一种测定植物源性食品中咪鲜胺或其代谢产物的方法技术

本发明专利技术提供了一种测定植物源性食品中咪鲜胺或其代谢产物的方法，包括以下步骤：a、取植物源性食品，加入有机溶剂、氯化钠，混匀，离心，静置分层，取上清液；b、a步骤上清液中，加入无水硫酸钠，混匀，静置，取上清液；c、将步骤b上清液，浓缩、定容，加入无水硫酸钠、N-丙基乙二胺和十八烷基硅烷键合硅胶，混匀，离心，取上清液作为待检样品；d、采用GC-MS/MS或GC-MS检测，即可。本发明专利技术采用特定的检测条件，具有良好的线性响应，能够准确、快速、方便地测定咪鲜胺或其代谢产物残留；同时，还具有简便、快速、选择性好、灵敏度高、抗基质干扰能力强的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
咪鲜胺是一种咪唑类广谱杀菌剂，能够防治白粉菌、炭疽菌等病害，具有防腐、保 鲜作用，被广泛用于香蕉、柑橘等水果以及谷类、油料作物、观赏植物、蔬菜的采后贮存、运 输过程中的防腐保鲜和防治贮藏期病害。咪鲜胺的最终代谢产物为2, 4, 6-三氯苯酚，其毒 性高，生物降解性差，容易造成严重的环境污染，并被疑为强致癌物质。联合国粮农组织/ 世界卫生组织（FA0/WH0)食品法典委员会（CCPR)规定咪鲜胺在作物上的最高残留限量包 括咪鲜胺及其代谢物残留量的总和。因此，需要检测和控制咪鲜胺及其代谢产物在水果、作 物、蔬菜等中的残留量。 目前，国内外对咪鲜胺残留量的检测方法，主要集中在气相色谱法、液相色谱法、 气相色谱-质谱法（GC-MS)和液相色谱-质谱法（LC-MS)等，气相色谱法一般是在高温条件 下，将咪鲜胺转化为2, 4, 6-三氯苯酚，再通过测定2, 4, 6-三氯苯酚来间接分析咪鲜胺残留 量。采用高效液相色谱（HPLC)，只可检测咪鲜胺的残留量，不能检测其代谢产物2, 4, 6-三 氯苯酚的残留量，且其灵敏度相对气相色谱法低，例如，袁小雅等（固相萃取-高效液相色 谱-串联质谱法测定香蕉中咪鲜胺2, 4, 6-三氯苯酚残留量.袁小雅，潘永贵，王美玲，戴 华.理化检验-化学分册，2014年第50卷）采用固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测 定香蕉样品，就只检测到咪鲜胺的残留量，而未能检测到2, 4, 6-三氯苯酚。张世瑞等（两 种热带水果中咪鲜胺残留的气质联用测定.张世瑞，袁宏球，尹桂豪.现代农药，2010年8 月，第9卷，第4期）采用气质联用检测水果中咪鲜胺残留，没有同时对2, 4, 6-三氯苯酚进 行检测，且其样品前处理的步骤复杂。 因此，需要专利技术一种简便快速、选择性好、灵敏度高的测定咪鲜胺或其代谢产物的 方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，该 方法具有简便、快速、选择性好、灵敏度高、抗基质干扰能力强的优点，在0. 01?lmg/kg范 围内具有良好的线性响应。 本专利技术提供了，它包括以下 步骤： a、取均质后的植物源性食品，加入有机溶剂、氯化钠，混匀，离心，静置分层，取上 清液，残渣按上述步骤重复提取，合并上清液； 所述的样品、有机溶剂、氯化钠的重量体积比为（0.8?1.2) :(0.8?1.2): (0. 2?0. 3) (m:v:m);优选地，所述的样品、有机溶剂、氯化钠的重量体积比为1 :1 : 0.3(m:V:m);所述有机溶剂为乙腈、丙酮、二氯甲烷或乙酸乙酯； b、a步骤上清液中，加入无水硫酸钠，无水硫酸钠的用量为样品的1/2,混匀，静 置，取上清液； c、将步骤b上清液，浓缩、定容，加入无水硫酸钠、N-丙基乙二胺和十八烷基硅烷 键合硅胶，混匀，离心，取上清液作为待检样品； 所述的样品、无水硫酸钠、N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶的质量比为 1:0. 005 : (0 ?0. 015) : (0 ?0. 015); d、采用GC-MS/MS或GC-MS检测植物源性食品中的咪鲜胺或其代谢产物残留。 其中，所述咪鲜胺或其代谢产物为咪鲜胺、N-丙基_2-(2, 4, 6-三氯苯氧基）乙胺、 2, 4, 6-三氯苯酚中的任意一种或多种。 其中，步骤a中，所述植物源性食品包括水果、蔬菜、食用菌、粮食及豆类、油籽油 料类、坚果、籽仁类、茶叶、可可咖啡原料类、植物源性调料、植物源性中药材。 其中，步骤C中，所述的样品、无水硫酸钠、N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶 的质量比为 1:0. 005 :0. 01 :0. 01。 其中，步骤a和c中，离心的转速为4000r/min。 其中，d步骤所述的GC-MS/MS的检测条件为： 气相色谱（GC)条件： 色谱柱：TR_PESTICIDE ; 进样方式：程序升温不分流进样； 程序升温气化进样口：起始温度60°C，以8°C /min升至280°C ; 载气：他，99.999%，流速：1.3111171^11; 色谱柱采用程序升温：初始温度60°C，保持2min，以30°C /min升至160°C，以5°C / min 升至 300°C，再以 20°C /min 升至 310°C，保持 I. 5min ; 柱流量 I. 3mL/min ; 进样量：1 μ L ; 串联质谱（MS/MS)条件： 离子源温度：240°C ; 电离模式：电子轰击电离； 质谱传输线温度：280°C ; 溶剂延迟时间：4. 5min ; 碰撞气压力：氦气，I. 5HiTorr ; 分析模式：定时选择性反应监测模式。 其中，所述的色谱柱的规格为30mX0. 25mmX0. 25μπι。 其中，检测咪鲜胺的气相色谱-串联质谱联用检测条件为： 保留时间为7. 09min ;检测离子对：308 - 70, 310 - 70 ;碰撞能量为10V，IOV ;或 检测2, 4, 6-三氯苯酚的气相色谱-串联质谱联用检测条件为： 保留时间为26. 81min ;检测离子对：132 - 97,196 - 132 ;碰撞能量为10V，15V。 其中，所述方法采用峰面积内标法定量，以环氧七氯作为内标物。 其中，d步骤所述的GC-MS检测条件为： 气相色谱（GC)条件为： 色谱柱：HP-5MS(30mX0. 25mmX0. 25μπι);进样方式：不分流进样，进样口温度： 28〇1：;载气：他，99.999%，柱流量1.〇111171^11;柱温采用程序升温 ：初始温度6〇1：，保持 Imin,以 10°C /min 升至 150°C，保持 Imin,再以 20°C /min 升至 300°C，保持 5min ;进样量： lyL； 质谱（MS)条件为： 离子源温度：250°C ;电离模式：电子轰击电离（EI);质谱传输线温度280°C ;溶 剂延迟时间4. 5min ;碰撞气压力：氦气，I. 5mTorr ;分析模式：定时选择性反应监测模式 (timed-SRM)； 定量方法：内标法，以环氧七氯作为内标物，或外标法定量。 本专利技术测定植物源性食品中咪鲜胺或其代谢产物的方法，具有下述有益效果： (1)本专利技术制备待检样品时，采用乙腈、丙酮、二氯甲烷或乙酸乙酯等有机溶剂作 为提取植物源性食品中咪鲜胺或其代谢产物的溶剂，特别是采用乙腈作为溶剂时，加标回 收试验的回收率高； 选择加入合适的吸附剂（N-丙基乙二胺和十八烷基硅烷键合硅胶）以及适当的用 量，加标回收试验的回收率高； (2)本专利技术，采用特定的气相色谱条件以及串联质谱条件，能够同时准确、快速、方 便地测定待检样品中的咪鲜胺及其代谢产物； (3)本专利技术方法，在0.01?lmg/kg范围内具有良好的线性响应，且在0.01mg/kg、 0. 02mg/kg和0. lmg/kg三种添加水平下的加标回收试验均具有较高的回收率； (4)本专利技术同时研究采用了内标法和外标法对待测物质进行准确的定性定量分 析；内标法以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定植物源性食品中咪鲜胺或其代谢产物的方法，其特征在于：它包括以下步骤：a、取均质后的植物源性食品，加入有机溶剂、氯化钠，混匀，离心，静置分层，取上清液，残渣按上述步骤重复提取，合并上清液；所述的样品、有机溶剂、氯化钠的重量体积比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.2～0.3)(m:v:m)；优选地，所述的样品、有机溶剂、氯化钠的重量体积比为1：1：0.3(m:v:m)；所述有机溶剂为乙腈、丙酮、二氯甲烷或乙酸乙酯；b、a步骤上清液中，加入无水硫酸钠，无水硫酸钠的用量为样品的1/2，混匀，静置，取上清液；c、将步骤b上清液，浓缩、定容，加入无水硫酸钠、N‑丙基乙二胺和十八烷基硅烷键合硅胶，混匀，离心，取上清液作为待检样品；所述的样品、无水硫酸钠、N‑丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶的质量比为1:0.005：(0～0.015)：(0～0.015)；d、采用GC‑MS/MS或GC‑MS检测植物源性食品中的咪鲜胺或其代谢产物残留。

【技术特征摘要】
1. 一种测定植物源性食品中咪鲜胺或其代谢产物的方法，其特征在于：它包括以下步 骤： a、 取均质后的植物源性食品，加入有机溶剂、氯化钠，混匀，离心，静置分层，取上清液， 残渣按上述步骤重复提取，合并上清液； 所述的样品、有机溶剂、氯化钠的重量体积比为（0.8?1.2) :(0.8?1.2) :(0.2? 0. 3) (m:v:m);优选地，所述的样品、有机溶剂、氯化钠的重量体积比为1 :1 :0. 3(m:v:m);所 述有机溶剂为乙腈、丙酮、二氯甲烷或乙酸乙酯； b、 a步骤上清液中，加入无水硫酸钠，无水硫酸钠的用量为样品的1/2,混匀，静置，取 上清液； c、 将步骤b上清液，浓缩、定容，加入无水硫酸钠、N-丙基乙二胺和十八烷基硅烷键合 娃胶，混匀，离心，取上清液作为待检样品； 所述的样品、无水硫酸钠、N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶的质量比为 1:0. 005 : (0 ?0? 015) : (0 ?0? 015); d、 采用GC-MS/MS或GC-MS检测植物源性食品中的咪鲜胺或其代谢产物残留。2. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述咪鲜胺或其代谢产物为咪鲜胺、 N-丙基-2-(2, 4, 6-三氯苯氧基）乙胺、2, 4, 6-三氯苯酚中的任意一种或多种。3. 根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：步骤a中，所述植物源性食品包 括水果、蔬菜、食用菌、粮食及豆类、油籽油料类、坚果、籽仁类、茶叶、可可咖啡原料类、植物 源性调料、植物源性中药材。4. 根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：步骤c中，所述的样品、无水硫 酸钠、N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶的质量比为1:0.005 :0.01 :0. 01。5. 根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：步骤a和c中，离心的转速为 4000r/min。6. 根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于： d步骤所述的GC-MS/MS的检测条件为： 气相色谱条件： 色谱柱：TR-PESTICIDE ; 进样方式：程序升温不分流进样； 程序升温气化进样口：起始温度60°C，以8°C /min升至280°C ; 载气：他，99.99...

【专利技术属性】
技术研发人员：李蓉，卢俊文，杨芳，张朋杰，储大可，黄思允，陈丽斯，
申请(专利权)人：中山出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：广东;44