一种降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂及其制备方法，本发明专利技术产品中数量巨大的有益微生物复合种群优势微生物增殖过程中产生的抗氧化物质进入动物肠道后，能快速清除体内自由基，减轻应激反应对机体的影响，增强抵抗力；本发明专利技术成分天然，无毒无残留无耐药性；同时，产品独特发酵醇香具有极强诱食效果，降低饵料系数。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物制剂制备
，尤其涉及一种降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂及其制备方法。
技术介绍
南美白对虾是世界上养殖产量最高的三大对虾品种之一，由于其肉质鲜美,适宜淡化养殖，逐渐成为我国水产的主要养殖品种之一。抗氧化系统是存在于所有需氧生物体内的一系列抗氧化酶和抗氧化剂的总称，主要功能是清除体内过剩的氧自由基,保护机体免受损伤.。虾类作为重要的养殖动物，其养殖过程受到更多的关注。养殖业集约化规模化发展给维持优良的养殖生态环境带来了承重的压力。集约化养殖中的虾类面临着各种环境应激，如水体的盐度、pH值和温度等元素的激烈变化容易诱发疾病甚至死亡。
技术实现思路
本专利技术为通过在对虾抗氧化系统中抗氧化酶的活性的提高，增强其免疫机能及抗病能力，降低外界环境对对虾健康养殖的影响。为了实现上述技术目的，本专利技术提供的技术措施为：一种降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：步骤一，制备复合微生物菌原液将啤酒酵母菌、干酪乳杆菌、沼泽红假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌分离出单菌株并分别进行增殖培养，然后将各个菌株的培养液混合获得复合微生物菌原液；步骤二，制备复合酶溶液将木聚糖酶、纤维素酶、糖化酶、脂肪酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶及余量水搅拌均匀，获得复合酶溶液；步骤三，混合发酵将步骤一获得的复合微生物菌原液、步骤二获得的复合酶溶液、培养基及余量水相互混合进行厌氧发酵，发酵结束后，将发酵产物置于低温干燥箱内进行干燥；步骤四，粉碎过筛将步骤三处理后的发酵产物进行粉碎，然后过筛网，获得降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂。为了进一步优化上述技术方案，本专利技术所采取的技术措施还包括：进一步地，所述步骤一中啤酒酵母菌的增殖培养为将分离的啤酒酵母菌接种于含有糖蜜15%、硫酸铵2.5%、磷酸二氢钾0.3%的培养基中，在pH为5.5，温度为25-35℃的条件下进行增殖培养。进一步地，所述步骤一中干酪乳杆菌的增殖培养为将分离的干酪乳杆菌接种于含有豆粕2.5%、葡萄糖1%、酵母浸膏1%、七水硫酸镁0.05%、磷酸二氢钾0.02%的培养基中，在pH为5.5，温度为25-35℃的条件下进行增殖培养。进一步地，所述步骤一中沼泽红假单胞杆菌的增殖培养为将分离的沼泽红假单胞菌接种于含乙酸钠0.2%、酵母膏0.15%的培养基中，在pH值为7-7.5，温度为25-35℃的条件下进行增殖培养。进一步地，所述步骤一中枯草芽孢杆菌的增殖培养为将分离的枯草芽孢杆菌接种于含蛋白胨0.8%、葡萄糖1.8%、氯化钠0.05%、酵母膏1.8%、硫化镁0.04%的培养基中，在pH值为5-8.5，温度为25-35℃的条件下进行增殖培养。进一步地，所述步骤一中各个菌株的培养液混合的重量比例为枯草芽孢杆菌30-50%、啤酒酵母菌20-40%、干酪乳杆菌10-30%、沼泽红假单胞菌20-40%。进一步地，所述步骤二中复合酶溶液的配制比例为：木聚糖酶10-12份纤维素酶12-14份糖化酶13-15份脂肪酶11-15份α-淀粉酶14-16份β-淀粉酶12-13份余量水。进一步地，所述步骤三中厌氧发酵的条件为在pH值为6，培养温度为30℃的条件下进行厌氧发酵7天，发酵结束后，将发酵产物置于低温干燥箱内进行干燥，干燥时间为6-12小时，干燥温度为30-45℃。进一步地，所述步骤三中的培养基由豆饼粉、玉米粉、玉米淀粉、尿素、硫酸铵、硫酸二氢钾、磷酸氢二钠、硫酸镁、米糠粉组成，重量配比为豆饼粉8-20%、玉米粉15-25%、玉米淀粉0-10%、尿素0-1%、硫酸铵0-1%、硫酸二氢钾0.05-0.08%、磷酸氢二钠0.1-0.5%、硫酸镁0-0.5%、米糠粉40-85%。进一步地，所述步骤四中过筛为过50目筛网。另一方面，本专利技术也提供通过上述的制备方法制备得到的降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂。本专利技术采用上述技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：本专利技术解决了高集约化对虾养殖中各种应激因素产生的影响。复合微生物菌群原液与培养基通过特有的同步发酵技术，能有效清除对虾体内的OH自由基，降低血清中皮质醇和血糖浓度，缓解应激反应对机体的影响，增加抵抗力。在饲料中添加，可降低对虾的应激反应；本专利技术成分天然，无毒无残留无耐药性；本专利技术产品中数量巨大的有益微生物复合种群优势微生物增殖过程中产生的抗氧化物质进入动物肠道后，能快速清除体内自由基，减轻应激反应对机体的影响，增强抵抗力；同时，产品独特发酵醇香具有极强诱食效果，降低饵料系数。具体实施方式本专利技术提供了一种降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：步骤一，制备复合微生物菌原液将啤酒酵母菌、干酪乳杆菌、沼泽红假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌分离出单菌株并分别进行增殖培养，然后将各个菌株的培养液混合获得复合微生物菌原液；步骤二，制备复合酶溶液将木聚糖酶、纤维素酶、糖化酶、脂肪酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶及余量水搅拌均匀，获得复合酶溶液；步骤三，混合发酵将步骤一获得的复合微生物菌原液、步骤二获得的复合酶溶液、培养基及余量水相互混合进行厌氧发酵，发酵结束后，将发酵产物置于低温干燥箱内进行干燥；步骤四，粉碎过筛将步骤三处理后的发酵产物进行粉碎，然后过筛网，获得降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂。下面通过具体实施例对本专利技术进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本专利技术，但是下述实施例并不限制本专利技术范围。实施例一本实施例中，混合比例为：复合微生物菌原液40%复合酶制剂溶液5-10%培养基40%水20%培养基由豆饼粉、玉米粉、玉米淀粉、尿素、硫酸铵、硫酸二氢钾、磷酸氢二钠、硫酸镁、米糠粉组成，重量配比为豆饼粉8%、玉米粉15%、玉米淀粉5%、尿素0.5%、硫酸铵0.5%、硫酸二氢钾0.05%、磷酸氢二钠0.1%、硫酸镁0.1%、米糠粉40%。具体操作步骤如下：第一步：从来源于中国农业微生物菌种保藏中心的啤酒酵母菌、干酪乳杆菌、沼泽红假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌分离出单菌株。第二步：将分离的啤酒酵母菌接种于含有糖蜜15%、硫酸铵2.5%、磷酸二氢钾0.3%、pH5.5进行培养，温度25℃进行增殖培养。第三步：将分离的干酪乳杆菌接种于含有豆粕2.5%、葡萄糖1%、酵母浸膏1%七水硫酸镁0.05%、磷酸二氢钾0.02%的培养基中，pH值5.5进行培养，温度25℃进行增殖培养。第四步：将分离的沼泽红假单胞菌接种于乙酸钠0.2%、酵母膏0.15%的培养基中，pH值7，温度25℃进行增殖培养。第五步：将分离的枯草芽孢杆菌接种于蛋白胨0.8%、葡萄糖1.8%、氯化钠0.05%、酵母膏1.8%、硫化镁0.04%的培养基中，pH值5，温度25℃进行增殖培养。第六步：木聚糖酶0.1、纤维素酶0.12、糖化酶0.13、脂肪酶0.11、α-淀粉酶0.14、β-淀粉酶0.12，总重量0.4倍的水混合搅拌均匀之后，得复合酶溶液备用。第七步：将增殖培养后的菌种按照枯草芽孢杆菌30%、啤酒酵母菌20%,干酪乳杆菌10%，沼泽红假单胞菌20%的比例，接种于培养基与水的混合物中，pH值6，培养温度30℃，进行厌氧发酵，发酵时间7天。第八步：发酵结束后，进入低温干燥箱内进行干燥，干燥时间为6小时，温度30℃。第九步：入粉碎间进行粉碎，再过本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，制备复合微生物菌原液将啤酒酵母菌、干酪乳杆菌、沼泽红假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌分离出单菌株并分别进行增殖培养，然后将各个菌株的培养液混合获得复合微生物菌原液；步骤二，制备复合酶溶液 将木聚糖酶、纤维素酶、糖化酶、脂肪酶、α‑淀粉酶、β‑淀粉酶及余量水搅拌均匀，获得复合酶溶液；步骤三，混合发酵将步骤一获得的复合微生物菌原液、步骤二获得的复合酶溶液、培养基及余量水相互混合进行厌氧发酵，发酵结束后，将发酵产物置于低温干燥箱内进行干燥；步骤四，粉碎过筛将步骤三处理后的发酵产物进行粉碎，然后过筛网，获得降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂。

【技术特征摘要】
1.一种降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，制备复合微生物菌原液将啤酒酵母菌、干酪乳杆菌、沼泽红假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌分离出单菌株并分别进行增殖培养，然后将各个菌株的培养液混合获得复合微生物菌原液；步骤二，制备复合酶溶液将木聚糖酶、纤维素酶、糖化酶、脂肪酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶及余量水搅拌均匀，获得复合酶溶液；步骤三，混合发酵将步骤一获得的复合微生物菌原液、步骤二获得的复合酶溶液、培养基及余量水相互混合进行厌氧发酵，发酵结束后，将发酵产物置于低温干燥箱内进行干燥；步骤四，粉碎过筛将步骤三处理后的发酵产物进行粉碎，然后过筛网，获得降低南美白对虾体内自由基的天然微生物制剂。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤一中啤酒酵母菌的增殖培养为将分离的啤酒酵母菌接种于含有糖蜜15%、硫酸铵2.5%、磷酸二氢钾0.3%的培养基中，在pH为5.5，温度为25-35℃的条件下进行增殖培养。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤一中干酪乳杆菌的增殖培养为将分离的干酪乳杆菌接种于含有豆粕2.5%、葡萄糖1%、酵母浸膏1%、七水硫酸镁0.05%、磷酸二氢钾0.02%的培养基中，在pH为5.5，温度为25-35℃的条件下进行增殖培养。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤一中...

【专利技术属性】
技术研发人员：李艳，
申请(专利权)人：上海普缇康生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31