一种制备胸腺肽α1的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备胸腺肽α1的方法。本发明专利技术提供的方法依次包括如下步骤：（1）培养将含有胸腺肽α1基因的重组表达载体导入宿主菌得到的重组菌后收集菌体并进行超声破碎；（2）升温至75℃并静置30分钟，收集上清液；（3）用截留分子量为10000道尔顿的滤膜进行超滤，收集滤液，即为胸腺肽α1溶液。75℃处理30分钟可将绝大部分菌体蛋白变性并离心去除，再用10000道尔顿的滤膜进一步去杂后可以得到高纯度、高活性的终产品，与化学合成的胸腺肽α1（日达仙）生物学活性相当。与传统的化学合成法或层析纯化法相比，采用本发明专利技术提供的方法制备胸腺肽α1，操作简单、成本大幅降低，非常适合工业生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种制备胸腺肽a I的方法。
技术介绍
1965年Goldestein等人从动物胸腺中分离到有生物活性的多肽类分子，命名为胸腺肽(Thymosin)。1972年Goldestein等进一步纯化所得到的主要分子量在1-15KD的组分，称之为胸腺肽组分5 (Thymosin，TF5)，用于动物研究和临床观察，发现该组分有补偿胸腺功能低下作用。胸腺肽a I (Thymosin a 1，T a I)是胸腺肽组分5(TF5)多肽混合物中活性最强的多肽之一，具有促进T-淋巴细胞分化、成熟和增强细胞免疫的功能，目前国外已将其肽合成产品应用于临床，对肿瘤、乙肝、丙肝及免疫缺陷等的治疗研究并取得了良好的效果。T a I是由28个氨基酸残基组成的酸性多肽，等电点4.2，相对分子量3108。目前主要通过组织提取法和化学合成法获得TaI。组织提取法受到材料来源的限制，通常产品中有效成分含量低，从而影响治疗效果。化学合成法得到的Ta I纯度高，但成本高、价格昂贵，限制了 Ta I的临床应用。有研究人员尝试通过基因工程技术制备Ta 1，但获得的重组蛋白需要进行蛋白酶处理，而且纯化方法采用了亲和层本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备胸腺肽α1的方法，依次包括如下步骤：（1）培养重组菌后收集菌体并进行超声破碎；所述重组菌为将含有胸腺肽α1基因的重组表达载体导入宿主菌得到的重组菌；（2）升温至75℃并静置30分钟，收集上清液；（3）用截留分子量为10000道尔顿的滤膜进行超滤，收集滤液，即为胸腺肽α1溶液；所述胸腺肽α1为如下是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有胸腺肽功能的由序列1衍生的蛋白质。

【技术特征摘要】
1.一种制备胸腺肽a I的方法，依次包括如下步骤: (1)培养重组菌后收集菌体并进行超声破碎；所述重组菌为将含有胸腺肽aI基因的重组表达载体导入宿主菌得到的重组菌； (2)升温至75°C并静置30分钟，收集上清液； (3)用截留分子量为10000道尔顿的滤膜进行超滤，收集滤液，即为胸腺肽aI溶液； 所述胸腺肽a I为如下是如下(a)或(b): (a)由序列表中序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列I的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有胸腺肽功能的由序列I衍生的蛋白质。2.按权利要求1所述的方法，其特征在于:所述胸腺肽aI基因为如下I)或2)或3)或4)或5)或6)的DNA分子: 1)编码区如序列表中序列2自5’末端第7至90位核苷酸所示的DNA分子； 2)序列表中序列2自5’末端第7至91位核苷酸所示的DNA分子； 3)序列表中序列2自5’末端第4至90位核苷...

【专利技术属性】
技术研发人员：伏显华，刘亭见，岑峻宇，
申请(专利权)人：北京诺派生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：