一种溯源松茸产地的化学分析方法技术

本发明专利技术公开了一种溯源松茸产地的化学分析方法，包括以下步骤：(1)样品前处理、(2)固相萃取吸附、(3)气质联用仪分析、(4)检测结果进行统计分析，根据挥发性组分特征溯源松茸产地。本发明专利技术利用顶空固相微萃取结合气相色谱‑质谱联用技术定性定量分析松茸特征性挥发性成分，通过挥发性成分统计分析，能够快速、准确、有效的溯源松茸产地，该方法能够满足目前市场对于松茸产地溯源的实际需求。

A Chemical Analysis Method for Tracing the Origin of Tricholoma matsutake

【技术实现步骤摘要】
一种溯源松茸产地的化学分析方法
本专利技术涉及一种溯源松茸产地的化学分析方法，特别是一种利用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术定性定量分析不同产地松茸特征性挥发性成分的分析方法，属于食品化学分析

技术介绍
松茸(TricholomamatsutakeSing)为担子菌亚门伞菌目口蘑科真菌，素有“绿色黄金”之美誉，在我国主要产于西藏、贵州、云南、四川和东北等海拔较高的林区，是全球化的天然滋补品。松茸目前尚未实现完全人工栽培，是珍稀的天然野生食药两用菌，其含有丰富的营养成分，具有抗氧化、抗肿瘤、增强免疫力等药用功能。松茸由于产量较低、价格昂贵、不宜运输等原因受到消费者广泛关注。不同产地的松茸品质和价格有较大差异，价格相差几倍，其中尤以西藏高原野生松茸品质最佳。新鲜松茸，形若伞状，色泽鲜明，菌盖呈褐色，菌柄为白色，均有纤维状茸毛鳞片，菌肉白嫩肥厚，质地细密，有浓郁的特殊香气。现今常有关于不法商贩用其他产地松茸冒充西藏产松茸的报道，目前未见有松茸产地溯源的研究报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种利用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术溯源松茸产地的化学分析方法，旨在填补现有鉴别松茸产地溯源技术的空白。本专利技术为了实现上述目的，采用以下技术方案：一种溯源松茸产地的化学分析方法，其特征在于包括以下步骤：(1)样品前处理：称取样品于顶空萃取管中；(2)固相萃取吸附：用50/30μmDVB/CAR/PDMS固相萃取头在65℃条件下顶空静态吸附样品50min；(3)气质联用仪分析；(4)检测结果进行统计分析，根据挥发性组分特征溯源松茸产地。本专利技术中的松茸样品为烘干或冻干松茸时，称取2.00g于20mL顶空萃取管中，所述的松茸样品为鲜松茸或冰鲜松茸称样量为5.00g于20mL顶空萃取管中。本专利技术中的烘干或冻干的松茸样品水分含量优选为8-15％。本专利技术样品挑选无霉变、无病虫害的松茸样品50g，磨碎混合，称取2.00g烘干或冻干松茸(鲜松茸或冰鲜松茸称样量为5.00g)(精确至0.01g)于20mL顶空萃取管中。本专利技术中的松茸样品在气质联用仪的气相色谱进样口于300℃解析2min，用于气质联用仪分析检测，色谱图见图1。本专利技术中气质联用仪的参数为：色谱：色谱柱：TR-PESTICIDE30m×0.25mm×0.25μm；进样方式：SSL，分流进样，分流比：10:1；分流流量：12mL/min，流速1.2mL/min，进样体积1μL；进样口温度：300℃；升温程序：初始温度40℃，保持2min，以7℃/min升到70℃，保持1min，以3℃/min升到120℃，保持2min，以10℃/min升到300℃，保持5min；质谱：电子轰击离子源；电离电压：70eV；离子源温度：280℃，传输线温度：280℃；扫描模式：全扫描(ScanMasses)模式，扫描范围：33-350m/z。本专利技术检测结果通过主成分分析、聚类分析和相似度分析确定松茸产地。本专利技术中数据的具体处理方法为：根据NIST.11Library标准谱图库对松茸样品中各挥发性成分进行检索并数据对比，选择匹配度大于800(最大值为1000)的鉴定结果予以确认，采用面积归一法计算松茸样品中挥发性成分的相对含量(挥发性化合物的峰面积占总的挥发性风味物质的峰面积的百分比表示)。本专利技术中不同产地松茸样品挥发性组分的统计分析：对不同产地的松茸样品进行三平行检测，计算其特征组分的相对含量。使用SPSS软件对不同产地松茸样品的主要挥发性组分(共有组分和相对含量大于1.0％的组分)进行主成分分析(PCA)和聚类分析(ClusterAnalysis)。利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对不同产地松茸样品的主要挥发性组分进行聚类分析。溯源结果：不同产地松茸样品特征挥发性组分存在一定差异，其中冰鲜松茸和鲜松茸特征挥发性组分较相近，烘干松茸和冻干松茸特征挥发性组分较相近，但是冰鲜松茸和鲜松茸与烘干松茸和冻干松茸间特征挥发性组分差异明显。其中冰鲜松茸和鲜松茸共有的挥发性组分有己醛、1-辛烯-3-醇、3-辛酮、3-辛醇和顺式肉桂酸甲酯，烘干松茸和冻干松茸共有的挥发性组分有乙酸甲酯、2-甲基丁醛、戊酸甲酯、2,6-二甲基吡嗪、1-辛烯-3-醇、庚酸甲酯、辛酸甲酯和顺式肉桂酸甲酯，通过主成分分析和相似度分能够快速、准确、有效的溯源松茸产地。本专利技术与现有技术相比，有以下优点：本专利技术利用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术定性定量分析松茸特征性挥发性成分，通过挥发性成分统计分析，能够快速、准确、有效的溯源松茸产地，该方法能够满足目前市场对于松茸产地溯源的实际需求。【附图说明】图1松茸中挥发性成分色谱图；图2是31种松茸样品主成分分析空间分布图A；图3是31种松茸样品主成分分析空间分布图B；图4是聚类分析图；图5是25批不同产地干制松茸样品GC叠加图谱；图6是6批不同产地干制松茸样品GC叠加图谱。【具体实施方式】下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步详细说明：选取31种不同产地的松茸样品，其中S1-S4为四川产干制野生松茸样品，S5-S13为云南产干制野生松茸样品，S15-S20为西藏产干制野生松茸样品，S21-S25为东北长白山产干制野生松茸样品，S26-S27为西藏产冰鲜和鲜野生松茸样品，S28为云南产鲜野生松茸样品，S29-S30为四川产冰鲜和鲜野生松茸样品，S31为云南产冰鲜野生松茸样品，其中S18为未知产地的松茸样品，样品信息及分组信息见表1。表1：31种松茸样品产地及分组信息表1、样品前处理及顶空萃取条件：挑选31种不同产地的松茸样品各50g，磨碎混合，分别称取2.00g烘干或冻干松茸(鲜松茸或冰鲜松茸称样量为5.00g)(精确至0.01g)于20mL顶空萃取管中；用50/30μmDVB/CAR/PDMS固相萃取头在65℃条件下顶空静态吸附50min，然后在气质联用仪的气相色谱进样口于300℃解析2min，用于气质联用仪分析检测。2、本专利技术中气质联用仪的参数为：气相条件色谱柱：TR-PESTICIDE(30m×0.25mm×0.25μm)；进样方式：SSL，分流进样，分流比：10:1；分流流量：12mL/min，流速1.2mL/min，进样体积1μL；进样口温度：300℃；升温程序：初始温度40℃，保持2min，以7℃/min升到70℃，保持1min，以3℃/min升到120℃，保持2min，以10℃/min升到300℃，保持5min。质谱条件电子轰击离子源；电离电压：70eV；离子源温度：280℃，传输线温度：280℃；扫描模式：全扫描(ScanMasses)模式，扫描范围：33-350m/z。数据处理方法为：根据NIST.11Library标准谱图库对松茸样品中各挥发性成分进行检索并数据对比，选择匹配度大于800(最大值为1000)的鉴定结果予以确认，采用面积归一法计算松茸样品中挥发性成分的相对含量(挥发性化合物的峰面积占总的挥发性风味物质的峰面积的百分比表示)。本专利技术中不同产地松茸样品挥发性组分的统计分析：对31种不同产地的松茸样品进行三组平行检测，计算其特征组分的相对含量。使用SPSS软件对不同产地松茸样品的主本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种溯源松茸产地的化学分析方法，其特征在于包括以下步骤：(1)样品前处理：称取样品于顶空萃取管中；(2)固相萃取吸附：用50/30μm DVB/CAR/PDMS固相萃取头在65℃条件下顶空静态吸附样品50min；(3)气质联用仪分析；(4)检测结果进行统计分析。

【技术特征摘要】
1.一种溯源松茸产地的化学分析方法，其特征在于包括以下步骤：(1)样品前处理：称取样品于顶空萃取管中；(2)固相萃取吸附：用50/30μmDVB/CAR/PDMS固相萃取头在65℃条件下顶空静态吸附样品50min；(3)气质联用仪分析；(4)检测结果进行统计分析。2.根据权利要求1所述的一种溯源松茸产地的化学分析方法，其特征在于所述的松茸样品为烘干或冻干松茸时，称取2.00g于20mL顶空萃取管中，所述的松茸样品为鲜松茸或冰鲜松茸称样量为5.00g于20mL顶空萃取管中。3.根据权利要求2所述的一种溯源松茸产地的化学分析方法，其特征在于所述烘干或冻干的松茸样品水分含量为8-15％。4.根据权利要求1所述的一种溯源松茸产地的化学分析方法，其特征在于所述的松茸样品在气质联用仪的气相色谱进样口于300℃解析2min，用于气质联...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宪臣，邱德义，郑传发，张朋杰，
申请(专利权)人：中山出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：广东,44