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一种利用反义寡核苷酸沉默拟南芥内源miRNA的方法技术

技术编号:8268077 阅读:447 留言:0更新日期:2013-01-30 23:41
本发明专利技术公开了一种利用反义寡核苷酸沉默拟南芥内源miRNA的方法,属于反义寡核苷酸的应用技术领域。本发明专利技术的方法是用miRNA反义寡核苷酸的水溶液浸泡拟南芥根系,使miRNA反义寡核苷酸导入植物细胞,从而实现在植物活体中特异性地沉默目标miRNA。该方法具有操作简便快捷,干扰效果显著、稳定持久的优点,避免了现有方法由于依赖转基因技术因而实验周期长、费时费力的缺点;同时也打破了利用糖溶液介导实现反义寡核苷酸跨膜运输的局限性,为拟南芥miRNA功能研究提供了新的技术手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种利用反义核苷酸沉默拟南芥内源miRNA的方法。
技术介绍
MicroRNA (miRNA)是一类约22nt的内源非编码小分子RNA。在真核生物中,miRNA通过与靶mRNA互补配对结合,以抑制基因翻译或剪切mRNA的方式,起到转录后负数调控的作用。对拟南芥、水稻等模式植物的研究显示,植物miRNA不仅调控根系发生、开花时序等多种生长发育过程,而且在氧自由基、干旱、盐分、严寒和无机营养缺失等胁迫响应中也起重要作用。miRNA作为广泛分布的转录后调节因子,已日益成为功能基因组研究中不可缺少的组分,但绝大部分miRNA的功能尚不清楚。目前,在拟南芥中对miRNA进行功能研究的手段主要有两种1)通过靶基因模拟(target mimics)的策略,利用过表达目标miRNA祀基因的类似物,间接实现knockdown目标miRNA的活性;2)通过人工miRNA (artificial miRNA, amiRNA)技术,利用过表达目标miRNA的前体,实现增强miRNA的活性。上述方法均以构建靶基因或miRNA前体的表达载体为前提,并需要利用转基因技术获得稳定遗传的转基因植株或者本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用反义寡核苷酸沉默拟南芥内源miRNA的方法,其特征在于是用miRNA反义寡核苷酸的水溶液浸泡拟南芥根系,使miRNA反义寡核苷酸导入植物细胞。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:唐恬谢睦南施苏华吴仲义张添元
申请(专利权)人:中山大学
类型:发明
国别省市:

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