一种人类免疫缺陷病毒核酸检测试剂盒制造技术

技术编号:8653223 阅读:330 留言:0更新日期:2013-05-01 20:21
本发明专利技术提供一种人类免疫缺陷病毒HIV核酸检测试剂盒,所述试剂盒中包括至少两套引物探针,且所述至少两套引物探针分别来自不同的保守区域。优选的是,所述保守区域包括HIV基因的相对保守区:GAG、POL和LTR区。本发明专利技术设计组合两个不同区域的两套引物探针配制反应体系对HIV-1RNA进行联合检测以鉴别阳性反应的存在,有效降低了漏检的几率,能够更全面的覆盖所有亚型(包括HIV-1的M、N、O群的所有亚型),并进一步提高检测灵敏度和更准确地定量,其检测灵敏度可达50IU/ml,定量线性范围为50~1.0×108IU/ml。本发明专利技术另外提供一种HIV核酸检测试剂盒,所述试剂盒中包括一套引物探针序列,所述引物探针序列选自LTR1、LTR2、GAG1、GAG2、POL1和POL2这六套中的任意一套。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于诊断试剂
,具体涉及一种人类免疫缺陷病毒Hiv-1的荧光PCR检测试剂盒。
技术介绍
获得性免疫缺陷综合征(acquiredimmunodeficiency syndrome,AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiencyvirus, HIV)感染而引起的疾病,又称艾滋病。该病患者的免疫功能部份或完全丧失,⑶4+细胞(cd4和cd8是T淋巴细胞上的抗原蛋白质,其中cd4+称为辅助性T细胞)数目减少,继而发生机会性感染、肿瘤等,临床表现多种多样。1981年世界报告首例艾滋病病例至今,在短短30年间,艾滋病已肆虐全球,夺去2500多万人的生命。联合国艾滋病规划署21日发布年度报告,全球2010年艾滋病病毒(HIV)携带者大约3400万人,比2009年增加70万。自1985年我国发现首例艾滋病病人以来,我国艾滋病感染人数逐年上升。中国疾控中心性病艾滋病预防控制中心数据显示,我国累计报告艾滋病病毒感染者 和病人43.4万人,其中死亡8.8万人。据联合国艾滋病规划署、世界卫生组织和卫生部联合专家组评估,截至2011年底,估计我国存活艾滋病感染本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人类免疫缺陷病毒核酸检测试剂盒,所述试剂盒中包括至少两套引物探针,且所述至少两套引物探针分别来自不同的保守区域。

【技术特征摘要】
1.一种人类免疫缺陷病毒核酸检测试剂盒,所述试剂盒中包括至少两套引物探针,且所述至少两套引物探针分别来自不同的保守区域。2.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述保守区域包括HIV基因的相对保守区:GAG基因、POL基因和LTR区。3.根据权利要求2所述的检测试剂盒,其特征在于,所述LTR中的引物探针序列为LTRl或LTR2,所述GAG中的引物探针为GAGl或GAG2,所述POL中的引物探针序列为POLl或P0L2;且其序列分别如下:LTRl: 上游引物 LTR-Fl:5’ -AGCTTGCCTTGAGTGCTTCA-3’, 下游引物 LTR-Rl:5’ -AGTGGTCTGAGGGATCTCTAGTTAC-3’,探针 LTR-Pl:5’ -AGTCACACAACAGACGGGCACACACT-3’ ;LTR2: 上游引物 LTR-F2:5’ -CCTCAATAAAGCTTGCCTTGA-3’, 下游引物 LTR-R2:5’ -GGCGCCACTGCTAGAGATT-3’,探针 LTR-P2:5’ -ACTCTGGTAACTAGAGATCCCTCAGACC-3’ ;GAGl: 上游引物 GAG-Fl:5’ -AGCCCAGAAGTAATACCCATGTT-3’, 下游引物 GAG-Rl:5’ -CATTCTGCAGCTTCCTCATTGAT-3’,探针 GAG-Pl:5’ -CATTATCAGAAGGAGCCACCCCACAAG-3’ ;GAG2: 上游引物 GAG-F2:5’ -GCAGCCATGCAAATGTTAAAAGA-3’, 下游引物 GAG-R2:5’ -GGTTCTCTCATCTGGCCTGGT-3’, 探针 GAG-P2:5’ -TCCCATTCTGCAGCTTCCTCATTGAT-3’ ;POLl: 上游引物 POL-Fl:5’ -GACATAATAGCAACAGACATACAAACTA-3’, 下游引物 POL-Rl:5’ -ACTGCCCCTTCACCTTTCC-3’,探针 POL-Pl:5’ -TCTCTGCTGTCCCTGTAATAAACCCG-3’ ;P0L2: 上游引物 P0L-F2:5’ -CTGGAAAGGTGAAGGGGCAGT-3’, 下游引物 P0L-R2:5’ -ATCCTCATCCTGTCTACCTGCCA-3’,探针 P0L-P2:5’ -CAATCATCACCTGCCATCTGTTTTCCATA-3’。4.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中使用的引物探针序列为LTRl和POLl。5.根据权利要求广4中任意一项所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括RNA提取溶液I IV,其中, RNA提取溶液1:由十二烷基硫酸钠0.2 1.0% (质量/体积)、曲拉通1.(Γ4.0% (体积/体积),异硫氰酸胍0.2l.0mol/L和10(Γ400 μ g/ml的磁珠组成; RNA提取溶液I1:包括4-羟乙基哌嗪乙磺酸10(T300mmol/L、氯化钠10(T300mmol...

【专利技术属性】
技术研发人员:戴立忠熊晓燕邓中平
申请(专利权)人:湖南圣湘生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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