降解脐橙囊衣微生物、含有其的酶制剂及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种降解脐橙囊衣微生物、含有其的酶制剂及应用。其中，该微生物的保藏名称为黑曲霉C-2（Aspergillus?sp.C-2），保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC?NO:M?2012160。采用本发明专利技术的微生物降解脐橙囊衣的微生物制备的酶制剂不涉及酸碱的大量使用，通过生物酶解作用进行脐橙囊衣的脱除，因此可大大提升生产效率、减少脐橙果破碎率、使产品质量稳定，并且能够降低生产成本，无残留、绿色环保、安全性高、不污染环境。该酶制剂的使用简单便捷，对脐橙囊衣作用高效、完全，分解彻底，且不损伤内部橙汁胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程
，具体而言，涉及一种降解脐橙囊衣微生物、含有其的酶制剂及应用。
技术介绍
我国柑橘加工长期沿袭着人工剥皮和酸碱脱囊衣等传统工艺生产。现有酸碱法脱囊衣的酸碱处理法主要有经典酸碱二步法、改良重酸二步法、磷酸盐NaOH —步法，以及EDTA或Na2-EDTA (乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二钠)为助 剂的低碱去囊衣法。人工去皮和酸碱脱囊衣工艺存在劳动密集、生产效率低、产品质量不稳定等问题。目前工业化罐头生产脱囊衣耗水量大，每吨产品耗水量达6(T80吨，不仅增加产品成本，而且加剧了饮用水资源的短缺。同时，因大量使用碱，产生大量的工业碱液废水，增加了产品的生产成本，也污染环境，影响了产品的安全性，容易遭遇技术壁垒和绿色壁垒，削弱了我国柑橘罐头工业在国际市场的竞争优势。同时，在柑橘加工生产中产生了约占柑橘加工量30%左右的皮渣，通常都被丢弃掉，不仅造成资源浪费，也给环境带来了污染。脐橙加工中脱囊衣工艺是其主要技术难点之一。目前橙汁胞的生产技术主要采用传统柑橘罐头酸碱处理的工艺，存在人工剥皮、分瓣，生产效率低的问题；酸碱囊衣用水量大，环境污染严重，产品安全性低；由于柑橘皮与脐橙皮结构的差异，导致现有的柑橘酶法去囊衣技术不适合于脐橙橙汁胞的加工。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种降解脐橙囊衣微生物、含有其的酶制剂及应用，以解决现有技术中酸碱脱脐橙囊衣工艺生产效率低、产品质量不稳定并且存在环境及食品安全的技术问题。根据本专利技术的一个方面，提供一种降解脐橙囊衣微生物。该微生物的保藏名称为黑曲霉C-2 (Aspergillus sp. C_2)，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCN0:M2012160o根据本专利技术的另一个方面，提供一种降解脐橙囊衣微生物在制备降解脐橙囊衣酶制剂中的应用。根据本专利技术的再一个方面，提供一种降解脐橙囊衣酶制剂。该降解脐橙囊衣酶制剂采用上述降解脐橙囊衣微生物制得。进一步地，采用降解脐橙囊衣微生物经菌种发酵培养、液体深层发酵或固态发酵培养制得。进一步地，液体深层发酵或固态发酵培养之前进一步包括活化、制备孢子悬浮液、种子培养的步骤。进一步地，该酶制剂包括将酶制剂经过超滤、浓缩制得浓缩酶制剂，或将酶制剂制备成粉剂或颗粒剂。根据本专利技术的又一个方面，提供一种上述降解脐橙囊衣酶制剂在脐橙、柑橘脱囊衣上的应用。进一步地，包括以下步骤将酶制剂稀释到酶活为8 X IO3 10 X 103u/g :将稀释后的酶制剂与削皮脐橙以质量比为3 1的比例混合，45 50°C保温9(Tl20min传统酸碱脱囊衣工艺存在重金属残留等不安全因素，而采用本专利技术的降解脐橙囊衣的微生物制备的酶制剂不涉及酸碱的大量使用，通过生物酶解作用进行脐橙囊衣的脱除，因此可大大提升生产效率、减少脐橙果破碎率、使产品质量稳定，并且能够降低生产成本，无残留、绿色环保、安全性高、不污染环境。该酶制剂的使用简单便捷，对脐橙囊衣作用高效、完全，分解彻底，且不损伤内部橙汁胞。降解脐橙囊衣酶制剂发酵产酶工艺简单，并且能够达到节能降耗、节约用水、保护环境、清洁生产的目标。具体实施例方式需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相 互组合。下面将结合实施例来详细说明本专利技术。根据本专利技术一种典型的实施方式，提供一种降解脐橙囊衣微生物。该微生物的保藏名称为黑曲霉C-2(Aspergillus sp. C-2)，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC N0:M 2012160，保藏日为2012年5月7日。本专利技术的降解脐橙囊衣微生物是通过以下步骤筛选获得的从腐烂脐橙表面、土壤等样品中筛选目标菌株，然后经过紫外诱变后，通过反复的筛选获得对脐橙囊衣具有高效降解作用的菌株。本专利技术的准用菌株经鉴定为黑曲霉C-2 (Aspergillus sp.C-2)，其主要生物学特征为在固体培养基上，培养3d 5d，菌落蔓延迅速，初为白色，后变成褐色直至黑色厚绒状，背面无色或中央略带黄褐色。分生孢子头褐黑色放射状，分生孢子梗长短不一。顶囊球形，双层小梗。分生孢子褐色球形。顶部形成球形顶囊，其上全面覆盖一层梗基和一层小梗，小梗上长有成串褐黑色的球状，直径2. 5 4.0 Pm。分生孢子头球状，直径700 800 ym，褐黑色。分生孢子头褐黑色放射状，分生孢子梗长短不一。分生孢子梗自基质中伸出长约I 3mm,壁厚而光滑。根据本专利技术一种典型的实施方式，提供一种降解脐橙囊衣酶制剂。该酶制剂采用上述降解脐橙囊衣微生物制得。由于该降解脐橙囊衣酶制剂不涉及酸碱的大量使用，通过生物酶解作用进行脐橙囊衣的脱除，因此可大大提升生产效率、减少脐橙果破碎率、使产品质量稳定，并且能够降低生产成本，无残留、绿色环保、安全性高、不污染环境。优选地，该酶制剂采用上述降解脐橙囊衣微生物经液体深层发酵或固态发酵培养制得。根据本专利技术一种典型的实施方式，提供一种降解脐橙囊衣酶制剂的制备方法。该制备方法包括采用上述黑曲霉C-2作为发酵菌株，经过液体深层发酵或固态发酵培养制备得到降解脐橙囊衣酶制剂。在脐橙囊衣的脱除过程中起主要作用的是该黑曲霉C-2及其代谢物，因为此制备也可以采用现有技术中的常规方法进行，优选地，黑曲霉C-2经过液体深层发酵或固态发酵培养制备得到降解脐橙囊衣酶制剂，因为这些酶制剂的制备方法简单，便于工业化生产，而且不会造成环境污染。优选地，液体深层发酵或固态发酵培养之前进一步包括活化、制备孢子悬浮液、种子培养的步骤，增加这些步骤可以使菌株的活性增强，有利于酶制剂的生产效率提高，以及在后续使用过程中使酶制剂保持较高的活性。根据本专利技术一种典型的实施方式，活化包括将黑曲霉C-2接种于培养基中进行活化，培养基的PH值为7. 0 7. 2，活化温度控制在28°C 30°C，活化时间为I 2天。冷冻保藏的产酶黑曲霉C-2菌种细胞通过该活化程序，可使该微生物产酶的能力快速恢复正常。根据本专利技术一种典型的实施方式，种子培养包括将活化的孢子悬浮液接种于种子液体培养基中，控制种子液体培养基的PH值为7. 0 7. 2，培养温度控制在28°C 30°C，200r/m培养12 16h，最终获取一定数量和质量的纯种子，可作为大规模发酵生产的菌种。根据本专利技术一种典型的实施方式，液体深层发酵培养包括将经过种子培养的含黑曲霉C-2的种子液体培养基接种于发酵瓶中进行深层发酵培养，发酵培养条件为12h内温度为30°C，12h 后 28°C ；pH 值为 7. 0 7. 2 ;压力位 0. 06MPa 0. 08MPa ;搅拌速度 12h 内 180r/m, 12h后200r/m ;通气量1:1. 0 1. 5 ;发酵时间108 120h，制得酶制剂。通过液体深层发酵能够保证养分均匀分配和氧气充足，具有发酵产酶生产周期短、产量高、效益大等优点。根据本专利技术一种典型的实施方式，固态发酵培养的步骤包括经过所述种子培养的含黑曲霉C-2的所述种子固体培养基接种入固态发酵培养基中，30°C培养108h，得到黑曲霉C-2固态发酵曲，所述固态发酵曲通过低温干燥及粉碎后制得所述酶制剂，或通过0. 5mol/L pH=6. 5磷酸缓冲液中浸提获得所述酶制剂。固态发酵模拟菌种自然生长环境，使微本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种降解脐橙囊衣微生物，其特征在于，所述微生物的保藏名称为黑曲霉C?2，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO:M?2012160。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵良忠，尹乐斌，李文，伍桃英，肖凯，郭育齐，周小虎，蒋琼华，周晓洁，
申请(专利权)人：湖南李文食品有限公司，
类型：发明
国别省市：