一种基于还原氧化石墨烯-纳米金复合材料的金黄色葡萄球菌无标记电化学适配体传感器制造技术

基于还原氧化石墨烯-纳米金复合材料结合适配体检测金黄色葡萄球菌的方法，属于电化学领域。其基本原理是利用还原氧化石墨烯-纳米金复合材料，用层层自组装的方法修饰巯基化的金黄色葡萄球菌全菌捕获探针。当探针在金黄色葡萄球菌菌液中孵育，它的有效结合位点会与金黄色葡萄球菌结合，将其包裹在三维空间结构中，实现对目标菌的全菌“捕获”。由于结合目标菌后会阻碍电极表面的电子传输，使电化学阻抗值增大，我们利用阻值的变化实现对金黄色葡萄球菌的定量检测。石墨烯优异的电子传输能力和纳米金的大比表面积可以放大检测信号、缩短检测时间。本发明专利技术为金黄色葡萄球菌的全菌检测提供了一种新的方法，也为基于阻抗的电化学无标检测扩展了应用，同时兼具特异性强、灵敏度高、便宜、快速等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种基于还原氧化石墨烯-纳米金复合材料的金黄色葡萄 球菌无标记电化学适配体传感器
本专利技术主要利用适配体传感器对金黄色葡萄球菌进行电化学检测，属于电化学领 域。特点在于由还原氧化石墨烯-纳米金复合材料的引入扩大了检测信号，提升检测灵敏 度。同时在超灵敏电化学阻抗检测中无需引入标记物，使得检测时间更短，耗费也更少。同 时也为金黄色葡萄球菌全菌的检测提供一种新的方法。
技术介绍
金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性菌，隶属于葡萄球菌属，是葡萄球均属中最重要的 病原菌之一。金黄色葡萄球菌是一种强致病菌，侵袭人体后可引起化脓性感染，并且还可以 通过分泌肠毒素造成急性肠炎，表现为呕吐、腹泻等。由于金黄色葡萄球可在有氧或无氧的 环境中生长、高度耐盐、并且对温度(7 38. 5°C最适温度37°C )和PH(4. 2 9. 3最适PH 为7. 4)的要求很低，因此它能广泛存在于食品当中，造成严重的食品安全问题。另外金黄 色葡萄球菌也是人和动物化脓性感染最常见的病原菌，由于近年来抗生素的广泛使用，导 致耐药性菌株迅速增多，金黄色葡萄球菌也成为医院感染最常见的致病菌，因此金黄色葡 萄球菌也被列为仅次于大肠杆本文档来自技高网...

【技术保护点】
基于还原氧化石墨烯?纳米金复合材料的适配体传感器用于金黄色葡萄球菌的无标电化学检测，其特征在于；对裸玻碳电极抛光处理，将固定有巯基化的ssDNA的氧化石墨烯滴涂在电极表面，用电化学的方法将氧化石墨烯还原，然后在其表面电沉积一层纳米金，纳米金与DNA巯基端依靠Au?S键稳固结合。再用层层自组装的方法引入巯基化的金黄色葡萄球菌全菌捕获探针，通过Au?S键固定在纳米金表面，制成适配体传感器对金黄色葡萄球菌标准品进行检测，并建立标准曲线，以实现对含金黄色葡萄球菌样品的定量检测。

【技术特征摘要】
1.基于还原氧化石墨烯-纳米金复合材料的适配体传感器用于金黄色葡萄球菌的无标电化学检测，其特征在于；对裸玻碳电极抛光处理，将固定有巯基化的SSDNA的氧化石墨烯滴涂在电极表面，用电化学的方法将氧化石墨烯还原，然后在其表面电沉积一层纳米金， 纳米金与DNA巯基端依靠Au-S键稳固结合。再用层层自组装的方法引入巯基化的金黄色葡萄球菌全菌捕获探针，通过Au-S键固定在纳米金表面，制成适配体传感器对金黄色葡萄球菌标准品进行检测，并建立标准曲线，以实现对含金黄色葡萄球菌样品的定量检测。2.如权利要求1所述的基于还原氧化石墨烯-纳米金复合材料的适配体传感器的制备，其特征在于电极的修饰1)取10μL的ssDNA溶于ImL的lmg/mL氧化石墨烯中，超声30min,用移液枪吸取5 μ L 混合液滴涂在电极表面，置于37°C下自然晾干；2)在电化学工作站中，在O.lmol/L的KH2PO4溶液中用循环伏安的方法，将氧化石墨烯还原为还原氧化石墨烯。工...

【专利技术属性】
技术研发人员：王周平，贾飞，段诺，夏雨，马小媛，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：