微小核苷酸hsa-miR-1909及其应用，序列如SEQIDNo.1所示。本发明专利技术提供的微小核苷酸hsa-miR-1909可做为核酸类透明质酸酶活性抑制剂。这种含有效成分微小核苷酸hsa-miR-1909的透明质酸抑制剂，可人工合成，纯度高、得率高、成本低。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微小核苷酸
，尤其涉及一类抑制透明质酸酶活性的miRNA :hsa-miR-1909 及其应用。
技术介绍
微小RNA (microRNAs ；miRNA,又称小分子RNA)是真核生物中广泛存在的一种长约16到26个核苷酸的RNA分子，可调节其他基因的表达。miRNA从一些DNA转录而来，但无法进一步转译成蛋白质的RNA (属于非编码RNA)。这些RNA是从初级转录本(primarytranscript),也就是pr1-miRNA,转变成为称为pre_miRNA的莖环结构,最后成为具有功能的成熟miRNA。pr1-miRNA长度大约为300 1000个碱基，pr1-miRNA经过一次加工后，成为pre-miRNA即microRNA前体,长度大约为70 90个喊基；pre_miRNA再经过Dicer酶酶切后，成为长约16 26nt的成熟miRNA。其特点有(I)位于基因组非编码区；(2)进化上高度保守；(3)可在转录后水平对基因表达进行调节；(4)参与多种生命过程，调控多达30%的蛋白的表达。成熟miRNA通过RNA诱导的沉默复合体(RISC)与靶信使核糖核酸(mRNA)特异结合，从而抑制转录后基因表达，在调控基因表达、细胞周期、生物体发育时序等方面起重要作用。尤其微小RNA从5’端起第2-8位的核苷酸在相同微小RNA家族中高度保守，被称为种子序列(seed sequence),其在转录后水平抑制祀信使核糖核酸(mRNA)翻译过程中起至关重要作用。透明质酸(Hyaluronan、hyaluronic acid,又称糖醒酸、玻尿酸、琉璃糖碳基酸)，其基本结构是由双糖单位D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的高级多醣类。与其它粘多糖不同，它不含硫。透明质酸为组织基质中具有限制水分及其它细胞外物质扩散作用的成分，它的透明质分子能携带500倍以上的水分，为目前所公认的最佳保湿成分，目前广泛的应用在保养品和化妆品中。作为一种多功能基质，透明质酸广泛分布于人体各部位，其中皮肤也含有大量的透明质酸。人类皮肤成熟和老化过程也随着透明质酸的含量和新陈代谢而变化，它可以改善皮肤营养代谢，使皮肤柔嫩、光滑、去皱、增加弹性、防止衰老，在保湿的同时又是良好的透皮吸收促进剂。而透明质酸酶(Hyaluronidase, HYAL)作为一种能水解透明质酸的酶，在生物体皮肤、口腔和关节中的透明质酸酶会随着机体的衰老或处于病态而分泌增加，随之引起透明质酸的减少，出现皮肤粗糙干燥、弹性下降、皱褶增加等衰老症状，所以通过抑制作为透明质酸水解酶的表达，可有助于维持机体内透明质酸酶的含量。另外，透明质酸酶也是I型过敏反应(如荨麻疹、特意反应性皮炎等)和肿瘤细胞增殖迁移的参与者，因此，抑制透明质酸酶的活性，既能使透明质酸不被分解以维持其正常生理功能，又能达到抗炎抗过敏的功效。目前，已经报道的透明质酸酶抑制剂按其化学组成可分为蛋白质类、多糖类、生物碱和萜类等，而且大批量制备所需成本较高。迄今，没有核酸类制剂对于透明质酸酶活性的抑制作用的报道，最接近的现有技术方案为从植物中提取分离纯化I，2，3，4，6-五-O-没食子酰基-β -D-葡萄糖(PGG)对透明质酸酶活性的抑制剂，但是其分离纯化过程繁琐，得率低。
技术实现思路
解决的技术问题本专利技术提供一种微小核苷酸hsa-miR-1909及其做为核酸类透明质酸酶活性抑制剂的应用。这种含有效成分微小核苷酸hsa-miR-1909的透明质酸抑制齐U，可人工合成，纯度高、得率高、成本低。技术方案微小核苷酸hsa-miR-1909，序列如SEQ ID No.1所示。序列如SEQ ID No.1所示的微小核苷酸hsa-miR-1909在抑制透明质酸酶活性的应用。序列如SEQ ID No.1所示的微小核苷酸hsa-miR-1909在制备抑制透明质酸酶活性药物上的应用。有益效果 1)本专利技术是人工合成人体中特异性的微小核苷酸，简单易行； 2)本专利技术水解溶液为DEPC水，可低温保存，无其他有机溶剂残留，安全无污染；` 3)本专利技术提供了微小核苷酸hsa-miR-1909作为透明质酸酶抑制剂的应用。附图说明图1为用生物信息学软件RNAhybrid计算得出的上述hsa-miR-1909与所述透明质酸酶(HYALl)的mRNA3’ -非编码区(3’ -UTR)相互作用从而产生转录后抑制作用机制关系; 图2为载体图谱pMIR-REP0RT miRNA表达报告基因载体； 图3为过表达hsa-miR-1909与过表达ncRNA对荧光素酶活性的抑制效果 图4为hsa-miR-1909抑制HYALl的蛋白印记(western blotting)结果图。具体实施例方式本专利技术是一种透明质酸酶抑制剂，该透明质酸酶抑制剂中含有微小核苷酸hsa-miR-1909。此处，所述“hsa-miR-1909”是指下面的22个碱基的核酸序列CGCAGGGGCCGG⑶GCUCACCG。以下，通过实施例进一步详细说明本专利技术，但本专利技术并不限于这些实施例。实施例1 : 对所述hsa-miR-1909进行物种间序列保守性对比发现人源hsa-miR-1909序列与猩猩ppy-miR-1909,人源hsa-miR-6722_3p,水稻osa_miR5836高度相似,序列比对结果如表1.表I本文档来自技高网...
【技术保护点】
微小核苷酸hsa?miR?1909，其特征在于序列如SEQ?ID?No.1所示。
【技术特征摘要】
1.微小核苷酸hsa-miR-1909，其特征在于序列如SEQID No.1所示。2.序列如SEQID No.1所示的微小核苷酸hsa-miR-...
【专利技术属性】
技术研发人员：李冬海，杨浩，张辰宇，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。