【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及发酵豆柏中乳酸含量的测定方法。
技术介绍
目前，豆柏多用乳酸菌进行发酵，因而发酵豆柏中含有大量的乳酸，同时含有少量的丙酸、丁酸等。常用的乳酸的测定方法主要有两种中和滴定法和高效液相色谱法。研究发现，中和滴定法所测结果误差较大，滴定的结果反映的是总酸的含量，不准确；高效液相法虽然可以定性和定量，但是发·酵豆柏成分复杂，含有蛋白质、寡糖、小肽、有机酸、异黄酮等，导致利用高效液相测定乳酸时，杂峰干扰大、主峰分离效果不够理想，发酵豆柏中乳酸含量难以精确测定。目前尚未有报道发酵豆柏中乳酸含量的测定方法。
技术实现思路
为了解决上述的技术问题，本专利技术的目的是提供一种发酵豆柏中乳酸的测定方法，该方法通过特定方式对样品进行预处理、采用合适的流动相避免杂质干扰，将发酵豆柏中乳酸含量精确测量出来。为了实现上述的目的，本专利技术采用了以下的技术方案 一种发酵豆柏中乳酸的测定方法，其特征在于该方法包括以下的步骤 O样品预处理 准确称取粉碎过筛的发酵豆柏5. 0000 g，置于100 mL容量瓶中，加入80%体积百分比浓度的乙醇溶液定容至100ml，超声波50°C提取30 min，冷却至室温，样品液用高速冷冻离心机离心，转速12000rpm，4°C离心lOmin，上清液过O. 45um滤膜，滤液作为试样溶液备用； 2)色谱条件 色谱仪=AgilentllOO高效液相色谱仪，UV213nm检测器； 色谱柱Walts sunf ire C18,4.6X250 nm, 5 μ m ； 柱温35°C ； 流动相甲醇O. 01%体积百分比浓度的盐酸溶液=5:...
【技术保护点】
一种发酵豆粕中乳酸的测定方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：1）?样品预处理准确称取粉碎过筛的发酵豆粕5.0000?g，置于100?mL容量瓶中，加入80%体积百分比浓度的乙醇溶液定容至100ml，超声波50℃提取30?min，冷却至室温，样品液用高速冷冻离心机离心，转速12000rpm，4℃离心10min，上清液过0.45um滤膜，滤液作为试样溶液备用；2）色谱条件色谱仪：Agilent1100高效液相色谱仪，UV213nm检测器；色谱柱：Walts?sunfire?C18，4.6×250?nm，5?μm；柱温：35℃；流动相：甲醇:?0.01%体积百分比浓度的盐酸溶液=5:95，比例为体积比；流速：1.0?mL/min；进样量：20?μL；3）校准曲线的制备分别取乳酸标准液5ul、10ul、15ul、20ul、25ul，相当于各乳酸含量25ug、50ug、75ug、100ug、125ug注入液相色谱仪，进行高效液相色谱分析，测定色谱峰面积或峰高，以标准乳酸质量对相应的峰面积或峰高作标准曲线，或用最小二乘法求回归方程；4）?样品测定在相同的色谱分析条件下，取20ul步骤1）制备的试...
【技术特征摘要】
1.一种发酵豆柏中乳酸的测定方法，其特征在于该方法包括以下的步骤 1)样品预处理 准确称取粉碎过筛的发酵豆柏5. OOOO g，置于100 mL容量瓶中，加入80%体积百分比浓度的乙醇溶液定容至100ml，超声波50°C提取30 min，冷却至室温，样品液用高速冷冻离心机离心，转速12000rpm，4°C离心lOmin，上清液过O. 45um滤膜，滤液作为试样溶液备用； 2)色谱条件 色谱仪=AgilentllOO高效液相色谱仪，UV213nm检测器；色谱柱Walts sunf ire C18,4. 6 X 250 nm, 5 μ m ； 柱温35°C ； 流动相甲醇O. 01%体积百分比浓...
【专利技术属性】
技术研发人员：钟学敏，罗富源，张健，龚音，
申请(专利权)人：浙江德清博诚生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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