口蹄疫病毒抗原多肽及疫苗制造技术

本发明专利技术提供了一种口蹄疫病毒抗原多肽，融合抗原多肽，以及含有上述抗原多肽和/或融合抗原多肽的口蹄疫病毒疫苗。本发明专利技术还提供了该抗原多肽，融合抗原多肽及疫苗的制备方法。本发明专利技术进一步提供了所述抗原多肽，融合抗原多肽及疫苗在预防和控制口蹄疫病毒感染方面的应用。本发明专利技术的口蹄疫病毒抗原多肽，融合抗原多肽和疫苗具有广谱的免疫原性，其可以对不同口蹄疫病毒及其变异株都产生良好的免疫原性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及口蹄疫病毒抗原多肽，融合抗原多肽，以及含有上述抗原多肽和/或融合抗原多肽的口蹄疫病毒疫苗。本专利技术还涉及上述抗原多肽，融合抗原多肽和疫苗的制备及其应用。
技术介绍
口蹄疫是由口蹄疫病毒所引起的一种急性、热性、高度接触性传染的动物传染病。口蹄疫主要侵害偶蹄类动物，其临床诊断特征为口腔粘膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱。成年动物感染口蹄疫后一般致死率不高但其发病率可达100%，发病动物的口、蹄部会出现大量水疱，精神沉郁，进而使得畜产量锐减。幼畜感染口蹄疫后则经常会不见症状地猝死，严重时致死率可达100%。由于·口蹄疫传播迅速、难于防治、补救措施少，因此每次爆发后只能屠宰和集体焚毁染病牲畜以绝后患，从而给畜牧产业造成巨大的经济损失。口蹄疫病毒是口蹄疫的致病原，其属于细小核糖核酸病毒，具有多血清型、高变异性等特点。已知口蹄疫病毒目前有O、Α、C、SATl (南非I型)、SAT2 (南非II型)、SAT3 (南非III型)和Asial (亚洲I型)7个主要血清型。每种主型又分若干亚型，目前发现的亚型已有70多种。口蹄疫病毒各型之间的抗原性常常不同，彼此之间不能交互免疫，而且在同一种血清型中抗原变异的程度也很大，以至于能够有效地抵抗一种亚型的口蹄疫疫苗可能对同一血清型中的另一种亚型却没有保护。因为口蹄疫病毒的高异变性和各血清型之间通常不能相互免疫，所以给口蹄疫的防治工作带来巨大的困难。目前仍迫切需要提供对口蹄疫病毒具有良好免疫原性的疫苗，理想的疫苗还应对多种不同亚型的口蹄疫病毒都具有良好的免疫原性，从而可以为牲畜提供广泛的免疫保护。
技术实现思路
本专利技术涉及口蹄疫病毒抗原多肽，融合抗原多肽，以及含有上述抗原多肽和/或融合抗原多肽的口蹄疫病毒疫苗,该抗原多肽和疫苗可使宿主动物产生针对多种不同谱系口蹄疫病毒的免疫原性，从而为宿主动物提供针对多种不同谱系口蹄疫病毒的免疫保护。就本专利技术而言，术语“免疫”是指，以适宜的形式和通过适宜的途径对宿主动物给与某一抗原后，诱导宿主动物产生针对该抗原的特异性的细胞介导的和/或基于抗体的免疫应答，例如，抗体和/或细胞因子的产生和/或细胞毒性T细胞、抗原呈递细胞、辅助T细胞、树突细胞的活化，和/或其它细胞应答反应。就本专利技术而言，术语“免疫原性”是指一种或多种抗原诱导宿主动物产生针对该一种或多种抗原的特异性的免疫反应的能力。就本专利技术而言，术语“抗原多肽”是指由两个或两个以上氨基酸通过肽键共价连接形成的具有免疫原性的肽链结构。本专利技术的肽链结构可以是直链的，带分支结构的，和/或带环状结构的。就本专利技术而言，术语“疫苗”是指含有一种或多种具有机体免疫能力的抗原并被配制成能向宿主动物给药形式的制剂。将疫苗引入到宿主动物体内后，该疫苗就能激发宿主动物产生针对该一种或多种抗原的免疫反应。就本专利技术而言，术语“宿主动物”是指能够被口蹄疫病毒侵入并允许口蹄疫病毒在其体内复制的动物。在某些实施方式中，宿主动物是偶蹄动物。在某些实施方式中，宿主动物是猪、牛、羊等家畜动物。口蹄疫病毒在宿主动物中的侵入和复制可能使宿主动物产生口蹄疫的临床特征，也可能不使宿主动物产生任何临床特征。本专利技术提供了一类人工合成的口蹄疫病毒抗原多肽。根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供的抗原多肽含有如下所示的氨基酸序列:Cys Lys Tyr X2X3X4X5X6X7Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln Val Leu X8 X9Lys AlaAla ArgX10 Leu Pro Thr Ser Phe Asn Tyr X11 Ala He Lys (SEQ ID NO:1 )，其中，X2=Gly或 Ser, X3=Glu 或 Asp，X4=Ser 或 Gly, X5=Pro 或 Thr 或 Arg 或 His，X6=Val 或 Thr, X7=Ala 或Thr，X8=Thr 或 Ala，X9=Gln 或 Pro, X10=Thr 或 Cys, X11=Gly 或 Cys,且 X10 和 X11 必须有一个且只能有一个取Cys。在一个实施方式中，本专利技术提供的抗原多肽含有如下所示的氨基酸序列:Cys Lys Tyr X2X3X4X5X6X7Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln Val Leu X8 X9 Lys AlaAla ArgCys Leu Pro Thr Ser Phe Asn Tyr Gly Ala He LysCSEQ ID NO:2)，其中，X2=Gly或 Ser, X3=Glu 或 Asp，X4=Ser 或 Gly, X5=Pro 或 Thr 或 Arg 或 His，X6=Val 或 Thr, X7=Ala 或Thr，X8=Thr 或 Ala，X9=Gln 或 Pro。在另一个实施方式中，本专利技术提供的抗原多肽含有如下所示的氨基酸序列:Cys Lys Tyr X2X3X4X5X6X7Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln Val Leu X8X9Lys Ala AlaArgThr Leu Pro Thr Ser Phe Asn Tyr Cys Ala He Lys (SEQ ID N0:3)，其中，X2=Gly或 Ser, X3=Glu 或 Asp，X4=Ser 或 Gly, X5=Pro 或 Thr 或 Arg 或 His，X6=Val 或 Thr, X7=Ala 或Thr，X8=Thr 或 Ala，X9=Gln 或 Pro。在另一个实施方式中，本专利技术提供的抗原多肽含有如下所示的氨基酸序列:Cys Lys Tyr Gly Glu Ser Pro Val Ala Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln Val LeuThr Pro Lys AlaAla Arg Cys Leu Pro Thr Ser Phe Asn Tyr Gly Ala He Lys (SEQ IDNO:4)o在另一个实施方式中，本专利技术提供的抗原多肽含有如下所示的氨基酸序列:Cys Lys Tyr Gly Glu Ser Pro Val Thr Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln Val LeuThr Gln Lys AlaAla Arg Cys Leu Pro Thr Ser Phe Asn Tyr Gly Ala He Lys (SEQ IDNO:5)在另一个实施方式中，本专利技术提供的抗原多肽含有如下所示的氨基酸序列:Cys Lys Tyr Gly Asp Gly Thr Val Ala Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln Val LeuAla Gln Lys AlaAla Arg Cys Leu Pro Thr Ser Phe Asn Tyr Gly Ala He Lys (SEQ IDNO:6)o在另一个实施方式中，本专利技术提供的抗原多肽含有如下所示的氨基酸序列:Cys Lys Tyr Gly Glu Ser His Thr Thr Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln Val LeuAla Gln LysAla Ala Arg Cys Leu Pro Thr Ser Phe Asn Tyr Gly Ala He Lys 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含如下所示氨基酸序列的口蹄疫病毒抗原多肽：Cys?Lys?TyrX2X3X4X5X6X7Asn?Val?Arg?Gly?Asp?Leu?Gln?Val?LeuX8X9Lys?Ala?Ala?Arg?X10Leu?Pro?Thr?Ser?Phe?Asn?TyrX11Ala?Ile?Lys，其中，X2=Gly或Ser，X3=Glu或Asp，X4=Ser或Gly，X5=Pro或Thr或Arg或His，X6=Val或Thr，X7=Ala或Thr，X8=Thr或Ala，X9=Gln，X10=Thr或Cys，X11=Gly或Cys，且X10和X11必须有一个且只能有一个取Cys。

【技术特征摘要】
2012.08.10 CN 201210285118.41.种包含如下所示氨基酸序列的口蹄疫病毒抗原多肽:Cys Lys TyrX2X3X4X5X6X7AsnVal Arg Gly Asp Leu Gln Val LeuX8X9Lys Ala Ala Arg X10Leu Pro Thr Ser Phe AsnTyrX11Ala He Lys,其中，X2=Gly 或 Ser, X3=Glu 或 Asp, X4=Ser 或 Gly, X5=Pro 或 Thr 或 Arg或 His, X6=Val 或 Thr, X7=Ala 或 Thr, X8=Thr 或 Ala, X9=Gln, X10=Thr 或 Cys, X11=Gly 或 Cys,且Xltl和X11必须有一个且只能有一个取Cys。2.权利要求1所述的口蹄疫病毒抗原多肽，其特征在于，包含选自下组的氨基酸序列:SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6，和 SEQ ID NO:7。3.权利要求1所述的口蹄疫病毒抗原多肽，其特征在于，包含如下所示的氨基酸序列:Val Tyr Asn Gly X1Cys Lys Tyr X2X3X4X5X6X7Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln ValLeuX8X9Lys Ala Ala Arg X10Leu Pro Thr Ser Phe Asn TyrX11Ala He Lys,其中，X1=Asn或 Asp, X2=Gly 或 Ser, X3=Glu 或 Asp, X4=Ser 或 Gly, X5=Pro 或 Thr 或 Arg 或 His, X6=Val 或Thr, X7=Ala 或 Thr, X8=Thr 或 Ala, X9=Gln, X10=Thr 或 Cys, X11=Gly 或 Cys,且 X10 和 X11 必须有一个且只能有一个取Cys。4.权利要求3所述的口蹄疫病毒抗原多肽，其特征在于，包含如下所示的氨基酸序列:Val Tyr Asn Gly Asn Cys Lys Tyr GlyX3X4X5X6X7Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln ValLeuX8X9Lys Ala Ala Arg Cys Leu Pro Thr Ser Phe Asn Tyr Gly Ala He Lys,其中，X3=Glu 或 Asp, X4=Ser 或 Gly, X5=Pro 或 Thr 或 Arg 或 His, X6=Val 或 Thr, X7=Ala 或 Thr,X8=Thr 或 Ala, X9=Gln05.权利要求4所述的口蹄疫病毒抗原多肽，其特征在于，包含选自下组的氨基酸序列:SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26，和 SEQ ID NO:27。6.权利要求1-5中任一项所述的口蹄疫病毒抗原多肽，其特征在于所述抗原多肽带有通过二硫键形成的环状结构。7.权利要求6所述的口蹄疫病毒抗原多肽，其特征在于，所述抗原多肽的环化度至少为85%。8.种口蹄疫病毒融合抗原多肽，其特征在于，包含至少两条选自权利要求1-5中任一项所述的抗原多肽。9.种口蹄疫病毒融合抗原多肽,其特征在于，包含至少一条口蹄疫病毒抗原多肽， 和选自以下组的一种或多种多肽序列:T辅助细胞表位，免疫刺激序列和天然口蹄疫病毒抗原多肽；所述口蹄疫病毒抗原多肽包含如下所示的氨基酸序列:Cys LysTyrX2X3X4X5X6X7Asn Val Arg Gly Asp Leu Gln Val LeuX8X9Lys Ala Ala Arg X10Leu Pro ThrSer PheAsn TyrX11Ala He Lys,其中，X2=Gly 或 Ser, X3=Glu 或 Asp, X4=Ser 或 Gly, X5=Pro或 Thr 或 Arg 或 His, X6=Val 或 Thr, X7=Ala 或 Thr, X8=Thr 或 ...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈智英，郑海学，刘湘涛，才学鹏，聂东升，殷宏，
申请(专利权)人：申联生物医药上海有限公司，中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：