用于胞内代谢物检测的传感器制造技术

技术编号:8493608 阅读:248 留言:0更新日期:2013-03-29 05:31
本发明专利技术涉及就其野生型而言进行了遗传修饰且包含编码自发荧光蛋白的基因序列的细胞,该自发荧光蛋白的表达依赖于特定代谢物的胞内浓度。本发明专利技术还涉及鉴定具有提高的特定代谢物的胞内浓度的细胞的方法、产生就其野生型而言进行了遗传修饰且具有特定代谢物的优化产生的细胞的方法、通过此方法获得的细胞、用于产生代谢物的方法和用于制备混合物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于胞内代谢物检测的传感器本专利技术涉及就其野生型而言进行了遗传修饰的细胞、用于鉴定具有提高的特定代谢物胞内浓度的细胞的方法、用于产生就其野生型而言进行了遗传修饰的具有特定代谢物的优化产生的细胞的方法、通过此方法获得的细胞、用于产生代谢物的方法和用于制备混合物的方法。微生物产生的代谢物具有巨大的经济利益。因此,将诸如L-赖氨酸、L-苏氨酸、L-甲硫氨酸和L-色氨酸的氨基酸用作食物添加剂,L-谷氨酸用作香料添加剂,L-异亮氨酸和L-酪氨酸用于制药工业,L-精氨酸和L-异亮氨酸用作药物,或L-谷氨酸、L-天冬氨酸和L-苯丙氨酸用作用于合成精细化学药品的起始物质。从工业观点看,相关代谢物的另一实例是酮戍二酸(oxoglutarate),其用作食品补充剂,或用作精氨酸α -酮戍二酸(alpha-ketoglutarate)的前体,精氨酸α _酮戍二酸促进生长激素和胰岛素的释放。 用于产生这类代谢物的优选方法是利用微生物的生物技术产生。尤其是在氨基酸的产生中,可以直接以此方式获得特定代谢物的生物活性和旋光活性形式,此外,还可以利用简单且便宜的原料。所利用的微生物是例如谷氨酸棒杆菌(Coryneb本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.05.03 DE 102010019059.41.细胞,就其野生型而言进行了遗传修饰且包含编码自发荧光蛋白的基因序列,其中所述自发荧光蛋白的表达依赖于特定代谢物的胞内浓度。2.权利要求1的细胞,其中作为所述特定代谢物的胞内浓度的函数在转录水平实现所述编码自发荧光蛋白的基因序列的表达控制。3.权利要求1或2的细胞,其中所述编码自发荧光蛋白的基因序列处于异源启动子的控制下,所述异源启动子在所述细胞的野生型中控制下述基因的表达,所述基因的表达在野生型细胞中的表达依赖于特定代谢物的胞内浓度。4.权利要求3的细胞,其中作为所述特定代谢物的胞内浓度的函数在翻译水平实现所述编码自发荧光蛋白的基因序列的表达控制。5.权利要求2或4的细胞,其中所述编码自发荧光蛋白的基因序列与DNA序列功能性 连接,所述DNA序列在mRNA水平承担在转录水平或翻译水平调节所述编码自发荧光蛋白的基因序列的表达的核糖开关的功能。6.前述权利要求中任一项的细胞,其中所述细胞是棒状杆菌属或埃希氏菌属细胞。7.前述权利要求中任一项的细胞,其中所述代谢物选自氨基酸、核苷酸、脂肪酸和糖类。8.权利要求7的细胞,其中所述代谢物是氨基酸。9.权利要求8的细胞,其中所述氨基酸是L-赖氨酸。10.权利要求2和6至9中任一项的细胞,其中所述启动子是IysE启动子,所述基因是IysE基因。11.前述权利要求中任一项的细胞,其中所述自发荧光蛋白是绿色荧光蛋白(GFP)或此蛋白质的变体。12.用于在细胞悬液中鉴定具有提高的特定代谢物的胞内浓度的细胞的方法,其包括方法步骤 i)提供包含权利要求1至11中任一项的细胞的细胞悬液; ii)遗传修饰所述细胞来获得细胞悬液,其中细胞就特定代谢物的胞内浓度而言不同; iii)通过检测胞内荧光活性来鉴定所述细胞悬液中具有提高的此特定代谢物的胞内浓度的单个细胞。13.权利...

【专利技术属性】
技术研发人员:L·埃格林M·博特S·宾德J·弗兰兹克N·穆斯塔菲
申请(专利权)人:于利奇研究中心有限公司
类型:
国别省市:

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