当前位置: 首页 > 专利查询>江南大学专利>正文

通过N端替换提高GH10木聚糖酶热稳定性的方法技术

技术编号:8484843 阅读:252 留言:0更新日期:2013-03-28 04:12
本发明专利技术的目的是提供一种GH10木聚糖酶Aus?Xyn10A热稳定性改造及重组突变酶的高效表达和纯化方法。依据Aus?Xyn10A(源于Aspergillus?usamii?E001)与耐热木聚糖酶(源于Thermoascus?Aurantiacus?751K6A)蛋白质序列比对结果,运用基因工程的方法将耐热酶的N末端区域序列替换Aus?Xyn10A的对应序列。获得的突变酶命名为ATx10AM。实验结果表明突变后该酶的最适温度和热稳定性有了明显的提高,作为一种耐热型的酶制剂,该木聚糖酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及GHlO木聚糖酶改造及突变酶的高效表达方法,属于生物工程

技术介绍
木聚糖酶是可将木聚糖降解成低聚木糖和木糖的一类酶的总称。狭义上木聚糖酶特指 β _1,4-内切木聚糖酶(endo-β-1,4-xylanase, EC 3· 2·1. 8)。β-1,4-内切木聚糖酶可以从主链内部作用于木糖苷键,是木聚糖降解过程中最重要的酶之一。目前所克隆的木聚糖酶大多属于F/10和G/11家族,第10家族木聚糖酶与第11家族相比具有底物特异性低、水解速度快、水解产物聚合度低,具有较大的研究和应用价值。木聚糖酶在造纸、食品、能源、饲料及环境等领域中具有广阔的应用前景,特别是在纸浆生物漂白中的巨大应用潜力早已引起各界的高度关注。然而,目前工业生产的大多为原始菌直接发酵所得到的木聚糖酶,其最适反应温度大多在45-55°C左右,且热稳定性较差,大大制约了木聚糖酶在饲料、造纸等行业中高温环境下的应用,如Alves-Prado等在巴西塞拉多地区的土壤中分离到一株高产木聚糖酶的细菌Lysinibacillussp. strain P5B1,该木聚糖酶的最适作用温度为55°C ;Menon本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种改造后的源自宇佐美曲霉(Aspergillus?usamii)E001、归属于GH10家族的木聚糖酶基因ATx10AM,其对应的基因和蛋白质序列分别为SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:邬敏辰汪俊卿殷欣李剑芳
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1