一种植物样品中内源性细胞分裂素的定量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种植物样品中内源性细胞分裂素的定量检测方法。该方法先以乙腈提取细胞分裂素，再以硅胶固相萃取小柱富集除杂后，吹干、定容，采用高效液相色谱-电喷雾-串联质谱分析，进而实现内源性细胞分裂素的定量检测。该方法操作简单快速，样品用量少，使用溶剂种类少，有效除去了大部分植物基质，回收率较高，可实现低含量的内源性细胞分裂素的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于分析化学领域。
技术介绍
细胞分裂素(cytokinins，CKs)是一类腺嘌呤衍生物，根据N_7位上的取代基的不同分为异戊烯基腺嘌呤和芳香基腺嘌呤。在植物体内，细胞分裂素以自由碱，细胞分裂素核苷、核苷酸和细胞分裂素糖苷形式存在，现已被发现的细胞分裂素有四十多种。细胞分裂素在植物体整个生命中起着重要的调节作用，包括细胞的分裂与分化，根、芽的形成与生长、损伤后的再生，消除顶端优势等。近年来，关于细胞分裂素的生理学机能，例如CKs的生物合成、降解、代谢路径以及与其他激素之间的相互作用的研究收到广泛关注。但由于植物的提取液中基质复杂且细胞分裂素的含量低，这些研究的开展受到一定限制。因此，建立高效的样品前处理方法并结合高灵敏度的检测方法是CKs检测的关键。目前，已报道的植物中细胞分裂素的前处理方法包括液液萃取、固相萃取、磁固相萃取和液相色谱纯化方法等。较其他方法相比，固相萃取因具有操作简便，可选商品化的填料种类多而被广泛使用。但是，这些方法一般是多步或多层不同性质(反相型、离子交换型和混合模式型)的填料的组合，操作过程繁琐，且细胞分裂素在实际样品中的回收率低，消耗的植物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植物样品中内源性细胞分裂素的定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1）提取内源性细胞分裂素：准确称量植物样品后用液氮冷冻，研磨至粉末状，加入同位素内标[2H6]异戊烯基腺嘌呤，[2H6]异戊烯基腺嘌呤核苷，[2H6]异戊烯基腺嘌呤9?糖苷，[2H5]反式玉米素，[2H5]反式玉米素核苷，[2H5]反式玉米素9?糖苷，[2H3]二氢玉米素，[2H3]二氢玉米素核苷，然后加入乙腈，?20℃以下放置12小时以上；2）除固体：将步骤1）所得样品离心，取上清液；3）固相萃取除杂：将步骤2）所得的上清液通过事先用平衡液平衡后的固相萃取小柱，清洗后收集解吸液，除去收集到的解吸液中的溶剂；4）定容检测：...

【技术特征摘要】
1.一种植物样品中内源性细胞分裂素的定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤 1)提取内源性细胞分裂素准确称量植物样品后用液氮冷冻，研磨至粉末状，加入同位素内标[2H6]异戊烯基腺嘌呤，[2H6]异戊烯基腺嘌呤核苷，[2H6]异戊烯基腺嘌呤9-糖苷，[2H5]反式玉米素，[2H5]反式玉米素核苷，[2H5]反式玉米素9-糖苷，[2H3] 二氢玉米素，[2H3]二氢玉米素核苷，然后加入乙腈，_20°C以下放置12小时以上； 2)除固体将步骤I)所得样品离心，...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯钰锜，蔡保东，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：