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一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法技术

技术编号:8677945 阅读:230 留言:0更新日期:2013-05-08 22:20
本发明专利技术提出了一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法,包括下列步骤:1)制备均质的间充质干细胞的培养基;2)多种小RNA分子的组合;3)核酸多肽纳米粒的组装和转染;4)转决定后的造血干细胞诱导扩增培养基;5)激活多种造血相关的基因,解决了现有技术造血干细胞治疗中的细胞配型困难、免疫排斥和造血干细胞数量限制的技术瓶径的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
,特别是指。
技术介绍
脂肪源性干细胞(Adipose-derived stem cell, AD-MSCs)的主要来源白色脂肪(white adipose tissue, WAT)在体内分布广泛,储量丰富。细胞克隆实验证明,骨髓来源的间充质干细胞(Bone-marrow mesenchymal stem cell, BMSCs)仅占成人骨髓的0.2 X IO^5-0.1 X 10_5,而脂肪组织中所获得的干细胞克隆形成率是BMSCs的100-500倍。骨髓中BMSCs的比例和增值能力均会随着年龄的增长和骨质疏松的发生率而下降,但脂肪组织中ADSCs数量不随供者年龄增加而减少。ADSC体外扩增和自我更新能力强,原代培养约5-7天后,细胞融合超过90%,一个月出现3个对数生长期,能较稳定传代20代以上;体外培养时对血清无特殊选择性,无需添加物即可良好的生长,液氮冻存和长期传代后的ADSCs细胞生长和表型均无改变。ADSCs具有多向分化能力,在不同诱导培养条件下,ADSCs能够定向分化成成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、内皮细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、胰腺内分泌样本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法,其特征在于,包括下列步骤:1)制备均质的间充质干细胞的培养基;2)多种小RNA分子的组合;3)核酸多肽纳米粒的组装和转染;4)转决定后的造血干细胞诱导扩增培养基;5)激活多种造血相关的基因。

【技术特征摘要】
1.一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法,其特征在于,包括下列步骤: 1)制备均质的间充质干细胞的培养基; 2)多种小RNA分子的组合; 3)核酸多肽纳米粒的组装和转染; 4)转决定后的造血干细胞诱导扩增培养基; 5)激活多种造血相关的基因。2.按权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法,其特征在于:所述培养基是指在无血清的高糖DMEM/F12培养基中添的EGF, FGF-2, PDGF-BB, IGF 和 TGF- β 五因子。3.按权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法,其特征在于:所述培养基是指在无血清的高糖DMEM/F12培养基中添的shh, SCF,TPO, Flt3L, Deltal, IGFBP, Angiopoietin, MBP4, LIF, TGF-β 十因子。4.按权利要求 1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法,其特征在于:所述多种小RNA分子是指miR-138-l,miR-138-2,miR-433以及靶向EIDlmRNA不同位点的siR-EIDl分子的序列。5.按权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法,其特征在于:所述转...

【专利技术属性】
技术研发人员:殷勤伟黄兵
申请(专利权)人:黄兵
类型:发明
国别省市:

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