，升温到76～78℃，过滤，洗槽，调pH到5.6?7.4，添加2～3g/L的NaCl、0.2～0.4g/L的MgSO4、3～5g/L的K2HPO4，灭菌成为培养基。
【技术特征摘要】
1.粉废水及麦芽根制备培养基的制备方法，包括如下步骤: (1)将麦芽根粉碎，过20目筛，制备麦芽根汁，质量浓度控制20-50%; (2)将麦芽根汁与工业淀粉废水按照质量比20 40:100添加混合，在38 40°C浸溃25-40min ;控制温度为45°C进行蛋白质休止，保持20_40min，控制温度为55°C进行第二次蛋白质休止保持30分钟，控制温度在63°C进行第一段糖化，保持时间40min，第二段糖化温度为68°C，至碘液反应至无色，升温到76 78°C，过滤，洗槽，调pH到5.6-7.4，添加2 3g/L的NaCU0.2 0.4g/L的MgS04、3 5g/L的K2HP04,灭菌成为培养基。2.根据权利要求1所述淀粉废水及麦芽根制备培养基的制备方法，...
【专利技术属性】
技术研发人员：乔长晟，宋亚琼，郝华璇，李振海，李政，盖丽丰，
申请(专利权)人：天津北洋百川生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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