本发明专利技术公开了一种化学修饰的胸腺肽α1及其合成方法，其具有以下结构：A-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-IIe-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH或Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-IIe-Thr-Thr-Lys(A)-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH，所述A为与人血清白蛋白亲和性结合的脂肪酸，或与人血清白游离巯基偶联的马来酰亚胺衍生物。本发明专利技术的化学修饰的胸腺肽α1修饰位点精确，化学结构明确，合成方法工艺简练，经化学修饰的胸腺肽α1在静脉注射后立即特异性地与人体自身的血清白蛋白结合，将以人体自身的血清白蛋白作为缓释载体，从而大大延长其半衰期，显著增加有效药物浓度的持续时间，生物利用度高。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种，其具有以下结构：A-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-IIe-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH或Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-IIe-Thr-Thr-Lys(A)-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH，所述A为与人血清白蛋白亲和性结合的脂肪酸，或与人血清白游离巯基偶联的马来酰亚胺衍生物。本专利技术的化学修饰的胸腺肽α1修饰位点精确，化学结构明确，合成方法工艺简练，经化学修饰的胸腺肽α1在静脉注射后立即特异性地与人体自身的血清白蛋白结合，将以人体自身的血清白蛋白作为缓释载体，从而大大延长其半衰期，显著增加有效药物浓度的持续时间，生物利用度高。【专利说明】化学修饰的胸腺肽Ct 1及其合成方法
本专利技术属于生物化学材料合成领域，更具体地，本专利技术涉及一种化学修饰的胸腺肽α I及其合成方法。
技术介绍
胸腺肽α I是化学合成的一种多肽药物，生物活性比动物提取胸腺肽更高。胸腺肽α I作为免疫增强剂被广泛应用于重度感染、肝炎以及肿瘤的免疫治疗。药代动力学研究表明:胸腺肽α I在人血浆中很快由蛋白酶和氨肽酶降解，半衰期约为1.65小时。目前在临床使用的制剂是注射用胸腺肽α I冻干粉针，因而半衰期很短，极易在血浆中被酶降解而失去生物活性，生物利用度很低，临床使用时需要多次反复和长期注射等缺陷是目前胸腺肽αI产品的主要问题。目前主要采用微球制剂或聚乙二醇(PEG)化学修饰两大技术方案延长多肽药物的半衰期:微球注射剂目前是多肽缓释最成功的制剂技术之一，本技术以生物可降解聚合物如PLGA为骨架材料包裹多肽药物，使其在体内达到缓释效果，近10年来取得了许多成功的先例，如法国IPSEN公司研发的曲普瑞林PLGA微球、日本武田制药开发的亮丙瑞林微球等。但是，微球制剂技术目前存在包封率低，突释效应明显以及制剂工艺技术要求高，因此目前在国内多肽药物行业还难以推广。PEG修饰在化学修饰法延长蛋白类药物取得了成功:如先灵葆雅公司的PEG化IFN a -2b、罗氏公司的PEG化IFN a -2a等。PEG修饰在化学修饰法的缺点是:由于PEG本身是聚合物，难以得到修饰位点精确、产物化学结构唯一的产物。此外，PEG分子量大，修饰后药物的生物活性大大下降。近年来，以白蛋白的亲和性小分子配体如肉豆蘧酸修饰蛋白和多肽药物取得了极大的成功。诺和诺德(Novo Nordisk)公司的胰岛素产品诺和平(Levemir)就是以白蛋白的亲和性小分子配体肉豆蘧酸修饰的多肽药物，其半衰期从原来的4-6分钟延长至5-7小时。此后，诺和诺德公司利用类似的技术推出了肉豆蘧酸修饰的胰高血糖素(GLP-1)(商品名=Victoza)，将其半衰期从1.5-2分钟延长至11_15小时。然而，诺和诺德公司这两种产品的工艺都是先用基因工程表达胰岛素或胰高血糖素，而后通过肉豆蘧酸修饰得到最终产物。由于胰岛素或胰高血糖素中存在多个氨基修饰位点，因此应用本工艺难以得到修饰位点精确、产物化学结构唯一的产物。
技术实现思路
基于此，本专利技术提供了一种新的化学修饰的胸腺肽α I及其合成方法，化学修饰的胸腺肽α I修饰位点精确，化学结构明确，在保持胸腺肽α I疗效的基础上，延长胸腺肽α I的半衰期，提高胸腺肽α I的生物利用度。一种化学修饰的胸腺肽α 1，具有以下结构:A-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-1Ie-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH 或Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-1Ie-Thr-Thr-Lys(A)-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH,所述A为小分子配体，所述小分子配体为与人血清白蛋白亲和性结合的脂肪酸，或与人血清白游离巯基偶联的马来酰亚胺衍生物。在其中三个实施例中，所述脂肪酸为肉豆蔻酸，白蛋白上有多个结合位点能够高亲和性、高选择性地与肉豆蔻酸相结合。所述化学修饰的胸腺肽α I的结构为:Myr-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-1Ie-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH 或Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-1Ie-Thr-Thr-Lys(Myr)-Asp-Leu_Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OHo在其中一个实施例中，所述马来酰亚胺衍生物为马来酰亚胺的羧酸衍生物如丁酸、己酸或辛酸等。马来酰亚胺能够选择性地与白蛋白游离巯基发生亲核加成反应。本专利技术还提供了上述化学修饰的胸腺肽α I的合成方法，包括以下步骤:(I)以Fmoc保护的天冬酰胺王树脂为起始原料,按照标准Fmoc策略合成Fmoc保护的载有胸腺肽αI的王树脂；(2)以20%哌啶的DMF溶液(v/v)脱去末端氨基Fmoc保护基团后，将小分子配体溶于二甲基甲酰胺，以HBTU和DIEA活化后与载有胸腺肽α I的王树脂混合，缩合I小时后抽干，DMF洗涤，得到载有小分子配体修饰的胸腺肽α I的王树脂；所述小分子配体与Fmoc保护的天冬酰胺王树脂的摩尔比为2~6: I ；(3)用三氟乙酸切割王树脂，得到小分子配体修饰的胸腺肽α I粗产物，纯化、冻干得到纯产物。在其中一个实施例中，所述小分子配体与Fmoc保护的天冬酰胺王树脂的摩尔比为 4:1。或包括如下步骤:(1)以Fmoc 保护的天冬酰胺王树脂和Fmoc-Lys (Dde) -OH为起始原料,按照标准Fmoc策略合成Fmoc保护的载有胸腺肽α I的王树脂；随后脱去末端氨基Fmoc保护基团后，加入乙酸酐和DIEA，室温反应10-20分钟得到乙酰化胸腺肽α I的王树脂；(2)用肼的体积百分含量为2-10%的DMF溶液脱去赖氨酸侧链氨基Dde保护基团后，将小分子配体溶于二甲基甲酰胺，以HBTU和DIEA活化后与乙酰化胸腺肽α I的王树脂混合，缩合I小时后抽干，DMF洗涤四次后，得到载有小分子配体修饰的乙酰化胸腺肽α I的王树脂；所述小分子配体与Fmoc保护的天冬酰胺王树脂的摩尔比为2~6:1 ;(3)用三氟乙酸切割王树脂，得到小分子配体修饰的乙酰化胸腺肽α I粗产物，纯化、冻干得到纯产物。在其中一个实施例中，所述小分子配体与Fmoc保护的天冬酰胺王树脂的摩尔比为 4:1。在其中一个实施例中，所述DMF溶液中肼的体积百分含量为2%。或包括如下步骤:(1)将小分子配体偶联到Fmoc-Lys-OH上得到Fmoc-Lys (本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种化学修饰的胸腺肽α1，其特征在于，其具有以下结构：A‑Ser‑Asp‑Ala‑Ala‑Val‑Asp‑Thr‑Ser‑Ser‑Glu‑IIe‑Thr‑Thr‑Lys‑Asp‑Leu‑Lys‑Glu‑Lys‑Lys‑Glu‑Val‑Val‑Glu‑Glu‑Ala‑Glu‑Asn‑OH或Ac‑Ser‑Asp‑Ala‑Ala‑Val‑Asp‑Thr‑Ser‑Ser‑Glu‑IIe‑Thr‑Thr‑Lys(A)‑Asp‑Leu‑Lys‑Glu‑Lys‑Lys‑Glu‑Val‑Val‑Glu‑Glu‑Ala‑Glu‑Asn‑OH，所述A为小分子配体，所述小分子配体为与人血清白蛋白亲和性结合的脂肪酸，或与人血清白游离巯基偶联的马来酰亚胺衍生物。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：粟武，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44
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