一种复合纳米材料纸芯片电化学发光免疫传感器的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种复合纳米材料检测肿瘤标志物的纸芯片电化学发光免疫传感器的研究及应用的方法。纸芯片和传感器制备方法（示意图见附图）,主要包括以下步骤：在色谱纸上用蜡打印机打印设计的通道图案，用电子控温仪器对蜡印的色谱纸进行加热；制备出石墨烯-金属复合纳米材料和量子点-多孔硅纳米材料；将纳米材料修饰到纸芯片，将抗体接到纳米材料修饰的纸芯片上；与抗原特异识别后，发光材料标记的抗体与抗原特异识别，制作电化学发光免疫传感器；处理好的纸芯片需要与丝网印刷电极相结合检测电化学发光信号。本发明专利技术检测特异性强，灵敏度高，可以达到ng级；诊断监测速度快，完成一个基本检测过程所需时间较短；该传感器底端的胶片电极可以多次反复使用，成本低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及复合纳米材料技术、纸芯片技术和肿瘤标志物检测
，更具体地说是一种应用复合纳米材料借助于纸芯片来检测肿瘤标志物的电化学发光免疫传感器。
技术介绍
肿瘤是人类健康的杀手。恶性肿瘤也称癌症，是当前严重威胁人类健康和生命的一类疾病，它是机体受各种内在或外在致癌因素作用下，局部组织的细胞在基因水平上失掉了对其自身生长的正常调控，导致不正常增生而形成的新生物。肿瘤的发生是一个长期的、多阶段的、多基因改变累积过程，具有多因素调节和多基因控制的复杂性。肿瘤发病率和死亡率的上升趋势直接威胁着人类健康，它的早期诊断和治疗是肿瘤防治研究的重要前言领域之一。免疫分析法是利用抗体与抗原特异性结合而建立的高选择性生物化学方法。用免疫细胞化学方法来检测和定位肿瘤细胞所特有的肿瘤标记，已经越来越引起广大肿瘤病理学研究工作者的兴趣。现在有许多免疫组织化学方法可用于组织细胞的定性和定量分析以及成分检测。目前，主要的免疫分析方法有电化学免疫分析、化学发光免疫分析、流动注射化学发光免疫分析、高效液相色谱化学发光免疫分析、毛细管电泳化学发光免疫分析等，但是这些检测方法在某些方面还存在不足，因此急需一种新本文档来自技高网...

【技术保护点】
本专利技术用石墨烯?金属和量子点?多孔硅复合纳米材料纸芯片电化学发光免疫传感器的制造方法，其特征包括以下步骤：（1）在色谱纸上用蜡打印机打印设计的通道图案，用电子控温仪器对蜡印的色谱纸进行加热，目的是将蜡烤化并使其均匀的渗透到色谱纸的内部，从而在未印蜡的部位形成亲水通道；（2）选择临床发病率较高的肿瘤标志物进行测定；（3）利用纳米材料，制备出石墨烯?金属复合纳米材料；（4）制备出量子点?多孔硅复合纳米材料，并用于标记二抗；（5）将石墨烯?金属复合纳米材料修饰于处理后的纸芯片通道上，用以提高纸芯片的导电性，提高其灵敏度；（6）在步骤（5）之后修饰用于捕捉抗体的硫堇；（7）利用抗原?抗体特异性识别...

【技术特征摘要】
1.本发明用石墨烯-金属和量子点-多孔硅复合纳米材料纸芯片电化学发光免疫传感器的制造方法，其特征包括以下步骤 (1)在色谱纸上用蜡打印机打印设计的通道图案，用电子控温仪器对蜡印的色谱纸进行加热，目的是将蜡烤化并使其均匀的渗透到色谱纸的内部，从而在未印蜡的部位形成亲水通道； (2)选择临床发病率较高的肿瘤标志物进行测定； (3)利用纳米材料，制备出石墨烯-金属复合纳米材料； (4)制备出量子点-多孔硅复合纳米材料，并用于标记二抗； (5)将石墨烯-金属复合纳米材料修饰于处理后的纸芯片通道上，用以提高纸芯片的导电性，提高其灵敏度； (6)在步骤(5)之后修饰用于捕捉抗体的硫堇； (7)利用抗原-抗体特异性识别和组装表面修饰技术等，将量子点-多孔硅复合材料标记的二抗修饰到步骤(6)之后的纸芯片表面上，制作电化学发光传感器； (8)处理好的纸芯片需要与丝网印刷电极相结合检测电化学发光信号； (9 )丝网印刷电极在使用前需要用抛光粉打磨光滑，备用； 本发明所述使用石墨烯-金属复合纳米材料可以为石墨烯-Cu、石墨烯-Co，石墨烯-Pt，本发明所述使用量子点-多孔硅纳米材料可以为CdTe量子点-多孔硅纳米材料，具体实施步骤包括 (1)手动印刷本实验所用胶片电极，并用三氧化二铝抛光粉将电极打磨光滑，备用； (2)使用蜡打印机打印如图1-A所示图案，并使用电子...

【专利技术属性】
技术研发人员：于京华，刘芳，葛慎光，颜梅，葛磊，黄家栋，楚成超，李蒙，李龙，刘伟艳，王衍虎，张彦，王盼盼，李伟平，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：