一种检测生物体内邻苯二甲酸二丁酯相对含量的方法技术

本发明专利技术提供了一种检测生物体内组织邻苯二甲酸二丁酯（DBP）相对含量的方法。利用DBP人工抗原免疫小鼠而制得DBP单克隆抗体，用DBP单克隆抗体与生物组织样品中的DBP结合，再通过荧光二抗标示DBP的分布。本发明专利技术还可以通过图像分析软件分析荧光强度，从而计算DBP的含量。本发明专利技术对DBP的含量和分布可以进行可视化分析，灵敏度高，方便快捷，稳定性好，成本低廉。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于生物技术 领域。
技术介绍
近年来在许多国家和地区，塑化剂对食品、环境的污染引起了人们强烈的担忧。邻 苯二甲酸二丁酯(DBP)属于苯二甲酸酯类化合物，被普遍应用于塑料制品、胶水、油漆、指 甲油、洗发水和沐浴液等数百种产品中。邻苯二甲酸二丁酯是半挥发性化合物，不与终产品 共价结合，在生产和生活中，被不断地释放到大气、土壤和水环境中。环境中的邻苯二甲酸 二丁酯又通过呼吸、饮食、皮肤接触等三种途径进入人体。因此，人类正面临着越来越高的 邻苯邻苯二甲酸二丁酯暴露风险。有研究报告指出我国普通人群DBP日摄入量为12. 2ug/ kg bw,高于世界平均水平。动物模型研究和流行病学调查发现邻苯二甲酸二丁酯可以引起雄性生殖发育的 障碍。邻苯二甲酸酯还具有免疫毒性，能导致儿童产生哮喘、湿疹、鼻炎等持久性过敏症。此 外，邻苯二甲酸二丁酯还能能导致糖尿病、肥胖症等。因此，邻苯二甲酸二丁酯检测已成为食品安全、环境监测、毒理学研究等领域的重 要工作。由于邻苯二甲酸二丁酯在水环境、生物体内的含量较低，常常在检测域以下，因此 邻苯二甲酸二丁酯的含量分析是一件非常困难的工作。早期用含同位素1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测生物体内邻苯二甲酸二丁酯相对含量的方法，其特征在于：（1）利用DBP结构类似物4?氨基邻苯二甲酸二丁酯作为半抗原连接载体蛋白OVA而制得人工抗原，用该人工抗原免疫小鼠所得脾细胞和瘤细胞杂交融合，而筛选得到能稳定分泌DBP单克隆抗体的细胞株，通过小鼠腹水法大量制备DBP单克隆抗体；（2）取待测生物组织样品制成冰冻切片，用（1）所得DBP单克隆抗体与生物组织样品中的DBP结合，再通过荧光二抗标示DBP的分布；（3）通过图像分析软件分析荧光强度，从单位面积荧光值计算DBP的相对含量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈明清，杨旭，曾强，魏晨曦，袁均林，丁书茂，
申请(专利权)人：华中师范大学，
类型：发明
国别省市：