官能化线性DNA盒的生成及植物中量子点/纳米颗粒介导的投递制造技术

技术编号：8612651 阅读：188 留言：0更新日期：2013-04-20 01:41

用于将感兴趣的官能化线性核酸盒分子导入包含细胞壁的植物细胞中的方法包括使用纳米颗粒。在一些实施方案中，包含细胞壁的细胞是培养的植物细胞。方法包括遗传或以其它方式修饰植物细胞，并用于治疗或预防任何植物，尤其是作物植物中的疾病。转基因植物包含通过自用官能化线性核酸盒分子转化的植物细胞再生全植物生成的感兴趣的核酸分子。

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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及使用纳米颗粒以将官能化线性核酸盒分子非侵入投递入具有完整细胞壁的植物细胞中的方法。专利技术背景纳米颗粒具有的独特性质已经被利用于将DNA投递至特定动物细胞。已经发现了，在将某些经DNA包被的纳米颗粒与没有细胞壁的细胞一起温育时，细胞吸收纳米颗粒，并开始表达DNA上编码的基因。也已经使用在大小范围3-5nm内的半导体纳米颗粒(例如，量子点(“QD”))作为载体来将分子投递入细胞中。DNA和蛋白质可以与附着于QD表面的某些配体连接。见例如Patolsky,等(2003) J. Am. Chem. Soc. 125:13918。可以通过使用标准的生物缀合方案将经羧酸或胺包被的QD与含有硫醇基团(见例如Dubertret等(2002) Science298:1759; Akerman,等(2002)Proc. Natl. Acad. Sc1. U. S. A. 99:12617;Mitchell, 等(1999) J. Am. Chem. Soc. 121:8122)，或N-羟基琥珀酰亚氨基(“NHS”)酯基的分子交联。见例如 Pinaud 等(2004)J. Am. Chem. Soc. 126:6115;Bruchez 等(1998)Science281:2013。一种将分子附着于QD表面的备选方式是经由将经链霉抗生物素蛋白包被的QD与生物素化的蛋白质、寡核苷酸、或抗体缀合进行。见例如Dahan,等(2003) Science302:442;Pinaud, 等(2004)J. Am. Chem. Soc. 126:6115;Wu,等...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.07 US 61/362,2221.一种将感兴趣的官能化线性核酸盒分子导入具有细胞壁的植物细胞中的方法，该方法包括提供具有细胞壁的植物细胞；用感兴趣的官能化线性核酸盒分子包被纳米颗粒；将所述具有细胞壁的植物细胞和所述经包被的纳米颗粒置于彼此接触；并容许所述纳米颗粒和所述感兴趣的官能化线性核酸盒分子摄取入所述包含细胞壁的植物细胞。2.依照权利要求1的方法，其中所述纳米颗粒包含与所述感兴趣的官能化线性核酸盒分子相互作用的官能团。3.依照权利要求2的方法，其中所述纳米颗粒是链霉抗生物素蛋白-QD缀合的纳米颗粒。4.依照权利要求1的方法，进一步包括容许所述纳米颗粒摄取入所述包含细胞壁的植物细胞的区室中。5.依照权利要求4的方法，进一步包括用亚细胞区室靶向蛋白包被所述纳米颗粒。6.依照权利要求5的方法，其中所述区室选自下组胞质溶胶、细胞核、液泡形成体、质体、黄化质体、色质体、白色体、油质体、蛋白质体、造粉体、叶绿体、和双层膜的腔。7.依照权利要求1的方法，其中所述具有细胞壁的植物细胞是来自商业作物物种的植物细胞。8.依照权利要求7的方法，其中所述植物细胞选自下组烟草、胡萝卜、玉米、芸苔(canola)、油菜籽(rapeseed)、棉花、棕榈、花生、大豆、稻属物种(Oryza sp.)、拟南芥属物种(Arabidopsis sp·)、蓖麻属物种(Ricinus sp·)、和甘鹿细胞。9.依照权利要求7的方法，其中所述植物细胞来自选自下组的组织胚、分生组织、愈伤组织、花粉、叶、花药、根、根尖、花、种子、荚果和茎。10.依照权利要求1的方法，其中所述具有细胞壁的植物细胞是培养的细胞。11.依照权利要求1的方法，其中所述纳米颗粒选自下组半导体纳米颗粒、量子点、带正电荷的纳米颗粒、金纳米微粒、金包被的纳米微粒、多孔性纳米颗粒、中孔性纳米颗粒、硅土纳米颗粒、聚合物纳米颗粒、鹤纳米颗粒、明胶纳米颗粒、纳米壳、纳米核心、纳米球、纳米棒、和磁性纳米颗粒。12.依照权利要求11的方法，其中所述纳米颗粒是半导体纳米颗粒。13.依照权利要求12的方法，其中所述半导体...

【专利技术属性】
技术研发人员：KY尧，JP塞缪尔，FG伯勒斯，NC桑伯朱，SR韦布，
申请(专利权)人：陶氏益农公司，
类型：
国别省市：

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