一种核酸及其应用和药物组合物制造技术

技术编号:8653117 阅读:204 留言:0更新日期:2013-05-01 19:58
本发明专利技术提供了一种核酸,该核酸为siRNA或者插入有编码短发夹核糖核酸的核酸片段的质粒。本发明专利技术还提供了上述核酸在制备用于预防和/或治疗乙型肝炎的药物组合物中的应用。本发明专利技术还提供了一种药物组合物,该药物组合物含有如上所述的核酸和药学上可接受的载体。本发明专利技术提供的核酸和药物组合物能够在体内达到30%以上抑制率的干扰HBV的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物制药领域,具体地,涉及一种核酸、该核酸的应用和一种药物组合物。
技术介绍
乙型病毒性肝炎简称乙型肝炎(乙肝),是一种由乙型肝炎病毒(HBV)引起的传染病。乙型肝炎主要通过血液和体液传播,临床表现多样化,包括急性、慢性、淤胆型和重症型肝炎,并且容易发展为慢性肝炎和肝硬化,少数病例亦可转变为原发性肝细胞癌。目前HBV感染呈世界性流行,主要侵犯儿童及青壮年。据世界卫生组织报道,全球约有4亿人为慢性HBV携带者,每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。中国是世界范围内感染HBV人数最多的国家,全国现有慢性乙肝病人2000万,每年乙肝新发病人数约50万。由此可见,乙肝已成为严重威胁人类健康的世界性疾病,也是我国当前流行最为广泛、危害性最为严重的一种传染病。防治乙型肝炎的药物中,核酸干扰药物具有良好的应用前景,但是,目前的核酸干扰药物的体内干扰HBV的效果较差。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服目前的核酸干扰药物的体内干扰HBV的效果较差的缺陷,提供一种体内干扰HBV的效果较好的核酸干扰药物。本专利技术的专利技术人发现,针对同一已知基因或基因组,即使根据已知的siRNA作用机制和序列规律设计出来的siRNA,并不一定能在体内具有较好的核酸干扰效果,即不经过实验验证,无法确定siRNA的体内效果。本专利技术的专利技术人经过创造性劳动,发现并验证了若干在体内具有较好的核酸干扰效果的siRNA,由此得到本专利技术。为了实现上述目的,本专利技术提供了一种核酸,该核酸含有正义链序列为SEQ IDNO:1且反义链序列为SEQ ID NO:2的siRNA-8、正义链序列为SEQ ID NO:3且反义链序列为SEQ ID NO:4的siRNA-23、正义链序列为SEQ ID NO:5且反义链序列为SEQ ID NO:6的siRNA-27、正义链序列为SEQ ID NO:7且反义链序列为SEQ ID NO:8的siRNA-30、正义链序列为SEQ ID NO:9且反义链序列为SEQ ID NO:10的siRNA-32、正义链序列为SEQ ID NO:11且反义链序列为SEQ ID NO:12的siRNA-34、正义链序列为SEQ ID NO:34且反义链序列为SEQ ID NO:35的siRNA-4、正义链序列为SEQ ID NO:36且反义链序列为SEQ ID NO:37的siRNA-9、正义链序列为SEQ ID NO:38且反义链序列为SEQ ID NO:39的siRNA-17、正义链序列为SEQ ID NO:40且反义链序列为SEQ ID NO:41的siRNA-22、正义链序列为SEQ ID NO:42且反义链序列为SEQ ID NO:43的siRNA-26、正义链序列为SEQ ID NO:44且反义链序列为SEQ ID NO:45的siRNA-35、正义链序列为SEQ ID NO:46且反义链序列为SEQ ID NO:47的siRNA-3 6、正义链序列为SEQ ID NO:48且反义链序列为SEQ ID NO:49的siRNA-37、正义链序列为SEQ ID NO:50且反义链序列为SEQ ID NO:51的siRNA-38、正义链序列为SEQ ID NO:52且反义链序列为SEQ ID NO:53的siRNA-40和正义链序列为SEQID NO:54且反义链序列为SEQ ID NO:55的siRNA-45中的至少一种。本专利技术还提供了另外一种核酸,该核酸为插入有编码短发夹核糖核酸的核酸片段的质粒,所述质粒表达所述短发夹核糖核酸,所述编码短发夹核糖核酸的核酸片段由两个短反向重复片段和位于所述两个短反向重复片段之间的环片段组成;所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID N0:13和SEQ ID NO:14,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID N0:19和SEQ IDNO:20,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID NO:21和SEQ ID N0:22,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID N0:23和SEQ ID NO:24,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID N0:56和SEQ ID NO:57,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ IDN0:60和SEQ ID NO:61,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID N0:62和SEQ IDNO:63,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID N0:66和SEQ ID NO:67,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID N0:68和SEQ ID NO:69,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID N0:70和SEQ ID NO:71,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ IDN0:72和SEQ ID NO:73,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID NO:74和SEQID NO:75,或所述两个短反向重复片段的序列分别为SEQ ID NO:76和SEQ ID NO -.1l0本专利技术还提供了上述核酸在制备用于预防和/或治疗乙型肝炎的药物组合物中的应用。本专利技术还提供了一种药物组合物,该药物组合物含有如上所述的核酸和药学上可接受的载体。通过上述技术方案,本专利技术提供的核酸和药物组合物能够在体内达到30%以上抑制率的干扰HBV的效果。`本专利技术的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。具体实施例方式以下对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术,并不用于限制本专利技术。在本专利技术中,使用的术语siRNA是指小干扰核糖核酸,使用的术语ShRNA是指短发夹核糖核酸。本专利技术提供了一种核酸,该核酸含有正义链序列为SEQ ID NO:1且反义链序列为SEQ ID NO:2的siRNA-8、正义链序列为SEQ ID NO:3且反义链序列为SEQ ID NO:4的siRNA-23、正义链序列为SEQ ID NO:5且反义链序列为SEQ ID NO:6的siRNA-27、正义链序列为SEQ ID NO:7且反义链序列为SEQ ID NO:8的siRNA-30、正义链序列为SEQ ID NO:9且反义链序列为SEQ ID NO:10的siRNA-32、正义链序列为SEQ ID NO: 11且反义链序列为SEQ ID NO: 12的siRNA-34、正义链序列为SEQ ID NO:34且反义链序列为SEQ ID N0:35的siRNA-4、正义链序列为SEQ ID NO:36且反义链序列为SEQ ID NO:37的siRNA-9、正义链序列为SEQ ID NO:38且反义链序列为SEQ ID NO:39的siRNA-17、正义链序列为SEQ ID N本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种核酸,该核酸含有正义链序列为SEQ?ID?NO:1且反义链序列为SEQ?ID?NO:2的siRNA?8、正义链序列为SEQ?ID?NO:3且反义链序列为SEQ?ID?NO:4的siRNA?23、正义链序列为SEQ?ID?NO:5且反义链序列为SEQ?ID?NO:6的siRNA?27、正义链序列为SEQ?ID?NO:7且反义链序列为SEQ?ID?NO:8的siRNA?30、正义链序列为SEQ?ID?NO:9且反义链序列为SEQ?ID?NO:10的siRNA?32、正义链序列为SEQ?ID?NO:11且反义链序列为SEQ?ID?NO:12的siRNA?34、正义链序列为SEQ?ID?NO:34且反义链序列为SEQ?ID?NO:35的siRNA?4、正义链序列为SEQ?ID?NO:36且反义链序列为SEQ?ID?NO:37的siRNA?9、正义链序列为SEQ?ID?NO:38且反义链序列为SEQ?ID?NO:39的siRNA?17、正义链序列为SEQ?ID?NO:40且反义链序列为SEQ?ID?NO:41的siRNA?22、正义链序列为SEQ?ID?NO:42且反义链序列为SEQ?ID?NO:43的siRNA?26、正义链序列为SEQ?ID?NO:44且反义链序列为SEQ?ID?NO:45的siRNA?35、正义链序列为SEQ?ID?NO:46且反义链序列为SEQ?ID?NO:47的siRNA?36、正义链序列为SEQ?ID?NO:48且反义链序列为SEQ?ID?NO:49的siRNA?37、正义链序列为SEQ?ID?NO:50且反义链序列为SEQ?ID?NO:51的siRNA?38、正义链序列为SEQ?ID?NO:52且反义链序列为SEQ?ID?NO:53的siRNA?40和正义链序列为SEQ?ID?NO:54且反义链序列为SEQ?ID?NO:55的siRNA?45中的至少一种。...

【技术特征摘要】
1.一种核酸,该核酸含有正义链序列为SEQ ID NO:1且反义链序列为SEQ ID NO:2的siRNA-8、正义链序列为SEQ ID NO:3且反义链序列为SEQ ID NO:4的siRNA_23、正义链序列为SEQ ID NO:5且反义链序列为SEQ ID NO:6的siRNA_27、正义链序列为SEQ ID NO:7且反义链序列为SEQ ID NO:8的siRNA_30、正义链序列为SEQ ID NO:9且反义链序列为SEQ ID NO:10的siRNA-32、正义链序列为SEQ ID NO: 11且反义链序列为SEQ ID N0:12的siRNA-34、正义链序列为SEQ ID NO:34且反义链序列为SEQ ID NO:35的siRNA_4、正义链序列为SEQ ID NO:36且反义链序列为SEQ ID NO:37的siRNA_9、正义链序列为SEQ ID NO:38且反义链序列为SEQ ID NO:39的siRNA-17、正义链序列为SEQ ID N0:40且反义链序列为SEQ ID NO:41的siRNA-22、正义链序列为SEQ ID NO:42且反义链序列为SEQ ID NO:43的siRNA-26、正义链序列为SEQ ID NO:44且反义链序列为SEQ ID NO:45的siRNA-35、正义链序列为SEQ ID NO:46且反义链序列为SEQ ID NO:47的siRNA_36、正义链序列为SEQID NO:48且反义链序列为SEQ ID NO:49的siRNA_37、正义链序列为SEQ ID NO:50且反义链序列为SEQ ID NO:51的siRNA_38、正义链序列为SEQ ID NO:52且反义链序列为SEQID NO:53的siRNA-40和正义链序列为SEQ ID NO:54且反义链序列为SEQ ID NO:55的siRNA-45中的至少一种。2.根据权利要求1所述的核酸,其中,该核酸为所述siRNA-8、所述siRNA-23、所述siRNA-27、所述 siRNA-30、所述 siRNA-32 或所述 siRNA-34 ;优选为所述 siRNA-23、所述siRNA-27 或所述 siRNA-30。3.根据权利要求1或2所述的核酸,其中,所述核酸含有至少一个修饰的核苷酸基团。4.根据权利要求3所述的核酸,其中,所述修饰的核苷酸基团为磷酸基团、核糖基团和碱基中的至少一种被修饰的核苷酸基团。5.根据权利要求4所述的核酸,其中,所述核糖基团被修饰的核苷酸基团为核糖基团的2’ -OH被甲氧基或氟取代的核苷酸基团。6.根据权利要 求5所述的核酸,其中,该核酸含有正义链序列为SEQIDNO:78且反义链序列为SEQ ID NO:79的siRNA(m)-8、正义链序列为SEQID NO:80且反义链序列为SEQID NO:81的siRNA(m)-23、正义链序列为SEQ ID NO:82且反义链序列为SEQ ID NO:83的siRNA (m)-27、正义链序列为 SEQ ID NO:84且反义链序列为 SEQ ID NO:85 的 siRNA (m)-30、正义链序列为SE...

【专利技术属性】
技术研发人员:梁子才李德毓周春雷王茜
申请(专利权)人:昆山市工业技术研究院小核酸生物技术研究所有限责任公司
类型:发明
国别省市:

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